尖吻蝮蛇血凝酶在泌尿外科手术中止血的疗效观察

周玉梅 ，周 舰，张景宇(武汉市第三医院，武汉 430060)

注射用尖吻蝮蛇血凝酶为国家Ⅰ类新药，是从尖吻蝮蛇蛇毒中提取的一种凝血酶。临床前研究证实该酶能缩短全血凝固时间和小鼠剪尾出血时间，不能激活ⅩⅢ因子，具有较好的止血作用，而且不影响血液中的凝血酶原和血小板数量，在正常血管内没有血小板凝聚作用，无血栓形成危险［1-3］。前期临床实验研究表明，该药血浆半衰期约为2．5 h，且无代谢物，其对切口出血有良好的止血效果，能明显缩短手术切口止血时间，适于围术期用药。本研究旨在观察泌尿外科手术患者中2 种剂量尖吻蝮蛇血凝酶的止血作用，并和空白对照进行比较，同时观察尖吻蝮蛇血凝酶对凝血功能的影响，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

资料来源于我院泌尿科2010 年8 月—2012 年5 月收治的前列腺增生患者147 例(均行耻骨上经膀胱前列腺摘除术)，年龄为56～79 岁;膀胱肿瘤患者33 例(均行膀胱部分切除)，年龄为50～77 岁，共计180 例。经伦理委员会批准，患者及家属签署知情同意书。将108 例患者按照可比性的原则分为A、B、C 3 组进行研究。

1.2 方法

注射用尖吻蝮蛇血凝酶(批准文号:H20080633，北京康辰药业有限公司生产):每支含1 单位冻干粉(1 U/支，批号为010910。使用前用2 ml 注射用水溶解后，于术前15 min肘静脉缓慢注射。A 组给予3 支，B 组给予2 支，C 组给于安慰剂。

1.3 疗效判断标准

止血成功:(1)患者术后脉搏正常，血压稳定，红细胞计数及血红蛋白在正常值范围内;(2)留置尿管冲洗液(0．9%氯化钠注射液)颜色转淡，尿管通畅无阻塞;(3)导尿管内无血块排出。

1.4 血凝指标的检测

采用贝克曼库尔特公司的ACL-7000 型仪器进行检测。所有研究对象采血后放入枸橼酸钠抗凝管中，静置30 min 后离心进行检测。各指标的参考值范围:凝血酶原时间(PT)为11．8～15．1 s，活化部分凝血活酶时 间(APTT)为24．9～42．8 s，纤维蛋白原定量(FIB)为2～4 g/L，凝血酶时间(TT)为12～18．6 s，D-二聚体(DD)为0～500 ng/ml。

1.5 统计学处理

采用SPSS 13．0 统计软件包进行统计分析，计量资料用均数±标准差(¯x±s)表示，组间比较使用ANOVA 方差分析，计数资料的结果采用卡方(χ2)检验。以P＜0．05 为有显著性差异，P＜0．01 为有极显著性差异。

2 结果

2.1 3 组患者一般情况比较

3 组患者在年龄、体质量指数(BMI)、膀胱手术、前列腺手术、切口长度及切口深度之间的差异无统计学意义(P＞0．05)，3 组之间具有可比性，见表1。

表1 3 组患者一般情况比较(¯x±s)Tab 1 Comparison of general data among three groups(¯x±s)

2.2 治疗前后3 组患者血凝指标比较

治疗后3 组患者的血凝指标皆在正常参考范围，3 组之间具有可比性(P＞0．05);A、B 组患者的PT、APTT、TT、FIB 以及DD 比较，t值分别为1．21、1．01、1．64、1．33、1．62，差异无统计学意义(P＞0．05);但A、B 组与C 组比较，差异具有统计学意义(P＜0．05)，见表2。因此，尖吻蝮蛇血凝酶不仅凝血作用显著，而且还能保持在血凝指标接近正常的范围，但是不同剂量的尖吻蝮蛇血凝酶之间的效果并没有显著差异(P＞0．05)。

2.3 3 组患者术后止血疗效比较

A 组和B 组患者的止血时间、切口出血时间以及凝血异常比较，差异无统计学意义(P＞0．05);但A、B 组与C 组之间的差异均具有统计学意义(P＜0．05)，见表3。因此，尖吻蝮蛇血凝酶的止血作用相对于对照组而言比较显著，但不同剂量的尖吻蝮蛇血凝酶之间的效果并没有显著差异(P＞0．05)。

表2 治疗前后3 组患者血凝指标比较(¯x±s)Tab 2 Blood clotting indexes in three groups before and after treatment(¯x±s)

表3 3 组患者术后止血疗效比较Tab 3 Comparison of postoperative hemostatic efficacy among three groups

3 讨论

尖吻蝮蛇血凝酶是从尖吻蝮蛇蛇毒中分离得到的一种高活性血凝酶［4］，分子量为29．3～29．5 kD，等电点为5．5。该酶由α、β 两个亚基构成，亚基链间由7 个二硫键连接，其中α 亚基具有SEQ ID No．1 所示的氨基酸序列，β 亚基具有SEQ ID No．2 所示的氨基酸序列［5-6］。尖吻蝮蛇血凝酶为丝氨酸蛋白酶，能够水解人纤维蛋白原α 链［7］，该酶的纯化方法为通过预处理去除不溶物，再通过两次阴离子交换柱层析，收集活性洗脱峰，经透析、超滤浓缩及脱盐后即得高纯度蛇毒血凝酶，其比活力不低于180 U/mg 蛋白，HPLC 分析纯度可达95%以上，以蛇毒原料重量计纯化收得率为0．7%～0．8%［8-9］。尖吻蝮蛇血凝酶使纤维蛋白原α 亚基裂解出A 肽后，产生纤维蛋白单体(αBβγ)2，并聚合成纤维蛋白多聚体，同时由于尖吻蝮蛇血凝酶不诱导血凝酶ⅩⅢ因子的释放，在无ⅩⅢ因子作用时形成的纤维蛋白多聚体可溶解，不引起血栓形成，是一安全有效的新型止血药［10］。

泌尿外科中前列腺和膀胱手术都是出血较多的手术，因此有必要进行止血［11］。我们对尖吻蝮蛇在泌尿外科手术中止血的研究结果表明:(1)尖吻蝮蛇血凝酶不仅凝血作用显著，而且还能保持血凝指标接近正常的范围;但不同剂量的尖吻蝮蛇血凝酶之间的效果并没有显著性差异(P＞0．05)。(2)尖吻蝮蛇血凝酶的止血作用相对于对照组而言比较显著，但增加药物剂量并没有增加止血效果，但这一结果的均值不一定能准确代表临床意义。本研究所有患者未发现任何全身及局部不良事件，可见尖吻蝮蛇血凝酶安全性较好。综上，我们认为，尖吻蝮蛇在泌尿外科手术中止血具有良好的应用价值，一般情况下，使用2 U 即可达到良好的效果。因此，尖吻蝮蛇血凝酶用于泌尿外科围术期止血，疗效确切、安全、可靠，值得推广应用［12］。

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