乙肝病毒大蛋白阳性患者血清中HBV DNA及HBV血清学标志物的检测及意义

罗文明，陈 琳

（江苏省南通市第三人民医院检验科 226006）

乙型肝炎病毒（HBV）感染是一个全球性的公共卫生问题，它的发病率较高，且易慢性化，进而发展为肝硬化甚至原发性肝癌。我国属HBV感染高流行区，一般人群的乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）阳性率为9.75%。2005年，我国将乙型肝炎首次列为当今我国危害最严重的四大传染病之一［1］。乙型肝炎病毒大蛋白（hepatitis B virus large surface protein，HBV-LP）是HBV包膜蛋白组成成分之一，存在于感染性Dane颗粒和亚病毒颗粒上，具有双重跨膜拓扑结构。不同状态下HBV感染者血清中病毒颗粒HBV-LP含量不同，非复制期间不含病毒DNA的小球形颗粒和管形颗粒中HBV-LP含量极低，而含病毒DNA的Dane颗粒中HBV-LP的含量可达20%，因而提示 HBV-LP水平可能与 HBV含量密切相关［2］。本文对213例HBV-LP阳性的乙型肝炎患者样本进行HBV DNA及HBV-M的检测，旨在探讨HBV-LP与HBV DNA及HBV-M间相关性及临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 213例HBV-LP阳性样本均为本院2010年12月2日至2012年5月31日传染病区住院患者，其中男154例，女59例，年龄16～86岁，平均年龄42.3岁。

1.2 试剂与方法 HBV-LP与HBV-M采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法，HBV DNA采用荧光定量聚合酶链反应（PCR）法，其中HBV-M和HBV DNA试剂由上海科华生物有限公司提供，HBV-LP为北京贝尔生物工程公司产品。

2 结 果

2.1 213例HBV-LP阳性患者各类HBV血清学阳性模式中HBV DNA总阳性率为86.38%，血清学模式中以HBsAg、乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）、乙型肝炎病毒核心抗体（抗－HBc）三者均为阳性（大三阳）的DNA阳性患者数量最多，比例也很高（95.16%），其次为 HBsAg、乙型肝炎病毒e抗体（抗－HBe）、抗-HBc三者阳性（小三阳）33例（73.33%）和 HBsAg、抗-HBc二者阳性25例（69.44%）。HBV-LP阳性患者 HBV感染各种模式的HBV DNA检测情况见表1。

表1 HBV-LP阳性患者各类HBV血清学阳性模式与HBV DNA检测的相关性

2.2 213例HBV-LP阳性样本吸光度（A）值与HBV DNA之间的关系 测定HBV-LP阳性吸光度（A）值与HBV DNA拷贝数存在正相关，即HBV DNA拷贝数越大，HBV-LP测定的吸光度（A）值越大（表2）。

表2 213例HBV-LP阳性样本吸光度（A）值与HBV DNA阳性拷贝数的相关性

3 讨 论

HBV DNA是HBV感染与复制的直接证明，但DNA检测不出并不意味着已经清除了病毒，因为作为病毒复制重要指标的肝内cccDNA的降低远低于血清HBV DNA的水平，血清HBV DNA不能真实准确地反映肝组织内HBV感染及复制的情况，尤其在DNA低水平时，肝内DNA仍可维持一定水平。有动物模型证实HBV感染者血清的感染性不仅依赖于Dane颗粒的多少，还依赖于富含大蛋白的亚病毒颗粒的数量［3］。大蛋白HBV-LP是 HBV Dane颗粒和亚病毒颗粒（管状颗粒）的主要包膜成分，与HBV复制程度密切相关，在感染早期，它与细胞受体结合并介导病毒的细胞内摄入，在感染晚期是病毒组装和分泌的关键［4］。因此检测HBV-LP作为临床判定体内HBV复制和治疗及预后判断具有重要意义。

本研究结果显示，213例HBV-LP阳性患者中共有184例（86.32%）血清 HBV DNA阳性，表明二者具有良好的相关性。另仍有29例（13.68%）HBV DNA测定阴性，其原因可能为：（1）含有HBV-LP的亚病毒颗粒（管状颗粒）的数量远远大于完整病毒颗粒的数量，血液中消退时间也晚于HBV DNA。（2）HBV基因的变异频繁和PCR引物局限性导致一定的漏检率，而HBV-LP采用单克隆抗体，特异性识别，受基因变异影响小。（3）抗病毒药物的广泛使用，最大限度地抑制已经形成的病毒继续表达蛋白，以病毒DNA为模板的转录和病毒蛋白的转译表达不受影响。因此HBV DNA阴性并不意味病毒的完全清除，其亚病毒颗粒在细胞内积累使细胞毛玻璃化，产生直接毒性作用，导致肝细胞液泡化和细胞凋亡。提示HBV-LP检测可作为弥补HBV DNA的某些不足，亦可作为HBV复制活跃的可靠指标。

表2结果显示，HBV-LP检测的吸光度（A）值与 HBV DNA拷贝数存在正相关，即A值越大，HBV DNA拷贝数亦越大，证实HBV-LP的检测能有效地反映HBV复制的状况，对临床诊断和治疗具有重要的参考价值。

［1］ 中华医学会肝病学分会.慢性乙型肝炎防治指南［M］.北京：人民卫生出版社，2005：7-8.

［2］ 秦峰，黄旭东.乙肝患者血清中乙肝病毒大蛋白含量及其与病毒复制的关系［J］.常州实用医学，2011，27（6）：353.

［3］ 罗志勤，周欣，乐爱平，等.乙肝病毒大蛋白与 HBeAg、HBV-DNA相关性的临床意义［J］.江西医学检验，2006，24（6）：512.

［4］ 王连跃，张岱，葛颜文，等.血清乙型肝炎病毒大蛋白检测及其临床意义［J］.中华实验和临床病毒学杂志，2010，24（5）：349-351.