石岩,吴秀娟,靳颖,普雄明
(新疆维吾尔自治区人民医院,乌鲁木齐830001)
狼疮带试验(lupus bandtest,LBT)是利用直接免疫荧光技术来检测红斑狼疮(lupus erythematosus,LE)患者的外观正常皮肤或皮损真、表皮交界处免疫球蛋白或补体沉积的一种方法。因此,LBT是国内外用于系统性红斑狼疮(systemlupus erythematosus,SLE)的诊断和预后评价的重要指标之一。但在我们临床工作中发现LBT在酒渣鼻中也具有一定的阳性率,为了避免造成误诊或漏诊,我们对2009—2012年有较完整资料的酒渣鼻73例及SLE 150例进行了LBT与临床资料的统计分析,现报道如下。
1.1 诊断标准 酒渣鼻及SLE的纳入与排除标准参照赵辨主编的《中国临床皮肤病学》[1]。
1.2 临床资料 酒渣鼻患者73例,男16例,女57例,年龄 18~60 岁,平均年龄(27.0±6.7)岁,病程 1个月~4年。SLE患者均是住院及门诊追踪患者,共150例,男41例,女109例,年龄15~68岁,平均年龄(25.0±8.3)岁,病程 10 d~5年,120 例有皮肤损害,30例无皮肤损害。
1.3 研究方法 取材:取皮损及皮损旁正常皮肤,皮损作石蜡切片,HE染色。皮损旁皮肤作冰冻切片用于直接免疫荧光检查,厚度为4~5 μm,空气干燥固定;荧光染色,切片上分别滴加异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FIFC)标记的羊抗人IgG、IgM、IgA、C3、纤维蛋白原,放入湿盒中置37℃温箱孵育 30 min,用 0.01 mol/L PBS(pH7.4)溶液浸洗 3次,5 min/次,风扇吹干,滴加缓冲甘油,用荧光显微镜观察。
2.1 判断标准
2.1.1 LBT阳性标准 在表皮或附件皮肤表皮真皮交界处有IgG或IgM单独存在或与其他Ig并存,也可以有补体或纤维蛋白原存在。荧光带必须是均质型、颗粒型或丝状型,荧光应当明亮。
2.1.2 荧光强度标准 阴性:表皮下基底膜带无特异性荧光颗粒;(+):高倍镜(40×5)下颗粒稀,清晰或欠清晰;(++):高倍镜下颗粒清晰明亮,较密集;(+++):高倍镜下颗粒密集或多层排列,荧光闪亮。
2.2 检查结果
2.2.1 酒渣鼻中LBT检查结果 酒渣鼻患者73例,按照《中国临床皮肤病学》上的诊断标准,经过皮肤组织病理学检查、抗核抗体、血沉等排除了红斑狼疮,73例酒渣鼻LBT阳性有14例,阳性率19.18%(14/73)。73例标本均为面部皮损部位,IgG、IgM、IgA、C3、纤维蛋白原均阳性者0例,免疫球蛋白阳性率分别是IgA (11例,15.07%)、C3(9例,12.33%)、IgG(8 例,10.95%)、IgM(7 例,9.59%)、纤维蛋白原(0%)。
2.2.2 SLE中LBT检查结果 150例SLE患者按照《中国临床皮肤病学》上的诊断标准进行判定,LBT阳性有128例,阳性率85.33%(128/150),其中103例为皮损部位、20例暴光部位正常皮肤、5例非暴光部位正常皮肤。两性别间比较,阳性率在两性别间无统计学意义。IgG、IgM、IgA、C3、纤维蛋白原均阳性者38例,阳性率25.33%。其余90例阳性者分别为IgG或IgM阳性,或合并其他Ig,5例非暴光部位正常皮肤LBT IgG、IgM、IgA、C3、纤维蛋白原均阳性。免疫球蛋白中IgM阳性率最高(72.67%),依次是 IgG(68.00%),IgA(61.33%),补体 C3(55.33%),纤维蛋白原(28.67%),见表 1。
2.2.3 LBT在酒渣鼻和SLE中表达阳性率的比较LBT在酒渣鼻中的阳性率19.18%(14/73),在SLE中的阳性率85.33%(128/150),差异有统计学意义(χ2=25.01,P<0.05)。
表1 150例SLE的LBT检测结果阳性情况 例(%)
酒渣鼻又称玫瑰痤疮,主要发生于面部中央和鼻部。本病发病原因不明,可能在皮脂溢出的基础上,由于各种因素的作用使患者血管运动神经失调,毛细血管长期扩张所致。红斑初为暂时性,继而持久不退,并伴有毛细血管扩张,包括局部血管舒缩神经失调,毛囊虫及局部反复感染,使用辛辣食物、饮酒、冷热刺激、精神紧张、情绪激动、内分泌功能障碍等。近年来,幽门螺杆菌感染以及免疫因素与本病的关系也开始引起重视。SLE是一种弥漫性、全身性自身免疫病,主要累及皮肤黏膜、骨骼肌肉、肾脏及中枢神经系统,同时还可以累及肺、心脏、血液等多个器官和系统,表现出多种临床表现;血清中可检测到多种自身抗体和免疫学异常。其皮肤病变主要为盘状红斑,是SLE的慢性皮肤损害,约有2%~10%的盘状红斑可发展为系统性红斑狼疮。亚急性皮肤性狼疮可见于7%~27%的患者,多为对称性,常见于阳光暴露的部位,红斑可为鳞屑样丘疹或多形性环状红斑,多形性环状红斑可融合成大片伴中心低色素区,愈合后不留瘢痕。急性皮肤病变的典型表现是蝶形红斑,约见于30%~60%的SLE患者,常是系统性红斑狼疮的起始表现,光照可使红斑加重或诱发红斑。
LBT是利用直接免疫荧光技术来检测红斑狼疮患者的外观正常皮肤或皮损真、表皮交界处免疫球蛋白或补体沉积的一种方法。表皮和真皮交界处直接免疫荧光法可发现免疫球蛋白和补体沉积,荧光显微镜下为连线的、融合的、致密的、带状荧光染色型。LBT特异性和临床与沉积蛋白成分有关,沉积蛋白成分越多特异性越高。LBT是临床上诊断SLE的重要检查方法,尤其是无皮损的SLE,无法以组织病理学检查辅助诊断者更为重要。本组SLE皮损LBT阳性率为85.33%(128/150),其阳性率比国外报道的70%~80%略高一些[2]。同时结果也表明SLE患者LBT不论是皮损还是非曝光皮肤其阳性率均较高。本组无皮肤损害者30例,LBT阳性者占25例,阳性率83.33%,与国外报道一致[3]。关于LBT各免疫成分出现的阳性率有报道以IgG最高,而本文结果显示IgM阳性率最高(72.67%),依次是IgG(68.00%),IgA(61.33%),补体 C3(55.33%),纤维蛋白原(28.67%),说明IgM及IgG在LBT中敏感性显著高于IgA、补体C3及纤维蛋白原,提示诊断SLE的特异性较高。与叶仁高等[4]报道的结果基本一致。在本组SLE患者有22例患者LBT表达阴性,表明阴性结果也不能排除SLE,这与Wallace等[5]观点相一致。
LBT在正常健康人阳光暴露区也可阳性,在酒渣鼻、药疹、血管炎、多形性日光疹、脂溢性皮炎和面部肉芽肿等患者可出现LBT阳性。但多为不连续的颗粒状、块状染色型,且沉积蛋白成分单一。酒渣鼻30~50岁多见,女性多于男性,是发生于面中部的慢性炎症性疾病,而SLE也可表现为面部红斑,两者均有面部皮肤损害,为了鉴别诊断及避免临床上的误诊和漏诊,特将LBT在两者中的检测结果进行分析比较。本组酒渣鼻患者73例,LBT阳性有14例,阳性率19.18%(14/73),免疫球蛋白阳性率分别是 IgA(15.07%)、C3(12.33%)、IgG(10.95%)、IgM(9.59%)、纤维蛋白原(0%),其阳性率明显低于系统性红斑狼疮。另外,酒渣鼻患者中LBT沉积蛋白成分单一,IgG、IgM、IgA、C3、纤维蛋白原均阳性者为0例,阳性率最高的是IgA(15.07%),而本组系统性红斑狼疮患者IgG、IgM、IgA、C3、纤维蛋白原均阳性者38例,阳性率25.33%,两者阳性率差异有统计学意义。表明LBT试验在SLE中具有特异性,但在酒渣鼻患者中也有一定的阳性率,因此,在临床工作中为了避免造成误诊和漏诊,LBT在酒渣鼻和SLE中的检测可以起到辅助诊断的作用。
[1] 赵辨.中国临床皮肤病学[M].南京:江苏科学技术出版社,2009:569-837.
[2] Isfer RS,Sanches JuniorJA,Festa Neto C,et al.Direct immunofluorescence lupus erythematosus(LE)[J].Rev Paul Med,1996,2:114.
[3] Zecevic RD.Significance of deposits of immunoglobulins G,A,M and C3 complement component in the basal membrane zone of clinically unchanged skin for the diagnosis and evaluation of systemic lupus erythematosus activity[J].Vojnosanit Pregl,2001,58:359-374.
[4] 韩珠,叶任高,钟良宝.狼疮带试验对诊断系统性红斑狼疮的意义[J].中国实验诊断学,2002,6(5):335-337.
[5] Wallace DJ,Hahn BH.Dubois’lupus erythematosus[M].5th edition.Williams&wilkins,1997:708-710.