溴甲酚绿与溴甲酚蓝显现液显现潜血印痕的比较

王跃

（北京警察学院 公安科技系，北京 102202）

传统的显现技术主要使用联苯胺，联苯胺显现血指纹灵敏度很高，但有很强的致癌性，已被新研制无毒的四甲基联苯胺所取代。四甲基联苯胺能够将潜血指纹显现成为蓝绿色，是国内、外最常用的血指纹显现方法。但是，四甲基联苯胺对非渗透客体表面潜血印痕容易造成扩散现象，影响细节特征；且四甲基联苯胺使用涂抹方法，不适用于血痕量多、面积较大现场使用。

而溴甲酚绿、溴甲酚蓝与四丁基碘化铵酒精溶液，既能有效显现出传统渗透客体表面血潜印痕，又能有效显现出非渗透客体表面的血潜印痕。该技术适用客体广泛、操作简便、价格低、安全环保。对血潜印痕反应敏感（目前已经测试1/1000浓度的血潜印痕），显出纹线反差大、清晰连贯、认定质量高；并且对四甲基联苯胺处理后潜血印痕有较好的增强效果，具有较高的研究价值。

溴甲酚绿、溴甲酚蓝酒精显现液显现潜血印痕的主要原理是：血液中含有大量的蛋白质和血细胞，细胞膜也有蛋白质和磷脂组成，相应的血潜印痕中存在着大量的蛋白质；蛋白质是由氨基酸多步缩合而成复杂的大分子，其分子中含有大量的氨基和羧基，氨基和羧基可以使蛋白质带有大量的正、负电荷，这些电荷与溴甲酚绿和溴甲酚蓝中侧链（钠链）的电荷相互吸附，进而发生化学反应，形成绿色稳定的络合物，从而将血潜印痕显现出来，而溴甲酚绿、溴甲酚蓝在溶剂四丁基碘化铵作用下，浅绿色背景颜色容易被无水乙醇溶液清洗，有效增强背景反差。

1 材料与方法

1.1 仪 器

溴甲酚绿、溴甲酚蓝（北京化工厂）、四丁基碘化铵（北京化工厂）、无水乙醇（北京化学试剂公司）、四甲基联苯胺（北京化工厂）、30%过氧化氢（北京化工厂）、蒸馏水；人血；脱脂棉；Nikon D80 相机、Nikon 60mm微距镜头；烧杯；玻璃棒；滴管；雾化器；瓷砖、塑料、报纸、牛皮纸、点滴板。

1.2 血液

血液样本来自匿名的捐赠者。所有设备用于提取、存储血的实验器材都是无菌条件下，所用于实验和阳性对照血液都是无菌包装，血液没有受到任何形式的抗凝血剂或其他污染物。

1.3 显现液配制

潜血印痕的醇基溶液有三种：无水乙醇固定液、显现液、无水乙醇冲洗液。

显现液

步骤1称取1g溴甲酚绿和1g溴甲酚蓝、1g四丁基碘化铵，倒入容量为2 000ml的烧杯中；

步骤2量取750ml无水乙醇倒入上述烧杯中；

步骤3量取250ml蒸馏水倒入上述烧杯中用玻璃棒搅拌，溶液呈黄色透明溶液即可；

步骤4将配制好的显现液倒入干净的深色磨砂玻璃瓶中，可以长期保存。

1.4 样本制作

分别把无菌血液稀释为原血（100%）、1∶10、1∶100、1∶1000；渗透客体灵敏检测使用无菌脱脂棉签，分别浸蘸上述样品血液，涂抹在手指表面，捺印在复印纸上，每种浓度50枚，自然晾干；非渗透客体选择经高温消毒的白色陶瓷点滴板，使用滴管吸取上述样品血液，点滴50次，自然晾干。

1.5 操作步骤

在使用显现液显现、增强血潜印痕之前，应将可以看到的血印痕拍照下来。

步骤1将无水乙醇盛入雾化喷瓶；

步骤2打开雾化喷瓶在高约50～60cm处均匀喷涂遗留有潜血印痕的表面，喷涂2～3次，确保喷涂均匀，固定充分，保持浸润状态；

步骤3将溴甲酚绿显现液盛入雾化喷瓶；

步骤4打开雾化喷瓶在高约50～60cm处均匀喷涂遗留有潜血印痕的表面，喷涂2～3次，确保喷涂均匀，反应充分；

步骤5将冲洗液无水乙醇盛入雾化喷瓶；

步骤6打开雾化喷瓶在高约50～60cm处均匀喷涂遗留有潜血印痕的表面，可喷涂2～3次，确保喷涂均匀，冲洗充分，1min左右显现绿色纹线。

步骤7使用棉纸吸干多余残液，也可以使用吸瓶处理；

步骤8拍照记录。

复印纸和点滴板上样本经显现液喷涂之后，立即有蓝绿色纹线出现，经无水乙醇清洗后，手印纹线清晰连贯，背景反差明显（见表1）。

表1 溴甲酚绿和溴甲酚蓝酒精溶液潜血印痕显现的灵敏性

1.6 与四甲基联苯胺显现效果交叉比较

1.6.1 样本制作

使用无水乙醇的脱脂棉擦拭手指后5min，蘸上血液，使用连续5次在白色瓷砖、塑料、复印纸、牛皮纸表面捺印，形成潜血手印样本；白色瓷砖、塑料骑缝捺印，复印纸、牛皮纸从中间剪开，以便溴甲酚绿和溴甲酚蓝显现液与四甲基联苯胺显现液分别使用显现，比较显现效果。

1.6.2 四甲基联苯胺显现液配制

四甲基联苯胺1g溶于100ml无水乙醇，加入30%过氧化氢2ml。

1.6.3 操作步骤

将左半侧指纹使用溴甲酚绿和溴甲酚蓝显现液显现，右半侧使用四甲基联苯胺显现；右半侧指纹四甲基联苯胺处理后，拍照记录干燥后，使用溴甲酚绿和溴甲酚蓝显现液再处理。

第一，溴甲酚绿和溴甲酚蓝酒精显现液显现操作步骤依照（见上1.5）操作。

第二，四甲基联苯胺操作步骤

步骤1将四甲基联苯胺溶液点注在脱脂棉上；

步骤2用脱脂棉轻擦潜血手印部位；

步骤3拍照记录

第三，溴甲酚绿和溴甲酚蓝酒精显现液增强四甲基联苯胺处理后的样本操作步骤依照（见上1.5）操作。

2 结果

白色瓷砖、塑料、复印纸、牛皮纸捺有潜血手印部位喷涂溴甲酚绿和溴甲酚蓝显现液后即有蓝绿色手印纹线出现，使用无水乙醇清洗后，纹线清晰连贯、背景反差明显，渗透客体和非渗透客体表面显现效果均较好；四甲基联苯胺处理后，2～3min蓝绿色的纹线渐渐出现，约5min后达到最强，渗透客体复印纸、牛皮纸上手印纹线效果较好，非渗透客体瓷砖、塑料有蓝绿色背景；经四甲基联苯胺处理瓷砖、塑料、复印纸、牛皮纸的检材，经溴甲酚绿和溴甲酚蓝显现液再处理后，蓝绿色纹线立即得到增强，反差更为明显（见图 1～8）。

图1 白色瓷砖

图2 白色瓷砖

图3 塑料

图4 塑料

图5 复印纸

图6 复印纸

图7 牛皮纸

图8 牛皮纸

3 结论

溴甲酚绿、溴甲酚蓝与四丁基碘化铵酒精溶液显现法能够作为潜血印痕新型显现技术，既能够有效显现渗透和非渗透客体表面潜血印痕，也能够作为四甲基联苯胺的后处理和增强试剂，具有较大应用推广价值。