大理苍山花甸坝饮用水源细菌总数和大肠菌群的检测

张 发，周 娅，和东义，李小艳，杨晓燕

（大理学院农学与生物科学学院，云南大理 671003）

饮用水中细菌总数和大肠菌群数是水质检测必不可少的检测项目。细菌总数指的是1 mL水样，在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基中经37℃培养24 h后所生长的细菌菌落总数。细菌总数在一定程度上反映了水被细菌污染的程度〔1〕。大肠菌群是以E.coli为代表的，需氧及兼性厌氧、在37℃培养24 h能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽孢杆菌（肠杆菌科中的埃希氏菌、柠檬酸菌属、克雷伯菌属和肠杆菌属），是温血动物肠道中的正常菌群，常随动物粪便污染水源〔2-3〕，并与水中存在的肠道病原菌呈正相关性，因此，大肠菌群是饮用水质检测的重要指标之一〔4-5〕。我国生活饮用水卫生标准（GB5749-2006）规定生活饮用水中细菌总数≤100个/mL，大肠菌群不得检出〔6〕。

大理花甸坝由大、小花甸组成，位于苍山十九峰中最北的云弄、沧浪两峰之间。整个花甸地势平坦，土质肥沃，景色迷人，生物多样性丰富，已经成为众多旅游者的目的地，同时也是大理学院最重要的学生野外实习基地。近几年来随着到这里旅游和实习人数的增加，饮用水源的安全性也越来越受到人们的关注，但到目前为止还未见有对这里的饮用水源进行水质检测的报道。本研究拟采用平板菌落计数法和多试管发酵法对花甸坝3个饮用水源点的细菌总数和大肠菌群进行检测，检测结果可为该地饮用水源的选择与保护提供数据支持。

1 材料

1.1 样品 2013年6月7日分别于位于花甸坝农场总部东北方向4 km的龙潭水源（水样1）、农场总部西面3 km的西坡水源（水样2）和农场总部水源（水样3）3个水源点以无菌操作方式采集水样各500 mL，并标明水样采集时间、地点，记录水样周边环境。水样采集后置4℃冰箱中保存备用。

1.2 培养基和试剂 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、乳糖蛋白胨发酵管（内有倒置小套管）培养基、3倍浓缩乳糖蛋白胨发酵瓶（内有倒置小套管）培养基、伊红美蓝琼脂培养基及革兰氏染色液均按标准方法配制及灭菌〔7〕。

2 方法

采用平板菌落计数法和多管发酵法按规范进行检测〔8-10〕。

3 结果

3.1 细菌总数的测定 1号水样经平板菌落计数，无细菌菌落生成；2号水样菌落数＞300；3号水样菌落数=189，见表1。

表1 细菌总数检测结果

3.2 总大肠菌群的测定 水样1经初发酵实验后所有发酵管及发酵瓶都未产酸产气；水样2经复发酵实验后有2个发酵瓶及10只发酵管都产酸产气；水样3经复发酵实验后有2个发酵瓶及9只发酵管产酸产气，1只试管未产酸产气，详细结果见表2和表3。根据初发酵试验的阳性管（瓶）数查总大肠菌群检数表〔7〕，得到水样1总大肠菌群数＜3；水样2总大肠菌群数＞230；水样3总大肠菌群数=230。

表2 总大肠菌群数检测初发酵结果

表3 总大肠菌群数检测初发酵结果

4 讨论

根据检测结果可知，除龙潭水源未检测到细菌和大肠菌群（大肠菌群数＜3）外，花甸坝西坡水源细菌总数＞300，大肠菌群数＞230，农场总部水源细菌总数=189，大肠菌群数=230，均不符合我国饮用水卫生标准（GB5749-2006）〔6〕。根据不同水源周边环境分析，出现这种情况的原因可能是：龙潭水源地处花甸坝北面，群山环抱、地势险峻，这里无耕地和牧场，人类活动极少，水源暂未受到污染。而西坡水源和农场总部水源位于花甸坝坝区，地势平坦，附近有大片的耕地和牧场，同时附近也是众多旅游者和居民的住宅区，水源已经受到人类及动物粪便污染，不再适宜作为饮用水源。虽然本次实验只对花甸坝3个水源点进行了检测，但其中两个水源点细菌学指标都不合格，因此建议相关职能部门尽快采取相应措施对花甸坝各水源点进行综合治理，建立适当的水源保护区，以保证花甸坝饮用水安全。

〔1〕印士勇.水的细菌学检验综述〔J〕.水系污染与保护,1997（1）:64-72.

〔2〕赵菊香.水质细菌学快速检测方法简介〔J〕.水资源保护,1999（3）:24-35.

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〔4〕张济龙,何吉明,何敏.水中粪大肠菌群检测方法及其研究进展〔J〕.青海环境,2012（2）:89-92.

〔5〕沈萍,陈向东.微生物学实验〔M〕.4版.北京:高等教育出版社,2007:204-210.

〔6〕中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所.GB5749-2006，生活饮用水标准〔S〕.2006:3.

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