饲料中不同磷浓度对草鱼生长性能的影响

■ 肖顺应 叶元土 金素雅，3 李 宾 向朝林 殷永风 马 红

（1.苏州大学基础医学与生物科学学院，江苏苏州215123；2.浙江科盛饲料股份有限公司，浙江绍兴312046；3.温州市龙湾区渔业技术推广站，浙江温州325011）

磷是鱼类最重要的营养素之一。本试验设计了以酪蛋白、明胶、纤维素和豆油等为基础的纯化饲料，以磷酸二氢钙为磷源，通过在纯化饲料中添加不同浓度梯度的磷酸二氢钙对草鱼进行投喂，对草鱼纯化饲料中磷的适宜浓度添加量和磷缺乏对草鱼的影响进行了研究，旨在为草鱼饲料中磷水平的添加提供依据。

1 试验材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验动物及原料

草鱼（Ctenopharyngodon idellus）幼鱼由苏州市相城区特种水产养殖场提供；磷酸二氢钙由无锡华诺威动物保健品有限公司提供；酪蛋白、糊精、明胶、羧甲基纤维素钠、微晶纤维素、无水氯化钙购于国药集团化学试剂有限公司；玉米淀粉购于苏州莲花五区农贸市场。

1.1.2 试验饲料

根据草鱼的配合饲料营养标准设计配方（SC/T 1024—2002），饲料配方及营养水平见表1。

在以酪蛋白、豆油、淀粉、糊精和纤维素为原料的纯化饲料中分别添加磷酸二氢钙0、13、29、45、61、77 g/kg，饲料原料经粉碎过60目筛，混合均匀，用小型面条加工机加工成1.5 mm粗细的条状料，电风扇条件下干燥后再手工搓碎，筛选3～4 mm长的颗粒饲料置于冰箱中4℃密封保存。

1.2 试验方法

1.2.1 饲养管理

试验草鱼300余尾，初始平均重量为22.29 g，为池塘养殖的一冬龄鱼种。试验鱼经一周暂养、驯化后，选择体格健壮、规格整齐的鱼种随机分为6个组，每组设3个重复，每个重复放鱼15尾，分别投喂饲料Ⅰ～Ⅵ。正式养殖试验75 d。

养殖设施为室内养殖系统，单缸直径70 cm，养殖容积0.23 m3，以曝气自来水为水源，使用间歇性控电开关调节水体，每进水20 min关闭40 min，反复循环，缸的出水直接排走。定期使用水博士水质测定盒测量水质。养殖期间水质条件为：水温20～26℃、溶解氧6.0 mg/l以上、pH值7.0～7.4、氨氮含量0.20～0.40 mg/l、亚硝酸盐氮0.05～0.1 mg/l。试验饲料于每天8：00、12：00、17：30各投喂一次，投喂量为各试验组鱼体体重的2%～3%。

表1 试验饲料组成及营养水平

1.2.2 样品的分析方法

用烘干失重法（GB 6435—86）测定水分；微量凯氏定氮法（GB/T 6432—94）测定粗蛋白；索氏抽提法（GB/T 6433—94）测定粗脂肪；马弗炉灰化法测定灰分；EDTA快速滴定法测定钙含量；钒钼酸铵显色法测定磷含量；血清总蛋白（TP）、血糖（GLU）、胆固醇（CHO）等血清生化指标采用CHEMIX-800全自动生化分析仪测定；SOD、溶菌酶及肝胰脏GPT（谷丙转氨酶）和GOT（谷草转氨酶）采用南京建成生物工程研究所试剂盒测定。

1.2.3 数据统计与分析

试验所得数据采用EXCEL和SPSS 17.0统计软件进行单因素统计分析。

2 试验结果

2.1 对生长性能的影响（见表2）

表2 投喂不同磷含量饲料草鱼的增重率、特定生长率、肥满度和肝体指数

由表2可知，饲料中磷水平影响草鱼的增重率、特定生长率、肥满度和肝体指数。与Ⅰ组相比较，饲料中添加不同含量的磷对草鱼增重率有显著的影响（P＜0.05），Ⅲ组草鱼增重率最高；对特定生长率有显著影响（P＜0.05），Ⅲ组草鱼特定生长率明显高于其他组；对肥满度没有显著性影响，但Ⅲ组肥满度最高；对肝体指数有显著性影响（P＜0.05），Ⅲ组肝体指数最高，且肝体指数随着饲料中磷浓度的增加呈先升高再降低的趋势。

2.2 对草鱼体组成的影响（见表3）

表3 投喂不同磷含量饲料草鱼机体组成（%）

由表3可知，饲料磷水平对草鱼肝胰脏的水分、粗蛋白含量没有显著性影响，对粗脂肪含量有不同程度的影响，当饲料磷水平为8.07 g/kg（试验Ⅲ组）时，肝胰脏粗脂肪含量最低。饲料磷水平对全鱼粗脂肪（Ⅲ组）含量影响不显著，但全鱼粗脂肪含量有随着饲料磷水平的增加而减低的趋势。饲料磷水平对草鱼肌肉粗脂肪含量有不同程度的影响，高磷饲料组的草鱼肌肉粗脂肪含量高于低磷饲料组。对草鱼肌肉蛋白成分的影响，Ⅰ组的粗蛋白含量最高且显著高于Ⅲ、Ⅴ和Ⅵ试验组（P＜0.05），其余5组蛋白含量没有显著性差异。

2.3 对草鱼钙磷代谢的影响（见表4）

表4 草鱼各组分磷含量与饲料磷的相关性

由表4可知，饲料磷水平对草鱼全鱼灰分和钙含量有不同程度的影响，但是影响规律不明显；饲料磷水平对草鱼全鱼磷含量，鳃盖骨灰分和钙含量，脊椎骨灰分、钙、磷含量以及血清钙、磷含量没有显著性影响（P＞0.05）；鳃盖骨磷含量随着饲料磷水平的增加而显著降低（P＜0.05）。

由表4可知，全鱼、鳃盖骨的磷含量与饲料磷含量的相关系数分别为0.74、-0.97，其余指标与饲料磷水平相关性不强。表明全鱼磷含量和鳃盖骨磷含量对饲料磷的添加水平变化较为敏感。

2.4 对血清生化指标的影响（见表5）

由表5可知，饲料磷水平对草鱼血清GPT、GOT转氨酶含量有不同程度的影响，当饲料磷水平为11.63 g/kg（Ⅳ组）时，草鱼血清的GPT和GOT含量最低；饲料磷水平对草鱼的肝胰脏合成储备功能指标总蛋白、白蛋白和球蛋白含量没有显著影响（P＞0.05）。磷水平对草鱼血清葡萄糖含量没有显著影响（P＞0.05）。不同试验组血脂四项之间没有显著差异（P＞0.05）。饲料磷水平对草鱼血清的非特异性免疫指标溶菌酶活力有不同程度的影响，但是各试验组的变化规律不明显。饲料磷水平影响草鱼血清SOD活力，在饲料中磷的添加水平为8.07 g/kg（Ⅲ组）时，草鱼血清SOD活力含量最高。

表5 投喂不同磷含量饲料草鱼的血清生化指标

3 讨论

3.1 饲料磷含量对草鱼脂肪肝的影响

脂肪肝是养殖鱼类常见的营养性疾病之一。引起脂肪肝症（Fatty Liver Syndrome）的原因很多，大量研究表明，遗传、营养、环境、有毒物质等原因均可导致脂肪肝症的发生，发病机理和脂肪代谢有关，由肝细胞合成的增加和氧化减少引起的[1]。鱼类脂肪肝形成主要由于集约化养殖，养殖密度加大，生产周期缩短；同时投喂营养不平衡的人工配合饲料造成养殖鱼类的营养代谢紊乱。肝脏脂肪代谢失调后，肝脏中脂肪含量升高，从而导致脂肪肝发生。

本研究显示，饲料中磷的添加对试验草鱼的肥满度没有显著性影响，但是投喂添加不同磷浓度饲料的试验鱼肝体指数有显著差异（P＜0.05），在Ⅲ、Ⅳ组，肝体指数达到最高，与EI-Zibdeh[2]在大黄鱼中发现肝体指数与饲料中磷含量呈负相关关系结论不同。可见饲料磷浓度对鱼体的肝胰脏有重要的影响。本研究中，草鱼肝脏的粗脂肪含量随着饲料中磷浓度的增加有降低的趋势，在无磷组饲料中，脂肪含量最高，说明饲料磷的缺乏可能导致脂肪肝的发生。与胡王龙[3]在黑鲷、Sakamoto等[4]在鲤鱼上的研究结果一致。在本试验中，血清中的甘油三酯和胆固醇的含量都是Ⅳ含量最高，两者都有随着磷含量的增加而先增大再减小的趋势，在Ⅳ组达到最高然后随着磷含量的增加而降低，这与胡王龙[3]在黑鲷的研究中得出的随着饲料磷的增加，血浆甘油三酯和总胆固醇含量有下降趋势的结果相反，也与EI-Zibdeh[2]在大黄鱼的研究发现，血清中甘油三酯和总胆固醇含量随饲料中磷水平的升高而降低，具有明显的线性关系的研究结果具有一定的差异。可能是由于鱼种的差异、养殖环境以及取样的差异造成的。几方面的结论说明在草鱼饲料中磷缺乏是会导致鱼体肝胰脏脂肪肝的发生。Takeuchi等[5]在鲤鱼饲料磷和脂肪关系的研究以及Sakamoto[6]在真鲷中的研究认为，饲料中磷含量的增加可降低鱼体水分和脂肪的含量，同时增加蛋白的含量。这些研究者认为，抑制脂肪酸的β-氧化可能导致鱼体内脂肪的大量积累，线粒体外游离脂肪酸和线粒体外辅酶在三磷酸腺苷酶催化作用下进行催化反应生成酰基辅酶A进入线粒体，而这一过程中每激活一分子脂肪酸需要消耗两个ATP，磷酸盐缺乏可能会抑制这一过程，导致机体利用脂肪供能的能力降低，从而导致过多的脂肪在体内累积。

3.2 对生长的影响和磷缺乏的标志

本试验的研究结果显示，饲料中适量无机磷的添加对草鱼的生长有明显的促进作用，当饲料总磷含量为8.07 g/kg（Ⅲ组）时，草鱼的增重率和特定生长率明显升高，进一步增加磷的含量，则生长有下降的趋势。Roy等[7]研究发现，饲料磷水平对黑线鳍鱼的生长有显著的影响，随着饲料磷水平的增加其增重率也增加，但当饲料磷水平达到1.02%时，其增重率随着饲料中磷含量水平的增加而呈降低趋势。胡王龙[3]对黑鲷幼鱼的研究、EI-Zibdeh[2]对大黄鱼的研究、Rodehutscord等[8]对虹鳟和Jokinen等[9]对欧洲白鲟的研究中也有类似的结论。由此可以推论，饲料中磷的含量对鱼体的正常生长具有重要的作用，在适量的添加范围内能有效地促进鱼体的生长，如果磷不足或者磷过量都会对鱼体的生长造成阻碍作用。阻碍生长的原因可能是由于大部分磷被分配用于维持其它生理代谢过程，而用于生长的磷不足，因此阻碍鱼体的生长发育，导致低磷饲料组增重降低[10]。

在鱼类营养研究中，关于磷缺乏的标志，国内外在不同的鱼类上已经有了众多的研究，鱼体灰分和磷含量常被作为鱼体磷状况的评价指标[11-12]，脊椎骨中磷含量更是由于磷在骨骼中的重要作用而成为反映鱼体磷营养状态更为灵敏的指标[13-17]。

其它的磷缺乏的标志还包括生长缓慢[18]、摄食率低[16]、骨骼矿化低[19]、鳃盖和鳞片磷含量低[20]、骨骼软化和骨骼畸形[16]等。在本试验研究中，各组分磷指标与饲料磷水平相关系数最高的为草鱼全鱼磷含量，而鳃盖骨磷含量与饲料磷水平有较高的负相关关系，因此认为草鱼全鱼磷含量和鳃盖骨磷含量可以作为饲料磷水平判定的灵敏指标。关于饲料磷水平相对应的磷水平判定指标的范围值尚待进一步的研究。

4 结论

①在本试验条件下，草鱼对纯化饲料中的磷需求量浓度为8.07 g/kg，过高或过低都不利于草鱼的生长。

②鳃盖骨磷含量和全鱼磷含量可作为草鱼磷缺乏的一个判断标志。