2010-2012年浙江省部分地区规模猪场猪瘟抗体的检测分析

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(1.浙江大学动物科学学院，浙江杭州 310058；2.衢州出入境检验检疫局； 3.浙江出入境检验检疫局)

猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种急性、接触性传染病。一年四季均可发病，主要通过直接接触，或因接触被污染的媒介物而发病。猪瘟在我国被列为一类动物传染病，对养猪业危害极大。生产上，主要通过疫苗免疫预防，抗体水平监测是评价免疫效果的重要手段，可为制定免疫程序提供科学依据。

本试验应用美国IDEXX公司提供的猪瘟病毒抗体阻断ELASA检测方法及试剂盒，对2010年至2012年采自浙江杭州、金华、衢州、湖州、绍兴等5地市28家规模养猪场不同生长阶段的猪血清进行猪瘟抗体水平检测，以及时了解免疫效果,为猪瘟防控提供依据和参考。

1 材料与方法

1.1待测血清样品 2010-2012年，每年4月、11月对浙江省杭州、金华、衢州、湖州、绍兴等5地市28家规模猪场进行抽样普查。经耳静脉或前腔静脉无菌采集血液样品，自然凝固后低温离心分离血清，置4℃冰箱，保存备用。

其中60～65日龄仔猪血清1326头份，90～95日龄生长猪血清1326头份，150～160日龄育肥猪血清1208份。

1.2检测试剂 包被猪瘟病毒96孔板、10倍浓缩洗液、样品稀释液、酶标抗猪瘟抗体、TMB底物、终止液、阳性标准品、阴性标准品，均为美国IDEXX公司诊断试剂产品。全自动酶标仪为美国伯乐产品(BIO-RAD 550)，移液器为德国EPPENDORF产品。

1.3检测方法 抗体检测按照美国IDEXX公司《猪瘟抗体的阻断诊断方法》进行。结果计算用%IN判定，计算公式：%IN=[(阴性对照-样品数)/阴性对照] ×100。

阴性对照的平均OD450大于O.50，阳性对照的阻断率大于50%，检测结果有效。如果被检样本的阻断率大于或等于40%，该样本可判为阳性(有CSFV抗体存在)；如果被检样本的阻断率小于或等于30%，该样本可判为阴性(无抗CSFV抗体存在)；如果被检样本的阻断率在30%～40%之间，该样本可判为可疑。可疑样品2周后再次进行检测。

2 试验结果

2.1检测猪场及品种 本次检测范围包括浙江杭州、金华、衢州、湖州、绍兴等5地市28家规模猪场，品种为外三元杂种商品猪。

2.2检测结果

2.2.1不同地区规模猪场猪瘟抗体水平的检测结果 详见表1。

表1 不同地区规模猪场猪瘟抗体水平的检测结果

由表1可见，浙江各地规模猪场猪瘟免疫状态良好，抗体水平检测合格率基本维持在75%以上。其中，较好的有金华、绍兴、杭州等地，而衢州、湖州两地相对较低。

通过Person Chi-Square检验，χ2=21.572，P<0.05，可以认为不同地区规模猪场猪瘟免疫统计学分析有显著性差异。

2.2.2不同年份猪瘟抗体水平的检测结果 详见表2。

表2 不同年份规模猪场猪瘟抗体水平的检测结果

由表2可见，近3年来，浙江地区规模猪场猪瘟抗体阳性样品率在76.16%～88.39%之间，抗体水平较为稳定。

通过Person Chi-Square检验，χ2=25.988，P<0.05，可以认为不同年份的规模猪场猪瘟免疫统计学分析有显著性差异。

2.2.3不同猪群猪瘟抗体水平的检测结果 详见表3。

表3 不同猪群猪瘟抗体水平的检测结果

由表3可见，60～65日龄仔猪抗体阳性率较低，仅76.09%，90～95日龄生长猪抗体阳性率达到80.84%，而150～160日龄生长猪抗体阳性率为84.77%。

通过Person Chi-Square检验，χ2=9.464，P<0.05，可以认为不同日龄的规模猪场猪瘟免疫统计学分析有显著性差异。

3 小结与讨论

3.1本次规模猪场猪瘟抗体检测28家猪场，其中湖州4家，检测血清521头份；杭州6家，检测血清835头份；衢州4家，检测血清526头份；绍兴6家，检测血清862头份；金华8家，检测血清1116头份。5个地区28家规模猪场，猪瘟抗体水平平均合格率80.44%。

检测结果表明，5个地区28家规模猪场猪瘟免疫保护状态尚可，猪群具有一定的群体免疫力，降低了规模猪场对猪瘟的易感性和传染性。但在饲养环境条件不良、气候改变、应激等情况下，难以抵御强毒攻击，仍存在着一定的安全隐患。

3.22010-2012年浙江省部分地区猪瘟抗体水平基本稳定，阳性率在76.16%～88.39%，说明近年来该省大力推行猪瘟疫苗免费接种，提高猪群群体免疫力，已经取得一定成效。

虽然各规模猪场均十分重视和主动实施猪瘟疫苗的免疫接种工作，但仍有部分生长猪血清抗体水平达不到保护水平。推测其可能原因，一是抗体水平的高低与采样时间有一定影响，由于60日龄左右仔猪的部分血样是在猪瘟第二次免疫后较短时间内采集，有可能检测不出抗体或抗体水平较低有关。二是某些猪场普遍表现为低水平的抗体可能与猪场圆环病毒等疾病混合感染有关。三是可能与疫苗因素或疫苗接种技术有关，免疫程序不合理，往往可导致抗体水平较低。

3.360～65日龄仔猪抗体阳性率相对较低，可能与二免接种时间及母源抗体抑制有关，但都高于农业部要求的猪瘟免疫合格率70%以上。

检测结果表明，这与其他有关规模化猪场进行猪瘟免疫抗体检测，保育猪的猪瘟抗体水平在各个猪群中最为薄弱的结论基本一致。

3.4规模化猪场应定期开展猪瘟免疫抗体水平检测，及时掌握猪瘟群体免疫力，以有利于猪瘟预防和控制流行。

有报道规模猪场应开展种猪扁桃体中猪瘟病毒检测，笔者建议猪场应定期采血检测猪瘟抗体，一般每年应进行3～4次，采样比例为5%～10%。