钟乳石及其饮片中成分测定研究

房 方，李 祥，陈建伟，刘圣金，马瑜璐

(南京中医药大学药学院，江苏南京 210046)

钟乳石Stalactitum，异名石钟乳(《本经》)，留公乳(《太平御览》引《本经》)，虚中、钟乳(《吴普本草》)，公乳、芦石、夏石(《别录》)，黄石砂(《药性论》)，卢布、夏乳根(《石药尔雅》)［1］，鹅管石(《纲目》)［2］。中医按其凝结位置、形状差异、色泽不同又将其分别命名为石乳、竹乳、殷孽、孔公孽、孔中孽、孔公石、石床、石脑、石林、石花、土殷孽等［3］。蒙药名为呼根一楚鲁［4］。本品始载于《神农本草经》，列为上品［5］，现收载于《中国药典》2010 年版一部［6］，为碳酸盐类矿物方解石族方解石。其味甘，性温。归肺、肾、胃经。具有温肺、助阳、平喘、制酸、通乳之功效。用于寒痰喘咳，阳虚冷喘，腰膝冷痛，胃痛泛酸，乳汁不通。主含碳酸钙(CaCO3)，此外尚含有少量的硅、铁、铝、镁和微量的砷、锰、钛、铜、锶、钠等十多种元素［7］。钟乳石常见于石灰岩山洞中，凡石灰岩山区有洞穴处皆可产出。由于岩石中部分石灰质地层被含有碳酸的水冲击溶解，自洞穴上部滴沥下降时，接触空气，放出二氧化碳，析出结晶性碳酸钙，渐次下垂结成钟乳状，即称为钟乳石［8］。主产于广西、湖北、四川、山西等省区［9］。在《中国药典》2010年版一部钟乳石项下仅有生品的含量测定项，而缺少煅钟乳石的含量测定项，由于缺乏可控的量化指标，这就致使煅钟乳石饮片的质量难以控制。同时，考虑到半仿生提取法［10］(semi-bionic extraction，SBE)是将整体药物研究法与分子药物研究法相结合，从生物药剂学的角度，模拟口服给药及药物经胃肠道转运的原理，为经消化道给药的中药制剂设计的一种新的提取工艺。为此，本实验以药典法(稀盐酸)和半仿生法提取所收集的10批主产地的钟乳石样品及其煅制品，对其进行测定，从而为钟乳石及其饮片的质量控制奠定基础。

1 实验样品、试剂及仪器

1.1 样品

1.1.1 生品 10批钟乳石样品分别收集自广西、湖北、四川、山西等主产地，经南京中医药大学药学院陈建伟教授鉴定为正品药材。分别取所收集的10批主产地的净钟乳石，粉碎，过100目筛，备用。

1.1.2 煅制品 分别取所收集的10批主产地的净钟乳石小块，置马弗炉中，在950℃下煅制20 min，取出放冷［11］。粉碎，过100目筛，备用。

1.2 试剂 胃蛋白酶(上海惠世生化试剂有限公司，批号080608);氧化锌为基准试剂;EDTA、钙黄绿素、甲基红、铬黑T、盐酸等试剂均为AR级，所用试剂均按《中国药典》2010年版方法配制或标定。

1.3 仪器 SX2—4—10型马弗炉(上海精密科学仪器有限公司);FA1104型电子分析天平(上海舜宇恒平科学仪器有限公司);HH—S型恒温水浴锅(巩义市英峪予华仪器厂);酸式滴定管等。

2 方法与结果

按《中国药典》2010年版一部“钟乳石”项下【含量测定】方法测定［6］。其中，钟乳石生品以碳酸钙计;煅钟乳石以氧化钙计;半仿生提取钟乳石生品及其煅制品以钙离子计［12］。

2.1 钟乳石生品CaCO3的测定 取本品细粉约0.12 g，精密称定，置锥形瓶中，加稀盐酸5 mL，加热使溶解，加水150 mL与甲基红指示液1滴，滴加氢氧化钾试液至显黄色，继续多加10 mL，再加钙黄绿素指示剂少量，用乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05 mol/L)滴定至溶液黄绿色荧光消失而显橙色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1 mL乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05 mol/L)相当于5.004 mg的碳酸钙(CaCO3)。结果见表1。

2.2 煅钟乳石CaO的测定 取煅制品细粉约0.12 g，精密称定，置锥形瓶中，加稀盐酸5 mL，加热使溶解，加水150 mL与甲基红指示液1滴，滴加氢氧化钾试液至显黄色，继续多加10 mL，再加钙黄绿素指示剂少量，用乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05 mol/L)滴定至溶液黄绿色荧光消失而显橙色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1 mL乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05 mol/L)相当于2.804 mg的氧化钙(CaO)。结果见表2。

Tab.1 Resultof CaCO 3 determination of Stalactitum from main habitats表1 各主产地钟乳石生品的CaCO 3测定结果

2.3 半仿生提取钟乳石生品及其煅制品Ca2+的测定 取生品或煅制品细粉约0.33 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入100 mL人工胃液，密塞，置于37℃恒温水浴中，浸提30 min，放冷，滤过，残渣用水洗涤3次，合并滤液及洗涤液，置250 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀;精密量取50 mL，置锥形瓶中，依次加入稀盐酸5 mL、水100 mL与甲基红指示液1滴，滴加氢氧化钾试液至显黄色，继续多加10 mL，再加钙黄绿素指示剂少量，用乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05 mol/L)滴定至溶液黄绿色荧光消失而显橙色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1 mL乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05 mol/L)相当于2.004 mg的钙离子。结果见表3。

表2 各主产地煅钟乳石的CaO测定结果Tab.2 Result of CaO determination of calcined Stalactitum from main habitats

3 讨论

1977年版《中国药典》中，钟乳石无含量测定项［13］;1985年版《中国药典》中，钟乳石增加了含量测定项，规定其碳酸钙(CaCO3)不得少于90.0%［14］;1990年版《中国药典》中，钟乳石的含量测定项做了修改，规定其碳酸钙(CaCO3)不得少于 95.0%［15］;此后，1995 年版［16］、2000 年版［17］、2005 年版［18］、2010 年版［6］《中国药典》沿用至今，均规定其碳酸钙(CaCO3)不得少于95.0%。而由测定结果表1可以看出，所收集的10批主产地的钟乳石生品CaCO3量差别不大，范围为89.73%～93.75%，目前标准是否定的过高，是否1985年版《中国药典》的规定更为合理，有待进一步深入研究。

对比表1和表2，可以看出，钟乳石经煅制后，滴定体积明显增加，说明煅制改变了药物原有性状，使其质地变得疏松，钟乳石煅制品中钙离子量明显增加。由表2测定结果可以看出，所收集的10批主产地的钟乳石煅制品CaO量差别不大，范围为70.70%～77.01%，建议在《中国药典》钟乳石项下增加煅钟乳石的成分定量测定，规定本品含钙以氧化钙(CaO)计为70.0%～80.0%，从而为煅钟乳石饮片的质量控制奠定基础。

表3 半仿生提取钟乳石生品及其煅制品的钙离子测定结果Tab.3 Result of calcium determination of Stalactitum and calcined Stalactitum by semi-bionic extraction

由表3可以看出，以人工胃液浸提，生品钙离子量范围为4.28%～5.03%，煅制品钙离子量范围为6.72%～9.31%。与药典法(稀盐酸)提取的测定结果相比，以人工胃液浸提的钟乳石钙溶出量减少，且各产地钙离子量差异较小，说明在半仿生提取条件下，即实际临床使用中，各产地的钙溶出量还是趋向一个相近值。因此若经药效试验及进一步的质量标准研究证实这些主产地的钟乳石均无明显差异，建议将半仿生法提取并测定其钙离子量，作为钟乳石生品、煅制品质量标准中的定量测定方法，并可补充进《中国药典》;并建议人工胃液浸提钟乳石生品钙离子量不低于4%，煅制品钙离子量不低于6%。

［1］南京中医药大学.中药大辞典:下册.［M］.上海:上海科学技术出版社，2006:2330-2331.

［2］田代华.实用中药词典:下卷［M］.北京:人民卫生出版社，2002:1405-1407.

［3］张保国.矿物药［M］.北京:中国医药科技出版社，2005:284-286.

［4］高天爱.矿物药及其应用［M］.北京:中国中医药出版社，1997:163-166.

［5］清·顾观光.神农本草经［M］.兰州:兰州大学出版社，2004:8-9.

［6］国家药典委员会.中华人民共和国药典:2010年版一部［S］.北京:中国医药科技出版社，2010:240.

［7］赵中杰.矿物药分析［M］.北京:人民卫生出版社，1991:182-188.

［8］《中药辞海》编写组.中药辞海:第二卷［M］.北京:中国医药科技出版社，1996:1554-1556.

［9］范催生.中药采收鉴别应用全书［M］.南昌:江西科学技术出版社，1995:731-732.

［10］安建忠，许志惠.新技术新方法在中草药提取方面的应用［J］.时珍国医国药，2001，12(5):465-467.

［11］房 方，李 祥，陈建伟，等.多指标综合优选钟乳石最佳炮制工艺［J］.中国医院药学杂志，2010，30(16):1352-1355.

［12］张贞丽，谢鸿霞，吕海平，等.醋煅紫石英炮制工艺的实验研究［J］.中成药，1997，19(2):21-23.

［13］卫生部药典委员会.中华人民共和国药典:1997年版一部［S］.北京:人民卫生出版社，1977:412.

［14］卫生部药典委员会.中华人民共和国药典:1985年版一部［S］.北京:人民卫生出版社，化学工业出版社，1985:219-220.

［15］卫生部药典委员会.中华人民共和国药典:1990年版一部［S］.北京:人民卫生出版社，化学工业出版社，1990:226-227.

［16］卫生部药典委员会.中华人民共和国药典:1995年版一部［S］.广州:广东科技出版社，化学工业出版社，1995:224-225.

［17］国家药典委员会.中华人民共和国药典:2000年版一部［S］.北京:化学工业出版社，2000:210.

［18］国家药典委员会.中华人民共和国药典:2005年版一部［S］.北京:化学工业出版社，2005:180.