土当归对辐射损伤小鼠体重与血常规的影响

刘 颖 秦继勇 李文辉 毕良文 段 伟 常 莉

（1.云南省肿瘤医院、昆明医科大学第三附属医院，云南昆明 650118；2.南京医科大学第二附属医院，江苏南京 210011；3.延安大学附属医院，陕西延安 716000）

本研究选用云南海拔3000米以上高辐射藏族和纳西族地区，具有活血化瘀、补血益气、滋补强壮等功效的天然植物药土当归（隆颚当归，Angelica Oncosepala），观察其水提物灌胃对辐射损伤小鼠体重及红细胞、白细胞、血小板数量的影响，目的是在云南高海拔地区寻找出新的，高效、低毒的，有广泛临床药用及食用价值的抗辐射天然植物药。

1 实验材料

1.1 实验动物 健康SPF级昆明种小鼠，雄性，6～8周龄，体重18～22g，由云南省昆明医科大学动物实验中心提供。

1.2 受试药物 由云南省中医中药研究所提供土当归水提物。

1.3 实验试剂与仪器 RPMI-1640（GIBCO公司生产，批号：1 296119）、高氯酸、苦味酸、氯化钙、冰醋酸、福尔马林、60C0远距离治疗机、离心机、普通光学显微镜、血细胞计数仪、分光光度计、电子天平、烘箱等。

2 实验方法

2.1 土当归水提物提取 将药物250g浸泡于3000mL清水中24h，加热煮沸 30min，冷却过滤，得滤液 1；药渣中加入2000mL清水，加热煮沸30min，冷却过滤，得滤液2；再次在药渣中加入2000mL清水，加热煮沸30min，冷却过滤，得滤液3，药渣弃去。合并3次滤液，静置过夜，次日取上清液加热蒸发浓缩至浸膏，浸膏放入85℃烘箱烘干，取出药物，保存待用。

2.2 药物剂量 按动物体表面积比率换算等效剂量法计算，参照文献[1]，计算结果扩大5倍作为高剂量，倍比稀释得出中、低剂量，即 2.236g/kg、1.118g/kg、0.559g/kg。

2.3 给药方式 将药物用蒸馏水配成相应浓度，按小鼠体重计算给药剂量，灌胃给药。正常对照组、照射对照组小鼠给予0.2mL蒸馏水灌胃。

2.4 动物分组 将50只小鼠随机分成5组，每组10只，分别作上标记以便区分，分别是：正常对照组（normal control）、照射对照组（irradiating control IR）、照射＋高剂量药物组（IR+HD）、照射＋中剂量药物组 （IR+MD）、照射＋低剂量药物组（IR+LD）。

2.5 照射条件60Co-γ射线一次性照射6Gy，吸收剂量率为0.19Gy/min，源皮距为80cm。

2.6 实验方法 动物分组称重小鼠，并剪断小鼠尾巴取血1次，检测血常规。随后将小鼠送往云南省肿瘤医院放射治疗中心一次性照射60Co-γ射线6Gy，照射后土当归水提物连续灌胃给药 10d，照射后第 2、4、7、14 天各称 1 次体重，第 5、14天取血检测血常规。

2.7 统计学方法 不同时间的小鼠体重和红细胞、白细胞、血小板计数均以（）表示，统计学分析使用SPSS11.5软件进行处理。统计方法使用单因素方差分析 （one-way ANOVA），组间两两比较用q检验。以α=0.05作为检验水准，P≤0.05为差异有统计学意义。

3 实验结果

照射前5组小鼠体重和白细胞、红细胞、血小板细胞数值无明显差异。照射后，与正常对照组比较，照射对照组上述指标均明显下降。与照射对照组比较，土当归水提物中、低剂量可明显升高辐照后14d小鼠的红细胞计数；照射＋低剂量药物组照射后14d红细胞计数亦明显高于同时期照射＋高剂量药物组。其余指标和时段各药物干预组与照射对照组比较无显著性差异。见表1～表4。

4 讨论

近年来，一些学者对当归、土当归的抗辐射作用做了研究。张端莲等[2]应用当归注射液对60Co-γ照射损伤后的小鼠给予治疗，发现当归可使辐射损伤后的小鼠卵泡数目恢复正常，卵泡平均面积增加。李宗山等[3]报道100%当归水浸出液可使照射小鼠淋巴细胞增殖反应显著增强，且未见副作用。陈蕙芳[4]介绍了土当归（Aralia cordata Thunb）对于放射损伤引起的造血功能不全有恢复作用。但国内外未见有研究土当归 （隆颚当归，Angelica Oncosepala）放射保护作用的文献报道。

表1 土当归水提物对辐照小鼠体重的影响g

表2 土当归水提物对辐照小鼠白细胞计数的影响 ×109/L

表3 土当归水提物对辐照小鼠红细胞计数的影响 ×1012/L

表4 土当归水提物对辐照小鼠血小板计数的影响 ×109/L

本研究结果可见，照射对照组小鼠体重、白细胞、红细胞、血小板计数均明显低于正常对照组，这说明本次实验辐射损伤模型建立成功，其实验得出的结果是可靠的，同时也说明该实验模型的科学性和可重复性，与文献[5-6]一致。照射+土当归水提物组小鼠体重和外周血象中白细胞、血小板与照射对照组比较均无显著性差异，分析原因有可能是对药物只进行了粗提，粗提取物中所含有效成分可能太少，此外所用的提取方法也可能使某些有效成分未能提取出来。从土当归水提物实验结果中可知，照射后第14天，三个照射给药组红细胞计数值均高于照射对照组，低、中剂量药物组与照射对照组之间有显著性差异，低、高剂量药物组之间也有显著性差异，提示土当归水提物有促进辐射损伤小鼠外周血红细胞恢复的趋势。但仅依靠这一个指标我们尚不能判断土当归水提物对辐射损伤小鼠有防护作用，但这一结果值得我们进一步深入研究。

[1]陈奇.中药药理研究方法学.北京：人民卫生出版社，1993：1103

[2]张端莲，王松山，余墨声，等.当归对辐射损伤后小鼠卵泡影响的定量研究.中草药，1997，28（3）：156

[3]李宗山，邱世翠，曹奇志，等.当归抗X线辐射对小鼠淋巴细胞增殖反应的影响.滨州医学院学报.2004，27（6）：424

[4]陈蕙芳.天然药物和传统药物：土当归提取物治疗放射引起的造血功能不全.国外药讯，1992（5）：35

[5]Hari kumer K B，Sabu MC，Lima PS，et al.Modulation of haematopoetie system and antioxidant enzymes by Emblica officinalis gaertn and its protective role againstgammaradiation induced damages in mice.J Radiat Res，2004，45（4）：549

[6]郭群，陈水英，张作民，等.心乐灵抗辐射作用的实验研究.中医药临床杂志，2004，16（2）：101