福建省家兔球虫病感染情况调查

陈冬金，陈岩锋，谢喜平，孙世坤，桑 雷

（福建省农业科学院畜牧兽医研究所，福建福州350013）

兔球虫病（rabbit coccidiosis）是一种由艾美耳属（Eimeria）的球虫寄生于家兔肝胆管及肠上皮细胞的寄生性原虫病，是兔最常见的疾病之一，流行极为普遍，1～3月龄的幼兔易感染，感染率高达90%以上，患病的幼兔死亡率高达70%，成年兔也常表现为带虫者。兔球虫基本寄生于肠粘膜上皮细胞内除斯氏艾美尔球虫（寄生于胆管上皮细胞内）外，发病兔大部分是混合感染，而且是同时感染几种球虫。对兔养殖户造成了严重的经济损失，阻碍了兔业的健康发展。对兔球虫病的防治工作，是每个养殖场的必要工作，目前主要是靠药物和环境卫生进行预防，但极易产生耐药性，所以有针对性地对兔场进行兔球虫感染的情况和种类调查，对兔球虫病防治具有指导意义，目前国内外报道的家兔球虫有16 个种。福建省过去尚未对家兔球虫进行较大面积的普查，对兔球虫的感染情况不甚了解，为该省球虫病的有效防治与研究提供科学依据，开展了该省家兔主要球虫种类及感染率的调查研究。

1 材料与方法

1.1 试验时间和地点

2012～2013年，在福州市连江县，泉州市德化县，南平市，三明市，龙岩市上杭县、连城县、武平县，宁德市，福鼎市等地开展球虫病感染情况的调查。

1.2 仪器设备与试剂

Olympus倒置显微镜、显微摄影机、显微细胞图像处理系统软件、钢丝圈粪筛（120目）、烧杯、玻璃棒、盖玻片、载玻片；饱和盐水、生理盐水、2.5%重铬酸钾溶液等。

1.3 粪样采集

以个体采样法随机采集了上述八个地区的不同兔场幼兔和种兔的粪样，每个粪样10g左右，将所采兔粪放入洁净的自封袋中，做好记号，置4℃冰箱保存备用。

1.4 虫卵的收集与鉴定

取新鲜兔粪5 克，置于容量为100 mL 烧杯中，加入少量饱和食盐溶液搅拌溶解后，再加饱和食盐水（盐水总量约为粪量的10倍）搅匀。用120目孔网筛，将上述粪液过滤到另一个烧杯内，弃去粪渣。将滤液静置30min后，卵囊浮在液面上，再用金属环平着接触液面，沾取一层水膜，抖落到载玻片上，加盖玻片后镜检，每个样品制作三个玻片。制片后于光学显微镜下观察，发现球虫卵囊者判为阳性并按下列标准判定其感染强度：每个粪样镜检时，若平均每个视野不超过5 个卵囊记为“＋”，6～10个卵囊记为“＋＋”，11～20个卵囊个记为“＋＋＋”，≥21 个以上卵囊记为“＋＋＋＋”，未发现卵囊记为“－”。

以兔场为单位，将每个兔场的球虫阳性粪便收集到干净烧杯中，用饱和氯化钠溶液漂浮法收集卵囊，然后用2.5%重铬酸钾溶液悬浮卵囊，放到干净培养皿中，混匀，液面高度小于5mm，做好标记，放于28 ℃摇床内孢子化培养48～72h，每隔12h观察孢子化情况，使其孢子化率达80%以上，收集孢子化卵囊放于4 ℃冰箱内保存。在光镜下利用显微测微尺测量卵囊的大小，每一种球虫测量10 个卵囊；观察卵囊的形态、颜色、孢子囊的形态、卵膜孔的有无、内外残体和斯氏体的有无等。在高倍镜（400×）下对对孢子化卵囊进行显微拍照。然后根据卵囊特征，参照文献［1－6］对孢子化卵囊进行初步虫种鉴定。

1.5 数据处理

利用Excel对各个兔场家兔球虫的感染率进行统计分析。

2 结果与分析

2.1 不同地区和不同阶段家兔球虫病的感染率

在调查福建省九个县市的不同兔场中的909只兔中有400只感染，球虫感染率平均为44.00%，种兔的平均感染率为4.71%，幼兔的平均感染率为59.33%，其中福鼎兔场的球虫病感染率最高，达100%，见表1、表2。

表1 不同地区家兔球虫病的感染率Table 1 Infection rate of rabbit coccidia in various areas

表2 不同阶段家兔球虫感染率Table 2 Infection rate of rabbit coccidian

2.2 不同品种家兔感染情况的比较

从表3 可见，福建黄兔的感染率最高，高达51.52%，福建白兔的感染率最低为4.41%。

2.3 不同年度家兔感染情况

由表4可知，种兔和幼兔的感染率2013年度分别为15.63%、89.26%，明显高于2012年度的3.14%和32.85%。

2.4 球虫卵囊的形态学观察

经过调查分类鉴定.本次共发现12种艾美耳球虫，分别为斯氏艾美耳球虫、中型艾美耳球虫、大型艾美耳球虫、黄艾美耳球虫、新兔艾美耳球虫、野兔艾美耳球虫、纳格浦尔艾美耳球虫、无残艾美耳球虫、长形艾美耳球虫、穿孔艾美耳球虫、梨形艾美耳球虫、肠艾美耳球虫。具体各种球虫的形态学观察见图1（400×）。

3 讨论

本试验共调查了福建省福州、龙岩、三明、宁德等地区的12个兔场，均有球虫感染，上述所调查的县市家兔球虫病平均感染率为44.00%，最高的达100%，最低的4.41%，且均为多种球虫的混合感染。本次调查结果发现，除了南平和武平地区的感染率较低，其原因是南平兔场饲养管理水平水平较高，武平兔场是新场有关。其他的无论是规模化兔场还是农户散养的兔均感染球虫，福建省家兔普遍存在球虫感染现象，而且感染率较高。所调查家兔中幼兔的感染率较高，平均达59.33%，种兔的感染率相对较低，平均为4.71%；幼龄兔球虫感染率较高，且危害严重。姜英等［7］调查河南省幼兔感染率最高，达83.0%。连为茂等［8］对建瓯市小桥镇家兔球虫的调查发现31～60日龄感染最高达85.23% ，其次是61～90日龄达83.71%。吴小华［9］调查宁化县的结果是幼兔（2月龄至4月龄）的感染率最高，为87.77%，断乳36日龄至2月龄和4月龄至5

月龄的兔感染率次之，分别是66.15%和61.36%。崔平等［10］调查结果显示，河北省45～60日龄幼兔球虫感染率最高达96.7%；90～120日龄的青年兔球虫感染率为75.1%。祖尼萨等［11］报道，陕西杨凌1～2月龄的幼兔球虫感染率达99.4%，12～24月龄的成年兔感染率最低，为38.9%，2～3月龄兔球虫感染率最高，为75.3%，12月龄以上的兔球虫感染率最低，为51.7%，球虫感染率随兔年龄增长呈下降趋势，说明球虫对幼兔危害严重。

表3 不同品种家兔球虫感染情况Table 3 Infection rate of rabbit coccidian in different breeds

表4 不同年度家兔球虫感染情况Table 4 Infection rate of rabbit coccidian in different years

图1 福建省兔球虫的种类Fig.1 Species of rabbit coccidial in Fujian

本试验显示，福建地方家兔福建黄兔、福建白兔、闽西南黑兔与新西兰白兔四个品种间球虫的感染情况不同，福建黄兔球虫的感染率最高达51.52%，福建白兔球虫的感染率最低为4.41%。史柯等［12］在河南省部分地区兔肠道寄生虫感染情况调查中结果显示兔球虫的感染率最高，为64.11%，且兔肠道寄生虫感染在品种间差异显著，以獭兔感染率最高，达85.5%。刘杰等［13］发现，兔球虫感染率在不同品种间差异极显著，獭兔和肉兔感染率高于长毛兔，这与獭兔和肉兔饲养周期比较短，用药不严格，且大部分在粗放条件下饲养有关。

本次调查福建省地区共l2个兔场，均有球虫感染，以幼兔感染率和感染强度最高，多呈中度或重度感染。说明目前兔场球虫病控制重点依然是幼兔阶段。本研究参照国际兔球虫有效种的新分类标准发现，福建地区兔场存在12种兔球虫。本次调查出的9种兔艾美耳球虫种类与对国内不同省市地区兔场球虫感染调查结果相近，崔平等［10］根据形态学观察共鉴定出16个虫种，即：除了本试验的12种外，还有兔艾美耳球虫、微小艾美耳球虫、盲肠艾美耳球虫、松林艾美耳球虫。Jing等［14］等报道国内流行率最高的球虫种类为穿孔艾美耳球虫，其次为中型艾美耳球虫，再次为大型艾美耳球虫、无残艾美耳球虫、肠艾美耳球虫。宋鸿雁［15］等报道测出10 种艾美耳属的球虫，而马永华等［16］报道甘肃兰州地区发现了12种兔球虫，除以上10种艾美耳球虫，还报道了松林艾美耳球虫和新兔艾美耳球虫，程宝艳等［17］也报道了安徽地区发现那格浦耳艾美耳球虫。

Cere等［18］根据球虫的基因特性鉴别球虫，Oliveira［19］等运用PCR 方法鉴别了11种兔艾美耳球虫，这些方法的运用有利于从分子水平鉴定虫种。本次调查从形态学方面对兔球虫的虫种进行鉴定，为保证球虫种类鉴定结果的真实可靠性，应进一步结合分子生物学和人工感染手段进行鉴定，并扩大调查群体，获得更加可靠的数据。

4 小结

福建省2013年家兔球虫感染率比2012年明显上升，应引起各养殖户的高度重视。为了控制球虫病的发生，兔舍建筑应选择向阳、干燥的地方并要保持环境的清洁卫生。食具要勤清洗消毒，兔笼尤其是笼底板要定期用火焰消毒，以杀死卵囊。断奶以后至3月龄的兔应用药物控制球虫病的发生，且不分季节。一旦发病，应将病兔隔离，注意选择敏感药物进行防治。为防止产生抗药性，可采用几种抗球虫药物轮换使用。

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