气相色谱-串联质谱法测定食用菌中氧化乐果残留

吴虹玥，张静恒，方晓燕

(四川省成都市食品药品检测中心，四川 成都 610045)

氧化乐果属于高毒禁用有机磷类农药，其极性较强［1］。已报道的检测方法有毛细管电泳法，气相色谱法，高效液相色谱法，TLCS 法和酶联免疫法等［2］。在国家标准和农业部标准中，推荐的是气相色谱法。在气相色谱法里，如果在前处理过程中不增加净化步骤，则会由于色素等杂质造成进样口、色谱柱，甚至检测器的污染;但增加净化步骤，则回收率较低，检出限较高，难以满足痕量分析的需要。另外，它容易在检测过程中产生基质增强效应［3］，严重影响检测结果的准确性，因此其测定是长期困扰检测工作者的问题。

三重四级杆质谱，通过在四级杆中选择性地对母离子碰撞碎裂产生子离子，可大幅度减少或消除基体干扰。其主要优点是即使在最复杂基质中，在超低水平浓度的检测范围内改善目标化合物的信噪比，使农药筛查达到更低检测限［4］。

本文使用气相色谱-串联质谱法测定食用菌中氧化乐果残留，显著去除基质对氧化乐果的干扰，使浓度极低时峰面积有良好的重现性，使数据更为可靠。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

美国Agilent 7890A 气相色谱仪，7000 三重四级杆质谱检测器，配化学工作站和自动进样器，高速匀浆机，氮吹仪，乙腈，丙酮，氯化钠，氧化乐果标准储备液 (浓度为100 mg·L-1，丙酮为溶剂，农业部环境保护科研监测所研制)，使用时，根据检测要求用丙酮稀释成相应的标准工作溶液。

1.2 色谱分析条件

色谱柱为HP-5MS 石英毛细管柱 (30 m×0.25 mm×0.25 μm)，载气为高纯氮气 (纯度≥99.999%);进样方式:不分流;恒压模式(15 psi)，程序升温:从155℃开始，以每分钟10℃升温到250℃，保持1 min，进样量1 μL。安捷伦7000 QQQ 系统配置EI 离子源70 eV，使用MRM 操作模式，离子源温度230℃，四级杆温度150℃。碰撞气体流量He 2.25 mL·min-1，N21.5 mL·min-1。

1.3 样品的制备

称取食用菌25 g (准确至0.01 g)，放入匀浆机中，加入50.0 mL 乙腈，高速匀浆2 min，布氏漏斗抽滤，滤液收集到装有5 g 左右氯化钠的50 mL 具塞比色管中，收集滤液，然后盖上塞子，剧烈震荡1 min，在室温下静置1 h，使乙腈和水相分层。吸取10.0 mL 乙腈溶液放入试管中，氮吹至近干，用丙酮定容到2.50 mL，供色谱测定使用。

2 结果与讨论

2.1 气相色谱-串联质谱条件优化

2.1.1 前级离子的选择

将标准品进行全扫描 (Full Scan)，确定氧化乐果的保留时间，然后找出了156，141，126 和110 m/z 这4个丰度较大、质荷比较大的碎片离子。接着再用SIM 方式扫描 (图1)，选择其中响应值最高，丰度最大，无干扰，质荷比尽可能大的碎片156 m/z 作为产物离子的前级离子。

图1 SIM 方式扫描确定156 m/z 为前级离子

2.1.2 产物离子的选择

根据前级离子156 m/z，选择当碰撞能量分别为0，15，30，45 V 时，产生产物离子丰度和质荷比最佳的碰撞能量区间为0～15 V (图2)。然后再从碰撞能量为1，2，4，5 V 时，选择了最佳碰撞能量2 V (图3)，并确定了前级离子产生的丰度大，质荷比大的两个产物离子141 和110 m/z (图4)。

图2 使用碰撞能量为0，15，30，45 V 时，前级离子产生的产物离子谱图

图3 使用碰撞能量为1.0，2.0，4.0，5.0 V时，前级离子产生的产物离子谱图

图4 最后确定的前级离子156 m/z 碰撞后产生92个产物离子141 和110 m/z

2.2 线性与检出限

取适量氧化乐果标准储备液，分别用丙酮稀释成浓度为0.01，0.10，1.00，2.00，4.00 mg·L-1的使用液进行测定。结果表明，在浓度为0.01～4.00 mg·L-1时，定量离子的峰面积与标准溶液浓度呈良好的线性关系，y=21 773.643 959 x+563.273 568，r=0.9 907，检出限为0.000 3 mg·kg-1。

2.3 精密度与回收率

对食用菌中的氧化乐果残留采取3种添加水平做回收率和精密度实验 (n=5) (表1)。由表可以看出，氧化乐果的回收率在79.3～105.4%，RSD≤5%。

表1 回收率和精密度 (n=5)

3 小结

气相色谱-质谱串联法能够显著除去食用菌中的基质干扰，在样品浓度极低的情况下也能有良好的重现性，避免了增加净化步骤而导致结果不可靠的现象，满足食用菌中氧化乐果残留痕量分析的要求。

［1］韩梅，易盛国，侯雪，等.结球甘蓝中氧化乐果残留量的测定［J］.现代农业科技，2010 (5):147-148.

［2］鞠芳芳，张喜轩，孙体健，等.气相色谱和气相色谱/质谱法检测生物样品中氧化乐果［J］.中国卫生检验杂志，2009，19 (12):2729-2730，2785.

［3］施家威，李继革，王玉飞，等，固相萃取-气相色谱/三重四级杆串联质谱分析蔬菜中42种农药残留［J］.色谱，2010，28 (12):1137-1143.

［4］孙雷丽，李晓玉，隋涛.气相色谱-串联质谱测定菠菜中有机氯残留量 ［J］.广州化工，2010，38 (11):155-157.