实验性子宫肌瘤模型的建立及姜黄素的干预

林宇星

福建省立医院药学部，福建 福州 350001

实验性子宫肌瘤模型的建立及姜黄素的干预

林宇星

福建省立医院药学部，福建 福州 350001

目的：研究姜黄素对子宫肌瘤大鼠的影响及作用机制。方法：采用雌二醇及孕酮诱导雌性W istar大鼠子宫肌瘤模型，进行20周的药物干预，观察大鼠血的生化指标、雌二醇、孕酮及子宫病理变化。结果：姜黄素与米非司酮均能降低W istar大鼠子宫系数、宫颈直径及宫体直径，减轻子宫病理损害。姜黄素能降低血清中雌二醇和孕酮的含量。结论：姜黄素能改善大鼠子宫肌瘤病变，其作用机制可能与降低血浆雌二醇和孕酮有关。

实验性子宫肌瘤；姜黄素；干预

姜黄是姜科植物姜黄Curcuma longa L.的干燥根茎，临床用于治疗乳腺症、子宫肌瘤、子宫内膜异位症等妇科疾患，取得很好的治疗效果［1，2］，本研究通过在实验性高雌、孕激素大鼠模型［3］上观察姜黄的最主要有效成分姜黄素对大鼠子宫体指标、子宫肌瘤病理学、雌、孕激素水平的影响，探讨姜黄对子宫肌瘤大鼠的保护作用机制。

1 实验材料及方法

1.1 实验材料 清洁级雌性Wistar大鼠，体重150～180g，由福建省立医院实验动物中心提供；苯甲酸雌二醇（国药准字H12020530，1m l：5mg）天津金耀氨基酸有限公司生产，批号1203251；孕酮（国药准字H11022340，1m l：20mg），山西晋新双鹤药业有限责任公司生产，批号201206161；市售花生油，高压灭菌备用。米非司酮片（国药准字H20083780，20mg），湖北葛店人福药业有限责任公司生产，批号201207113。姜黄素，西安和霖生物技术有限公司，99%纯度。雌二醇（E2酶联免疫试剂盒购自上海劲马实验设备有限公司；孕酮 （Pg）检测试剂盒 （酶联免疫吸附试验法）购自北京乐博生物科技有限公司。

1.2 动物分组及模型建立 60只清洁级雌性Wistar大鼠，随机分为正常对照组、子宫肌瘤模型组、米非司酮对照组和姜黄素高、中、低治疗组，每组10只动物。子宫肌瘤模型组、米非司酮对照组和姜黄素治疗组每周隔日肌肉注射苯甲酸雌二醇0.2mg／d，共20周。第14周起每周肌肉注射孕酮1次0.7mg／d，共7周。正常对照组每周隔日肌肉注射高压灭菌花生油0.2ml，共20周。

1.3 实验方法 治疗组第11周起分别给予姜黄素10、20、40mg／kg灌胃；米非司酮对照组第11周起给予米非司酮3mg／kg灌胃，正常对照组和子宫肌瘤模型组给予等量生理盐水灌胃，连续10周。用药第10周末，大鼠称重后给予腹腔注射30mg／kg戊巴比妥钠，颈正中切口，颈动脉取血，2000r／min离心10min，取上清，－20℃保存，用于雌二醇和孕酮检测。取出子宫，称重，计算子宫系数。测量宫颈和宫体处的最大直径。用10%中性福尔马林固定子宫组织，石蜡包埋、切片后，行常规HE及过碘酸Schiff（PAS）染色。

1.4 检测指标

1.4.1 一般指标 子宫重量除以大鼠的体重即为子宫系数。同时测量宫颈和宫体处的最大直径。

1.4.2 子宫组织病理学检查 每张PAS染色切片在光镜下（×200）观察并测定子宫直径、子宫壁厚度、肌层厚度、子宫壁平滑肌增生状况、内皮细胞类型及增生情况及子宫壁炎细胞浸润的程度。子宫壁平滑肌增生及肥大状况由轻到重分别评为1分、2分、3分、4分。宫壁扩张、肌细胞萎缩者根据萎缩程度由轻到重评分。累积每组评分，并计算出±sd，分值越高提示子宫平滑肌增生程度越严重。

1.4.3 生化指标 大鼠血清采用酶联免疫法进行检测雌二醇和孕酮的含量。

1.5 统计学方法 采用SPSS 10.0软件进行统计学分析，计量资料均数用X＋SD表示，组间比较采用方差分析和P检验。

2 实验结果

2.1 一般情况的比较 实验期间，子宫肌瘤模型组有2只大鼠，阳性药组、治疗组低剂量组各有1只大鼠因感染等原因而死亡，未纳入最后统计。子宫肌瘤模型组大鼠较正常对照组子宫系数、宫颈直径、宫体直径增加（P＜0.01），表明子宫肌瘤大鼠模型复制成功。治疗组能降低大鼠子宫系数、宫颈直径、宫体直径，和模型组比较有统计学差异 （P＜0.001），说明药物对子宫肌瘤有抑制作用。结果见表1。

表1 大鼠子宫系数、宫颈直径、宫体直径的比较（mean±sd）

2.2 子宫病理学变化的比较 病理组织学观察结果表明，模型组大鼠子宫壁肌层增厚，平滑肌细胞排列紊乱，呈环行或局灶性，并向系膜区延伸，增生的平滑肌细胞体积变大，胞核大，核仁大而明显。内膜上皮也较正常上皮增生，呈柱状，并出现鳞状细胞化生，宫内膜腺体数目减少，有部分子宫肌瘤病变严重，宫壁组织坏死，局部有大量炎细胞浸润 （化脓性改变），治疗组及阳性组未见化脓性改变，子宫平滑肌增生程度减轻，提示治疗组及阳性对子宫肌瘤有治疗作用。结果见表2。

2.3 大鼠激素水平的比较 实验结果显示，模型组与正常组比较，大鼠血清中雌二醇的含量明显上升，而治疗组能抑制雌二醇和孕酮的上升趋势。见表2。

表2 大鼠子宫病理学和激素水平变化的比较（mean±sd）

3 讨论

现代医学认为，乳腺增生、子宫内膜异位症、子宫肌瘤等病症与机体雌激素水平过高而孕酮拮抗不足密切相关，设法降低雌激素、孕激素浓度是治疗措施的首选［4－8］。西医常采用米非司酮这一雌激素受体部分激动剂与雌二醇竞争雌激素受体，从而达到减弱雌激素作用的目的［9，10］。

我们的实验结果表明，治疗组与米非司酮组能降低大鼠子宫系数、宫颈直径、宫体直径，有统计学差异，减少子宫平滑肌增生程度，降低雌二醇和孕酮含量的趋势。传统医学把姜黄认为是活血化瘀药，因此原先的研究多是从活血，改善微循环等角度出发研究姜黄对子宫肌瘤的作用［11，12］，从新的角度揭示了姜黄的治疗作用机制，提示姜黄素是治疗雌二醇和孕酮水平异常升高致子宫肌瘤、子宫内膜异位症、乳腺增生等症的有效药物。为将来开发有效的子宫肌瘤药物提供了新的思路。

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R737.33

A

1007－8517（2013）11－0016－02

2013.03.28）

林宇星 （1964－），男，福建省立医院药学部副主任药师。