不同处理方法对受体牛同期发情效果的比较研究

薛仰全，倪兴军，余四九

同期发情是胚胎移植的关键技术，母牛的发情周期由多种激素相互调节控制，利用外源激素同期发情可以大大提高母牛繁殖力，缩短产犊间隔，节约人力、物力、时间，方便集约化生产管理，促进人工授精技术广泛应用以及提高胚胎移植效率，在生产上有着重要的实用价值。本试验通过对比PRID＋PGF2α法和PGF2α＋PGF2α法诱导母牛同期发情效果，为酒泉本地胚胎移植选择高效的同期发情方法。

1 材料和方法

1.1 试验材料

选择酒泉当地土杂牛、西杂牛和黑白花奶牛为同期发情受体牛。要求具备：直检无繁殖机能障碍、生殖器官疾病和传染病，个体大，体型结构良好，骨盆较宽大，膘情中等水平；年龄在3～6岁之间，无流产史。

1.2 试验地点

甘肃祁牧乳业有限责任公司、酒泉市雄鹏乳业有限责任公司、酒泉市旺达养殖专业合作社和酒泉市肃州区清水镇东三村养殖小区。

1.3 试验时间

2011年3月至2011年7月。

1.4 试验药品

PGF2α（氯前列烯醇：0.2mg／2mL／瓶、批号000513）：上海市计划生育科学研究所；PRID（Y型牛孕酮缓释阴道栓，1.9g／枚）：上海市计划生育科学研究所。

1.5 同期发情处理方法

方法Ⅰ：PRID＋PGF2α法：不考虑受体牛的发情周期，在周期的任意一天给受体牛放入PRID，此时定为0d。在放入PRID的第9d，肌肉注射PGF2α0.4mg。在第11d取出PRID，然后观察发情。

方法Ⅱ：PGF2α＋PGF2α法：不考虑受体牛的发情周期，在周期的任意一天每头受体牛肌注PGF2α0.6mg／次，并把该天记做第0d，第11d再肌注PGF2α0.4mg。

1.6 发情判断标准

从观察受体牛发情之日起，以稳定站立接受爬跨，发情旺盛期从阴门流出大量透明黏液，作为发情判断标准，并确定为发情时间。同期发情率为取出PRID或二次注射PGF2α后12～48h内发情的百分率，黄体合格为A、B级。以发情当日为第0d计算，第7d人工授精或移植胚胎，70d直检确定受胎率。

1.7 饲养管理方式

按饲养企业的正常饲养方案饲养管理。

1.8 数据统计分析

实验数据用SPSS Statistics17.0统计软件进行统计学意义分析。

2 结果

2.1 不同处理方法同期发情率的比较

在本试验结果表明，如表1所示。三个试验区域平均同期发情率：PGF2α＋PGF2α法为74.29%，PRID＋PGF2α法为76.92%，两者差异无统计意义（P＝0.792＞0.05），但PRID＋PGF2α法处理的受体牛平均同期发情率高于PGF2α＋PGF2α法受体牛的平均同期发情率。

2.2 不同同期发情方法胚移妊娠率的比较

在试验同期发情率比较研究的基础上，将甘肃祁牧乳业有限责任公司从加拿大爱德现代牛业（中国）有限公司购买的40枚荷斯坦奶牛胚胎移植。结果如下：

由表2可知，PRID＋PGF2α处理的受体牛移植妊娠率为66.67%，用 PGF2α＋PGF2α法处理的受体牛移植妊娠率为63.14%，两者差异无统计意义（P＝0.816＞0.05）。但PRID＋PGF2α法处理的受体牛移植妊娠率略高于用PGF2α＋PGF2α法处理的受体牛移植妊娠率。

表1 不同同期发情处理方法发情率比较表

表2 不同同期发情方法对受体牛移植妊娠率的影响

3 讨论

3.1 不同处理方法对同期发情效果的影响

同期发情技术是通过溶黄体或撤除外源性激素使外周血液中孕酮或孕激素含量迅速下降，以达到同期发情的目的（Roche J，1981）。牛同期发情处理主要采用3种制剂：抑制卵泡发育的制剂，如孕激素；溶解黄体的制剂，如前列腺素；促进卵泡发育的制剂，如促性腺激素［1］。

在整个母牛的发情周期中，黄体期约占70%。而黄体分泌的孕酮能对卵泡的发育成熟产生强烈的抑制作用，只有当黄体消退后，孕酮含量下降，卵泡才能发育至成熟，母牛才能进入发情。因此，控制黄体的消长，就是控制母牛发情的关键［2］。目前，可通过制造人为的黄体期和消除黄体来控制黄体的消长。制造人为的黄体期就是用孕激素处理，使黄体自然消退。消除黄体最有效、便捷的方法是肌肉注射PGF2α及其类似物，促进黄体溶解使孕酮水平下降，卵泡发育趋向一致，从而导致同期发情［3］。

本试验三个区域平均同期发情率PGF2α＋PGF2α法为74.29%，PRID＋PGF2α法为76.92%，两者差异无统计意义（P＝0.792＞0.05），说明这2种方法均可以得到较高的同期发情率。PRID＋PGF2α法处理的受体牛同期发情率高于PGF2α＋PGF2α法受体牛的同期发情率，与 Hansel W（1979）和SmithR.D（1984）的结果一致［4］，这可能是由于孕酮长时间处理的结果。

3.2 不同同期发情方法对移植妊娠率的影响

放置PRID栓使母牛的生殖系统环境中始终维持较高浓度的孕酮水平，撤栓后孕酮水平急剧下降，在4d之内卵巢就会有卵泡发育成熟排卵，氯前列烯醇的使用选择在第9d卵巢黄体即将完全退化、卵泡开始发育的结合时间注射，高水平孕酮的存在，不仅使氯前列烯醇彻底溶解黄体，还使其本身的副作用有所降低，两者具有很好的协同作用。前列腺素处理法只有当母牛在周期第5～18d（有功能黄体时期）才能产生发情反应。对于周期第5d以前的黄体，前列腺素并无溶解作用。第一次处理后，经10～12d后，再对牛进行第二次处理，这时所有的母牛均处于周期第5～18d之内，连续二次处理母牛同期发情率就显著提高［5］。

不同发情方法对受体牛胚胎移植妊娠率有一定影响。目前在国内应用较普遍，并且也比较认可的同期发情方法主要有两种。一种是不考虑受体牛的发情周期，在周期的任意一天给受体牛放入CIRD，此时定为0d，在放入CIRD的第9d，肌肉注射氯前列烯醇0.5mg。在第11d取出，然后观察发情；另一种是在受体牛发情周期中的任何一天肌肉注射氯前列烯醇0.5mg，此时定为0d，48h后不用观察受体牛发情，在第9～11d时同样肌肉注射氯前列烯醇0.5mg，48h以后观察发情［2］。相对于后者来说前者的发情效果要好，并且最终的发情可用率也较高。据张立等报道一次发情率可以达到77.5%，可用率为90.7%，这对于胚胎移植实践是有效的同期发情方法［6］。

本试验结果显示：受体牛用PRID＋PGF2α法同期发情后的胚胎移植妊娠率高于用PGF2α二次注射法处理的奶牛受体妊娠率，两者差异无统计意义（P＞0.05），与李波、张立等的报道相似。

3.3 发情药物的成本和操作程度比较

在相同的环境下，从经济实用角度看，选择PGF2α二次注射法比PRID＋PGF 2α法作同期发情处理好。主要表现在：一是成本低。两种处理方法相比，PGF2α二次注射法不需支出PRID所需要的费用，PRID＋PGF2α法成本（500.00元／1.9g×10枚＋50.00 元／0.2mg×10支 ＝55 元）比 PGF2α＋PGF2α法（50.00元／0.2mg×10支＋50.00元／0.2mg×10支＝10元）成本高约4～5倍。二是操作方便、省工省时。PGF2α二次注射法不用埋栓、拔栓等，1～4d牛即可发情，而PRID＋PGF2α法第10～13d牛才发情。

4 小结

4.1 同情发情率的差异

用PRID＋PGF2α法和PGF2α＋PGF2α法分别处理受体牛，同期发情率之间差异无统计意义（P＞0.05）。用PRID＋PGF2α法处理受体牛同期发情率（76.92%）高于用PGF2α＋PGF2α法处理的同期发情率（74.29%）。

4.2 妊娠率的差异

用PRID＋PGF2α法处理黑白花受体牛移植妊娠率（66.67%）高于用PGF2α＋PGF2α法处理黑白花受体牛移植妊娠率（63.14%），两种不同同期发情方法对受体牛移植妊娠率差异无统计意义（P＞0.05）。在奶牛胚胎移植中可优选PRID＋PGF2α法处理受体牛。

4.3 经济效益差异

在相同的环境下，从经济实用角度看，PRID＋PGF2α法成本比PGF2α＋PGF2α法成本高约4～5倍，而PGF2α＋PGF2α法成本低、操作方便、省工省时。

［1］李俊生，桑润滋，马亚宾.生殖激素提高母牛繁殖率的研究进展［J］.河北畜牧兽医，2000，16（5）：14.

［2］高庆华，宫长海，韩春梅.奶牛诱导发情试验［J］.中国草食动物，2001，21（3）：32.

［3］高庆华，何良军，马宾祥.不同方法对受体母牛诱导同期发情效果的比较［J］.中国草食动物，2006，26（1）：16.

［4］武晓英，曹贵东.牛同期发情技术的研究［J］.繁殖技术，2009，37（8）：12－14.

［5］滕 勇.GnRH、PGF2α诱导奶牛同期发情效果的比较［J］.黄牛杂志，2002，28（5）：1－2.

［6］张 震，吴奇喜，王利宁.影响受体牛同期发情效果的因素分析［J］.中国牛业科学，2007，33（3）：65－66.