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(1.广西柳州畜牧兽医学校,广西柳州 545003;2.广西大学动物科技学院)
近年来,广西的牛种改良工作在有关部门的重视和支持下,已经取得了显著成绩,2005年改良配种母牛60万头。通过牛种改良工作的推广和宣传,农民的良种意识得到了明显提高,逐步实现由单一的役用型向商品化生产发展。优质、高产的良种牛倍受养牛农户的欢迎。各地的良种牛出现了供不应求的局面,市场前景看好。
牛为单胎动物,繁殖率较低(尤其是水牛),自然本交的繁殖方式已不能适应发展需要,人工授精技术已成为目前牛种改良工作的主要繁殖方式,提高配种受胎率已成为配种繁殖的关键技术问题。尤其是水牛,配种受胎率较低,严重影响了养殖农户参与牛种改良的积极性。影响配种受胎率的因素很多,如母牛的发情鉴定、适时输精、正确解冻、冻精质量、输精技术及输精部位等。本试验主要就输精部位对配种受胎率的影响进行研究,旨在提高配种受胎率,为准确选择输精部位提供临床依据。
1.1试验动物 随机选择广西柳州地区农村自然发情母牛900头,其中黄牛450头,水牛450头,体重230~350 kg,胎次在2~6胎之间。将自然发情的母牛900头分为两大组。
第一组采用冷冻精液输精,分为5个试验小组,即Ⅰ组采用子宫颈内输精;Ⅱ组采用子宫颈与子宫体交界处输精;Ⅲ组采用子宫体前1/3处输精;Ⅳ组采用子宫颈内5~6 cm处输精;Ⅴ组采用子宫体与子宫角分叉处输精。观察不同输精部位对母牛配种受胎率的影响(详见表1)。
第二组采用新鲜精液输精,分为5个试验小组,各试验小组的输精部位同第一组。观察不同输精部位对母牛配种受胎率的影响(详见表2)。
1.2供试精液 供试用冷冻精液由广西壮族自治区畜禽品种改良站提供,公牛编号为799,745,735,803,857,881,697,445,精子活力黄牛0.3,水牛0.35以上;新鲜精液由广西壮族自治区贺州金犊牧业有限公司及本地良种牛饲养场提供,公牛编号为456、239、379,精子活力0.7以上。
试验输精技术按照广西牛人工授精技术操作规程进行规范操作。
1.3发情鉴定 母牛表现兴奋,放牧时抬头四望,采食量下降,喜欢接近公牛或有公牛跟随,出现爬跨现象,举臀翘尾,后肢外张,部分母牛阴门肿胀、流出粘液,阴道粘膜充血。
表1 不同部位输精(冻精)对母牛配种受胎率的影响试验分组设计
表2 不同部位输精(鲜精)对母牛配种受胎率的影响试验分组设计
1.4输精时间 母牛性欲减退,拒绝爬跨;外生殖器充血肿胀消退,外阴部皱折明显,阴道粘膜颜色变淡(淡红色);粘液少而浓稠或糊状, 灰白色或乳白色,牵缕性不强,粘性差;直肠检查,卵巢表面紧胀,软化部位大,波动明显,有一触即破的感觉。
1.5效果评价 发情母牛输精后,观察母牛返情情况,配种母牛3个月后孕检,计算出受胎率(受胎率=受胎母牛数/配种母牛数×100%)。
不同输精部位对母牛配种受胎率的影响,详见表3。
表3 不同部位输精对母牛配种受胎率的影响结果
2.1冷冻精液组 由表3可知,采用子宫颈与子宫体交界处输精的Ⅱ组配种受胎率黄牛达86.67%,水牛达66.67%,显著高于Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组(P<0.01)。
结果表明,①母牛的最佳输精部位在子宫颈与子宫体交界处,受胎率最高;②子宫颈内输精(Ⅰ组),效果最差,受胎率为0;采用子宫颈内5~6 cm处输精(Ⅳ组)及子宫体与子宫角分叉处输精(Ⅴ组),因输精部位过深,精子不能顺利倒流进入交界处,受胎率也较低。③采用子宫体前1/3处输精(Ⅲ组),配种效果仅次于Ⅱ组,受胎率黄牛达60.0%,水牛达40.0%。
2.2新鲜精液组 由表3可见,配种受胎率也以Ⅱ组为最理想,黄牛达80.0%,水牛达60.0%,显著高于Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组(P<0.01)。试验结果进一步表明,母牛的最佳输精部位在子宫颈与子宫体交界处,受胎率最高;采用子宫体前1/3处(Ⅲ组)及子宫颈内输精(Ⅰ组)输精,配种效果仅次于Ⅱ组,受胎率分别达33.33%~66.67%和13.33%~46.67%;采用子宫体与子宫角分叉处输精,配种效果最差,受胎率仅为13.33%。
冷冻精液与新鲜精液组相比,由表3可见,采用子宫颈与子宫体交界处输精,两组受胎率(66.67%~86.67%和60.0%~80.0%)无明显差异(P>0.05),表明冷冻精液精子活力黄牛0.3、水牛0.35以上,已达到确保母牛受孕的要求,可以取得理想的配种效果。同时可见,新鲜精液组的Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组均有不同程度的母牛受胎,表明新鲜精液的精子活力高于冷冻精液,有足够的能量到达输精部位达到受精效果。
3.1不同输精部位,对母牛的配种受胎率有明显影响,采用子宫颈与子宫体交界处输精,配种效果最好,受胎率最高。
采用冷冻精液与新鲜精液配种对母牛受胎率有一定影响,新鲜精液配种效果一般优于冷冻精液的配种效果。
3.2试验发现,黄牛的配种受胎率明显高于水牛,笔者认为原因如下。
一是黄牛发情症状比较明显,发情持续时间比较一致,一般在发情后24~36 h配种比较适宜,配种时间容易掌握;水牛发情征候则较不明显,发情持续时间较长,一般为24~96 h,部分可长达7 d以上,配种时间较难掌握,适时配种比较困难。
二是直肠检查触摸卵巢发现,黄牛卵巢上卵泡发育比较明显,水牛卵巢上滤泡的发育较不明显,只感到卵巢变大,有部分软化点,检查中未发现有似黄牛呈球状凸出于卵巢表面的个例,判断水牛卵泡发育程度比较困难,很难划分明显的时期,仅能依靠触诊卵巢表面的软硬、紧张、波动情况来确定适时输精时间。
三是水牛出现卵巢静止现象较多。直肠检查触摸卵巢时发现,水牛虽然表现发情,但不一定有卵泡发育,这类水牛配种一般不可能受孕。
四是冷冻精液解冻输精后,在母牛生殖道中保持受精能力的时间黄牛明显长于水牛。
实践中发现,水牛在发情中期配种受胎率很低,甚至不能受胎,黄牛则在发情中期配种仍有相当部分母牛受胎,取得理想受胎率,表明水牛冻精解冻后,母体内保存受精能力的时间比黄牛要短。
3.3本试验仅局限于当地的黄牛、水牛间进行,黑白花奶牛,因子宫结构较大,采用子宫体前1/3处输精受胎率可能更高,采用子宫颈内5~6 cm处及子宫颈内输精则受胎率可能更低。
笔者认为最佳输精部位仍为子宫颈与子宫体交界处。