张雪松 刘微 李佳
3种血浆速冻方法的比较
张雪松 刘微 李佳
血浆速冻;血浆中心温度
《血站技术操作规程》(2012版)中对血浆的速冻提出了具体的要求, 明确血浆速冻环节在保存Ⅷ因子加工过程的重要性;同时提出要在60min内将血浆中心温度降至-30℃以下[1]。目前大部分血站采用的血浆速冻方法有3种, 第一种是低温保存箱法, 第二种是国产速冻机法, 第三种是进口平板速冻机法, 作者对这3种方法进行了比较, 报告如下。
1.1 一般资料 长春市中心血站采集的400 ml全血中分离的血浆。
1.2 仪器 -50℃低温保存箱MDF-U460BR(日本三洋公司);血浆速冻机HRSDX-386(青岛海尔);平板接触式血浆速冻机MBF21(德国Dometic);血浆模拟袋(德国多美达)。
1.3 方法
1.3.1 校准 将血浆模拟袋的测温探头与血站质控用的标准温度计比对, 二者检测温度差为0.01℃, 证明探头测温数值准确, 用模拟袋能测试出血浆的中心温度。
1.3.2 低温保存箱法 将-50℃低温保存箱预温到-45℃以下, 将40袋200 ml血浆平铺, 将血浆模拟袋放在中间, 测温探头的数据线与平板速冻机的测温面板相联, 开始速冻;每隔10 min记录面板的温度。
1.3.3 国产速冻机法 将血浆速冻机预温至-50℃, 将40袋200 ml血浆平铺, 将血浆模拟袋放在中间, 开始速冻;将测温探头的数据线与平板速冻机的测温面板相联, 每隔10 min记录面板的温度;采用相同方法分别记录70袋和110袋不同数量血浆的温度变化。
1.3.4 平板接触式血浆速冻机法 将速冻机预温, 上下冷冻板的温度下降到-45℃以下, 将30袋200 ml血浆平铺于下冷冻板上, 将血浆模拟袋放在中间, 测温探头的数据线与平板速冻机的测温面板相联, 关闭冷板, 开始速冻;每隔10 min记录面板的温度, 5次的试验结果见表1。
见表1。
国家在新版《全血和成分血质量要求》对新鲜冰冻血浆的定义是:采集后储存于冷藏环境中的全血, 最好在6小时(保养液为ACD)或8 h(保养液为CPD或CPDA-1)内, 但不超过18 h将血浆分离出并速冻呈固态的成分血[2]。同时在新版《血站技术操作规程》中提出了速冻的概念, 明确了保存凝血因子Ⅷ中二个关键的参数是冷冻速率和血浆中心温度, 以往的检测方法都是通过检测血浆表面的温度来检测血浆的速冻效果, 而血浆模拟袋是一个袋子中有上下二层, 分别可以注入液体, 能模拟出不同规格血浆的厚度;中间是一个套管, 可以放置测温探头。这样就可以准确检测出血浆的中心温度。从我们的试验结果可看出, 3种速冻的方法效果比较有显著差异。速冻同样数量的血浆, 平板接触式速冻机需要50 min, 血浆速冻机(青岛海尔)速冻机需要70 min, 而低温存箱则需要200 min。
从速冻的原理来看:平板接触式速冻机是采用的是两块冷板夹心法, 通过高效压缩机使2个金属板的温度稳定在-50℃左右, 血浆通过低温金属直接接触进行热传递, 接触多的是浆袋厚的中间部位。结冰是由浆袋中间向四周扩散,最后是边角;金属的热传导率为58w/m.k是空气的上百倍(空气的热传导率为0.28w/m.k),因此平板接触式速冻机法使血浆降温过程所需时间少[3],降温效率得到极大的提高。只要花费50 min, 血浆中心温度就能达到-30℃以下, 符合《血站技术操作规程》要求。血浆速冻机(青岛海尔)是采用冷板接触和空气对流技术, 低温金属板下方有冷冻导管, 同时加上强劲低温风冷技术, 与金属板接触面是由中间向四周结冰,另一面是先四周后中间的结冰方式, 也能在70 min内使得血浆中心温度能达到-30℃以下。同比平板接触式速冻机要慢一些, 但大批量速冻时效果较好, 所花费的总体时间较少。低温保存箱完全是采用风冷技术, 速冻血浆是由四周边角开始结冰, 再缓慢向浆袋中间扩散, 中心区的结冰速度比较慢。虽然能在200 min内冻好血浆, 但其降温缓慢, 前170 min的温度都处于-8.0℃, 不能起到速冻的作用。
表1 三种血浆速冻法的比较
我们认为平板接触式速冻机作为新一代血浆速冻设备具有降温速度快、时间短、效果好的优点, 能满足新鲜冰冻血浆和制备冷沉淀的原料浆速冻要求。唯一不足是速冻容量不够大(一次最多只能速冻30袋), 不能满足大批量血浆的速冻;而血浆速冻机(青岛海尔)虽然速冻效果略低于平板接触式速冻机, 但有容量大, 大批量血浆速冻总体时间短等优点。
[1] 中华人民共和国卫生部 .血站技术操作规程,2012.
[2] 中华人民共和国卫生部.全血及成分血质量要求 ,GB18469-2012.
[3] 陈文彪.2种血浆速冻方法的比较.中国输血杂志,2010, 23(4):298-299.
长春市中心血站