恩诺沙星肠溶微粒包衣工艺研究

张战伟

(杭州九天动物保健品有限公司，杭州310029)

1 材料和仪器

1.1 材料 恩诺沙星(浙江新昌国邦药业有限公司，批号120517-1);恩诺沙星对照品(中国兽医药品监察所，批号H0081206，含量99.9%);丙烯酸树酯Ⅰ号(连云港万泰药用材料有限公司，批号20121109);丙烯酸树酯Ⅲ号(连云港万泰药用材料有限公司，批号20121117);微晶纤维素(安徽山河药用辅料有限公司，批号120901);PVPK30(重庆力宏精细化工科技有限公司，批号241010011);滑石粉(广西桂林来生滑石制品有限责任公司，批号2012122701);食用淀粉(河北德瑞淀粉有限公司，批号2012112911);柠檬酸三乙酯(江苏雷蒙化工科技有限公司，批号201212008)。

1.2 仪器 LW-B2型底喷干燥包衣锅、LW-L3型多功能制粒制丸机和LW-H100型槽型混合机，常州龙文干燥设备有限公司;RCZ-8B型药物溶出仪，天津大学精密仪器厂;GD751型紫外-可见光分光光度计，上海精密科学仪器有限公司;BT25S型电子天平，北京赛多利斯公司;Syltech500型高效液相色谱仪，美国赛尔泰杭州公司。

2 方法与结果

2.1 测定方法 取样品研细，精密称取适量(约相当于恩诺沙星25 mg)，置250 mL棕色量瓶中，加入0.1 mol/L氢氧化钠溶液10 mL，振摇溶解，用水稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5 mL，置100 mL棕色量瓶中，用水稀释到刻度，照紫外-可见光分光光度法(《中华人民共和国兽药典》二〇一〇年版一部附录26页，简称UV法)[1]，在271 nm波长处测定吸光度，另取恩诺沙星对照品，同法测定。计算，即得。

2.2 测定方法的方法学验证[2]

2.2.1 标准曲线的绘制 精密称取恩诺沙星对照品25.06 mg，置250 mL棕色量瓶中，加0.1 mol/L氢氧化钠溶液10 mL，振摇溶解，加水至刻度，摇匀，再精密量取2、3、4、5、6、7、8 mL 的溶液，分别置 100 mL棕色量瓶中，加水至刻度，摇匀，照UV法在271 nm波长处测定吸光度。以浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。结果恩诺沙星在2.0～8.0 μg/mL浓度范围内，浓度和吸光度呈良好的线性关系。标准曲线方程为A=0.1014C-0.0081，r=0.9999。

2.2.2 精密度试验 取已知含量的样品，照2.1项下方法测定含量，每天重复测定一个样品6次，连续测定3 d，记录数据，计算日内及日间精密度。结果日内精密度RSD=0.39%，日间精密度RSD=0.33%。

2.2.3 回收率试验 取已知含量样品，精密称定9份(每份含恩诺沙星25 mg)，分别加入20、25、30 mg的恩诺沙星各三份，研磨均匀后照2.1项下方法测定含量，计算回收率，平均回收率为99.88%。

2.2.4 稳定性试验 取2.2.2项中的样品溶液，室温分别放置0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 h，按 2.1 项中测定法检测吸光度，计算含量及其相对标准偏差。结果表明供试品溶液在3 h内吸光度几乎没有变化。

2.2.5 与高效液相色谱法测定结果比较 取按最佳工艺生产的样品五批，照2.1项方法和《中国兽药典》2010年版一部该品种片剂项下的高效液相色谱法，分别测定样品的含量，统计学比较两种方法的含量测定结果(t检验，α=0.10)。结果如表1所示，表明两种方法测定结果无显著差异。

表1 两种测定方法统计学比较结果

2.3 肠溶微粒的制备

2.3.1 粒芯的制备[3-5]处方:恩诺沙星 108 g;微晶纤维素40 g;淀粉852 g;PVPK30(0.5%)溶液:适量，共制1000 g。操作:取恩诺沙星过80目筛，与淀粉、微晶纤维素混合均匀后，加入PVPK30溶液制备软材，用LW-L3型多功能制粒机过五号筛挤压制粒，制得粒子在流化床内80℃干燥完全后，过筛整粒，测定半成品含量。

2.3.2 包衣液配制 以包衣粒芯60 kg计:取纯化水10 kg置于不锈钢桶中，加入滑石粉1.0 kg，搅拌混匀后依次加入丙烯酸树酯Ⅰ、Ⅲ号溶液各6.3 kg、三醋酸三乙酯0.5 kg，边加边缓缓搅拌，最后加水至全量，启动不锈钢桶中的振动泵，使包衣液分布均匀，即可。

2.3.3 包衣方法 将包衣锅拉至轨道加粒芯位置，加入粒芯60 kg，放置均匀后，恢复至原位封严，先打开喷枪压力阀，再打开底进风阀，设置进风量在粒芯刚好完全抛起为宜，再设定底风温度、包衣液的枪压和打入包衣液速度进行包衣。整个包衣过程中，除特殊情况外不得改变运行参数，以免出现意外。待包衣液输送完毕后，升高底风温度至80℃，活化干燥1.5 h后，冷却，过筛，即可。

2.4 正交实验[6]

2.4.1 实验设计 实践经验得出，在选择好进风量的情况下影响包衣效果的主要因素为:打入包衣液的枪压、打入包衣液的速度和包衣锅底部的进风温度。根据预试验，每个因素选择三个水平(表2)，用L9(34)正交试验表安排实验，根据肠溶制剂释放度要求[7]，考察各个因素对包衣工艺的影响，确定最佳工艺。

表2 正交试验因素水平表

2.4.2 释放度的测定[1]依据《中华人民共和国兽药典》二〇一〇年版一部附录释放度测定法第二法测定样品在酸中和缓冲液中的释放度。由于每粒量较少，依照药典方法取样一粒缺少合理性，故以一定量(0.2 g)的微粒为单位测定释放度。

2.4.3 正交实验结果 正交实验结果见表3，可以看出各因素对在缓冲液中的释放度无影响，对在酸中释放度的影响大小顺序为R(A)＞R(B)＞R(C)，即设定的包衣液的枪压影响最大，打入包衣液的速度影响次之，进风温度对包衣效果几乎没有影响，其最佳包衣工艺为A1B3C1，从表4方差分析得出前两种因素影响较为显著，由于C因素对包衣效果影响可以忽略不计，为了加快包衣速度、提高效率，C因素选择进风温度50℃即C3，即选择包衣工艺为A1B3C3，选择最佳包衣工艺为打入枪压0.24 MPa，打入包衣液速度60 mL/min，进风温度50℃。

表3 正交试验结果

表4 方差分析(酸中)

2.5 成品测定结果 取按最佳工艺生产的样品五批，按《中华人民共和国兽药典》二〇一〇年版一部附录肠溶制剂要求，测定样品在酸和缓冲液中释放度，记录数据，结果如表5。可以看出酸中2 h后释放度均小于标示含量的10%，缓冲液中释放度均大于标示含量的70%。其他测定指标也符合微粒项下规定，证明产品的质量稳定可靠。

表5 五批样品测定结果

3 小结与讨论

微粒制剂剂型本身具有显著的优点，如在胃肠道吸收一般不受胃排空的影响，释药的重现性较高，药物在胃肠道表面分布的面积增大，提高了药物的生物利用度、减小局部刺激等;恩诺沙星为浓度依赖性抗菌药，血液浓度越高，临床效果越好，制成肠溶制剂，药物在肠道集中释放吸收可明显提高其血药浓度，增强其疗效，所以将恩诺沙星微粒制成肠溶制剂较为理想。

正交试验前，首先结合相关文献对测定方法进行了选择并验证。方法学验证表明，所选择的UV测定方法线性、精密度、回收率、稳定性均能够达到释放度及含量测定的要求，相比法定方法(《中华人民共和国兽药典》二〇一〇年版中高效液相色谱法)，UV法操作简单方便，费用低廉，可以作为企业内控方法应用，但UV法易受有紫外吸收的物质干扰，专属性相对较差，对外评定产品质量时，仍以法定标准为准。

正交试验时，通过对薄膜包衣参数的考察，优化了产品的生产工艺，制备微粒在体外释放特性良好，在胃溶介质中几乎不溶，而在肠溶介质中释放达到80%以上。本法制备的药物微粒进行肠溶薄膜包衣，掩盖了药物本身的苦味，增强顺应性，改变药物释放特性，提高药物的稳定性，降低了毒副作用，节省了治疗成本，为恩诺沙星制剂研究及大规模生产提供了依据。本试验的设计均是在体外模拟进行，体内的生物利用度还需要进一步研究。

[1]中国兽药典委员会.中华人民共和国兽药典一部[M].北京:中国农业出版社，2011:4.

[2]刘文英.药物分析[M].第6版，北京:人民卫生出版社，2007:82.

[3]医药工业研究院药物制剂部药物制剂国家工程研究中心.药用辅料应用技术[M].第2版.北京:中国医药科技出版社，2002:211.

[4]陆 斌.药物新剂型与新技术[M].北京:人民卫生出版社，1997:289.

[5]陈卫华，宋友明.环丙沙星微粒薄膜包衣制备工艺研究[J].制剂与技术，2011，11:18-37.

[6]何 雁，马志庆.医药数理统计[M].北京:科学出版社，2009:184.

[7]李智慧，黄 山，孙文静，等.氟苯尼考肠溶缓释包衣微粒的制备及体外评价[J].中国兽药杂志，2011，45(12):31-34.