复合芽孢杆菌制剂对肉鸡福利的影响

孟丽辉，张晓迪，卢庆萍，张宏福

(中国农业科学院 北京畜牧兽医研究所 动物营养学国家重点实验室，北京 100193)

关于芽孢杆菌在畜禽日粮中的应用国内外已有大量研究，芽孢杆菌能产生多种抗生素，对许多动植物及人类病原菌有很好的抑制作用，在改善畜禽生产性能、维持肠道菌群平衡、提高消化率与免疫力等方面均有较好的效果[1-4]。芽孢杆菌种类有很多，如枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌，生产中多采用复合制剂的形式[5]。本试验室针对芽孢杆菌对肉鸡的作用效果进行了系统研究，发现饲喂复合芽孢杆菌制剂除了可以提高肉鸡的生长和免疫力外，还可有效降低鸡舍空气中金黄色葡萄球菌等有害菌的数量[6]、减少氨气排放[7]。同时还发现，将芽孢杆菌制成喷剂在鸡舍空气中喷洒，可起到同饲喂芽孢杆菌制剂相同的促进生长、提高肉鸡免疫力、净化鸡舍空气的效果[7-8]。关于复合芽孢杆菌制剂对畜禽生产性能与改善环境影响的研究已有很多，但有关其对畜禽福利影响方面的研究还未见报道。本试验即在实验室前期的研究基础上进一步探讨饲喂或喷洒复合芽孢杆菌制剂是否对肉鸡的福利状况有影响。本文依据欧盟目前普遍使用的肉鸡福利评估方法[9]，从死淘率、羽毛清洁度、附部损伤度、脚垫损伤度，步态等几方面对肉鸡福利状况进行评估，旨在揭示复合芽孢杆菌制剂对肉鸡福利的影响，进而为提高肉鸡福利水平、提高肉鸡产品品质提供科学的依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

本试验所用复合芽孢杆菌制剂由枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌(购自北京益农饲料中心)复合配制而成。饲喂用枯草芽孢杆菌及地衣芽孢杆菌有效活菌含量均为2×1010CFU/g，等质量混合均匀，得到有效活菌含量仍为2×1010CFU/g的复合制剂。喷洒用枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌经活化后，分别接种培养，制成浓度为108CFU/mL的菌悬液，等体积混合均匀制成喷剂。

1.2 试验动物与试验处理

试验于昌平试验基地进行，采用单因子完全随机设计，选用1日龄的AA肉鸡300只，随机分成3组，分别在3个肉鸡代谢室中喂养，每个处理组4个重复，每个重复25只鸡。处理1为对照组，饲喂玉米-豆粕基础日粮；处理2为饲喂芽孢杆菌制剂组，在基础日粮中添加复合芽孢杆菌制剂200 mg/kg；处理3为喷洒芽孢杆菌制剂组，试验前期每2天喷洒一次，后期1天喷洒一次，喷洒剂量为2 mL/m3，浓度为108CFU/mL，8∶00均匀喷洒在舱内空气中。试验期间各组肉鸡饲喂相同的玉米-豆粕型日粮，日粮依照NRC(2004)营养需要来配制，其组成及营养水平见表1。

表1 基础日粮及营养水平Table 1 Dietary composition and nutrient level

注：*预混料可为每千克全价料提供：维生素A 50 000 IU，维生素D 10 000 IU，维生素E 75.0 g，维生素K318.8 g，维生素B19.8 g，维生素B228.8 g，维生素B619.6 g，维生素B120.1 g，泛酸钙58.8 g，烟酸196.0 g，叶酸4.9 g，生物素2.5 g，铜4.0 g，铁40.0 g，锌37.6 g，锰50.0 g，硒0.2 g，碘0.2 g。

Note: *The premix provides following per kg diet: vitamin A 50 000 IU，vitamin D 10 000 IU， vitamin E 75.0 g，vitamin K318.8 g，vitamin B19.8 g，vitamin B228.8 g，vitamin B619.6 g， vitaminB120.1 g，calcium pantothenate 58.8 g，nicotinic acid 196.0 g，folic acid 4.9 g，biotin 2.5 g，Cu 4.0 g，Fe 40.0 g，Zn 37.6 g，Mn 50.0 g，Se 0.2 g，I 0.2 g.

1.3 饲养管理

鸡舍面积为3×4.5 m2，24 h光照，相对湿度45%，育雏期第一周温度为32～33 ℃,以后每周降低1～2 ℃，至第六周为23～24 ℃，网上平养，一次性清粪。鸡只按常规程序进行免疫，采用统一的饲养管理方法，自由采食与饮水。

1.4 测试指标与方法

41日龄时统计各处理肉鸡的死亡率，并评估各处理肉鸡的羽毛清洁度、脚垫情况、跗关节损伤程度及步态。

1.4.1 羽毛清洁度评分(Feather Cleanliness Score) 每个处理随机选20只鸡(每个重复5只)，对其羽毛清洁度进行评分。评分设0到3四个分值，羽毛清洁光滑无污物的为0分；胸腹部等羽毛污染程度较轻的为1分；羽毛污染程度中等严重的为2分；羽毛杂乱脏，极不清洁的为3分。

1.4.2 脚垫评分(Foot Pad Score) 每个处理随机选取的20只鸡，对其脚垫逐一观察并进行评分。评分设0到4五个分值，脚垫清洁干净，无任何损伤及溃疡、炎症的为0分；有星点损伤及炎症的为1分；脚垫损伤稍大，损伤面直径在0.1到0.5 cm的为2分；脚垫炎症及损伤很明显，较严重，损伤面直径在1 cm左右的为3分；脚垫炎症很严重，损伤面直径大于2 cm的为4分。

1.4.3 跗关节损伤度评分(Hock Hurt Score) 每个处理随机选取20只鸡，对其跗关节处观察并进行损伤度评分。评分设0到4五个分值，跗关节健康无任何损伤及溃疡、炎症的为0分；有小点红斑损伤及炎症的为1分；跗关节损伤稍大，损伤面积直径约在0.1到0.5 cm的为2分；跗关节炎症及损伤很明显，较严重，损伤面直径约在1 cm左右的为3分；跗关节损伤度很严重，损伤面直径大于2 cm的为4分。

1.4.4 步态评分(Gait Score) 每个处理组随机选取20只鸡，进行步态评估，对试验鸡只逐个测试并评分。评分设0到5六个分值：步态正常，灵敏机灵的为0分；步态稍显迟钝缓慢的为1分；步态较迟缓，走路异常但不是很严重的为2分；步态异常程度中等严重的为3分；严重异常，只能移动几小步的为4分；完全不能走动的为5分。

1.5 数据分析

试验数据中死淘率采用SAS9.2软件中卡方检验，其他测试指标的评分数据采用非参数性检验并作两两比较。

2 结果与分析

2.1 不同处理肉鸡死亡率比较

试验结束时，对照组有3只鸡死亡，两个试验组未发现鸡只死亡(表2)。经卡方分析各处理组肉鸡死淘率没有明显差异(P>0.05)。

表2 不同处理对AA肉鸡死亡率的影响(n=100) Table 2 Effects of different treatments on the mortality of AA broilers (n=100)

2.2 不同处理肉鸡羽毛清洁度评估

不同处理对AA肉鸡羽毛清洁度评分的影响见表3。由表3知，对不同处理的AA肉仔鸡羽毛质量评分采用SPSS 16.0 Kruskal-Wallis test (多个独立样本的非参数性秩和检验)分析，差异不显著(P>0.05)。但对照组中得分在2 和3，也就是羽毛质量较差的鸡共计11只(其他两组为10只)，得分为1分，即羽毛质量较高的鸡为9只，而其他两组的为10只。

表3 不同处理对AA肉鸡羽毛清洁度评分的影响(n=20) Table 3 Effects of different treatments on feather cleanliness score of AA broilers(n=20)

Note: Total rank of each treatment:Ri= the frequency of each score×average rank; Mean rank: Ri= Ri/n.Numbers in brackets are percentage.The same below.

2.3 不同处理肉鸡脚垫评估

由表4知，饲喂或喷洒芽孢杆菌制剂组的肉鸡脚垫评分均为0即都完好无损，对照组中有1只鸡的脚垫有损伤。对不同处理的AA肉鸡脚垫评分采用SPSS 16.0 Kruskal-Wallis test 检验，差异不显著(P>0.05)。

2.4 不同处理肉鸡跗关节损伤度评估

对不同处理的肉鸡跗关节损伤度评分采用SPSS 16.0 Kruskal-Wallis test 检验，差异不显著(P>0.05)，但对照组中得分为0(表5)，即跗关节完好无损伤的鸡只是三个处理中最多的，优于饲喂与喷洒复合芽孢杆菌制剂组。

2.5 步态评分

不同处理肉鸡步态评分结果见表6。由表6知，饲喂或喷洒复合芽孢杆菌制剂组中步态灵敏正常，即得分为0的鸡数分别比对照组高28.6%、85%；对照组中得分在2～5之间，即步态有明显及严重异常的鸡占到鸡群总数的20%，而两个处理组中为0%。对不同处理的肉鸡步态评分采用SPSS 16.0 Kruskal-Wallis test 检验，差异不显著(P>0.05)。

3 讨 论

对于动物福利的评估目前尚没有统一的标准。本实验室前期针对肉鸡福利进行的一些研究中[10-11]，选用行为、羽毛清洁度、步态、肢体不对称性(FA)、紧张不动性(TI)以及血液中异噬白细胞与淋巴细胞比(H/L)等指标来评价肉鸡福利状况。从研究结果上来看，这些指标能够较好地反映肉鸡福利状态的变化。欧盟在动物福利方面经过长期的探索与实践，已经形成了较为完善的农场动物福利评估体系(包括家禽、猪及牛)，并得到很多国家的认可。本试验对肉鸡福利的评估就是采用其中的家禽福利的评估方法[9]，从死淘率、羽毛清洁度、跗关节损伤度、脚垫，步态等几方面对肉鸡福利状态进行评估。这些评价指标易于操作，对肉鸡福利产生影响的因素有很多，如环境、遗传、营养、管理等。本实验室白水莉等[10]在研究饲养密度对肉鸡福利状况的影响时发现，降低饲养密度可显著改善肉鸡羽毛质量与步态。另有研究表明，环境富集材料可以改善肉鸡的福利状况，如在鸡舍中添置栖架、沙盘或玩具可显著改善肉仔鸡羽毛清洁度、关节及脚垫损伤状况，提高肉仔鸡福利水平[11-12]。本试验从营养与环境两个影响因素出发，在肉鸡日粮中添加复合芽孢杆菌制剂及在鸡舍内喷洒复合芽孢杆菌制剂，发现饲喂或喷洒复合芽孢杆菌制剂对肉鸡的羽毛清洁度、步态、脚垫状况等有一定程度的改善。

表4 不同处理对AA肉鸡脚垫评分的影响(n=20)Table 4 Effects of different treatments on mat score of AA broilers(n=20)

表5 不同处理对AA肉鸡跗关节损伤度的影响(n=20)Table 5 Effects of different treatments on elbow damage degree of AA broilers(n=20)

表6 不同处理对AA肉鸡步态评分的影响 (n=20)Table 6 Effects of different treatments on gait score of AA broilers(n=20)

综合上述各研究结果，肉鸡福利水平的提高与其营养状况的改善及生长环境条件密不可分。芽孢杆菌能提高动物的生产性能，并且对肠道菌群有积极影响，添加枯草芽孢杆菌能够选择性地增加肉鸡盲肠中乳酸杆菌的数量, 减少沙门氏菌的数量[13-14]，减少肠道疾病的发生。随着肉鸡的生长，降低有害菌的这种作用更加明显。芽孢杆菌还可产生多种酶，提高饲料养分消化率[15]，提高动物免疫力[16]。在日粮中添加适量芽孢杆菌可提高肉鸡的抗氧化能力[17], 并且可以拮抗病原微生物，降低排泄物氨逸失[18]。总之，在肉鸡饲料中添加芽孢杆菌可以提高肉鸡的健康水平，降低死亡率，这可能是其优化肉鸡福利状况的一个原因。

耿爱莲等[19]应用Delphi法确定动物福利的影响因素权重时，指出环境控制条件是动物福利众多影响因素中权重最大的一个因素。关于环境条件与人类和动物的健康关系的研究已有很多，环境质量很差的空气，其中的病原微生物通过呼吸道，皮肤，食水等侵入机体，导致动物及人一些疾病的发生，主要是呼吸道和皮肤疾病、免疫下降等[20-22]。良好的环境条件可以从动物生理、畜禽舍内舒适度、远离疾病等方面提高动物福利状况。有研究表明喷洒复合微生物制剂能够有效改善环境质量，陈国营等[23]在蛋鸡舍中喷洒抑氨菌液，可显著降低氨气浓度30%，张晓迪等[7]在肉鸡舍内喷洒复合芽孢杆菌制剂，肉鸡氨气排放量降低27.65%。氨气浓度降低可以减少鸡只跗关节与脚垫的“氨烧伤”，提高其福利状态。另外本实验室前期的研究发现，肉鸡生长后期于肉鸡舍喷洒复合芽孢杆菌菌液，能够显著降低舍内空气中大肠杆菌与葡萄球菌的数量，效果与化学消毒剂相近[8]，研究表明喷洒复合芽孢杆菌等有益菌，能够改变畜舍的微生态结构，使肉鸡生长环境中的条件致病菌数量减少，可降低细菌感染导致的炎症溃疡而引发关节炎的情况，且能够减小呼吸道细菌感染的几率，防止常见呼吸道疾病发生，从而提高鸡整体抗病能力，降低死亡率，使肉鸡福利得到提升。

4 结 论

本试验结果表明，在肉鸡日粮中添加复合芽孢杆菌制剂或在鸡舍中喷洒复合芽孢杆菌制剂可以在一定程度上改善肉鸡的福利状况。

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