反相高效液相色谱法测定尼美舒利胶囊的含量

刘淑华

(辽宁省朝阳市药品检验所，辽宁 朝阳 122000)

尼美舒利为非甾体抗炎药，具有抗炎、镇痛、解热作用，主要用于慢性关节炎、手术和急性创伤后的疼痛及原发性痛经的症状治疗。尼美舒利胶囊现行标准采用紫外分光光度法测定含量[1－2]，专属性不强。笔者建立了反相高效液相色谱法测定含量[3]，方法可行、灵敏、准确、专属性强、重现性好，可用于尼美舒利胶囊的含量测定，现报道如下。

1 仪器与试药

Waters e2695－2489型高效液相色谱仪，Empower2色谱工作站。尼美舒利对照品(批号为100555－200501，中国药品生物制品检定所);尼美舒利胶囊(广州白云山制药总厂，批号分别为1110001，1110002，1110003);乙腈为色谱纯，磷酸为分析纯，水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:Kromasil C18柱(150 mm × 4.6 mm，5 μm);流动相:0.1%磷酸(用氨水调解 pH至7.0)－乙腈(56∶44);流速:1.0 mL/min;柱温:室温;检测波长:403 nm;进样量:10 μL。在此色谱条件下，理论板数以尼美舒利峰计算不低于5 000，拖尾因子1.03，尼美舒利与相邻杂质峰之间的分离度均大于1.5。

2.2 溶液制备

精密称取105℃干燥至恒重的尼美舒利对照品59.25 mg，置50 mL容量瓶中，超声处理10 min使溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得对照品贮备液。精密量取对照品贮备液5 mL，置50 mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取5 mL，置25 mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。取装量差异项下的内容物，混合均匀，称取适量(约相当于尼美舒利12 mg)，精密称定，置50 mL容量瓶中，加流动相适量，超声处理10 min使溶解，放冷，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液5 mL，置50 mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。

2.3 方法学考察

专属性试验:称取尼美舒利胶囊内容物4份(约相当于尼美舒利12 mg)，分别经以下条件破坏，加入1.0 mol/L的盐酸溶液5 mL破坏后，再加入1.0 mol/L的氢氧化钠溶液5 mL中和至中性;加入1.0 mol/L的氢氧化钠溶液5 mL破坏后，再加入1.0 mol/L的盐酸溶液5 mL中和至中性;干燥箱180℃加热2 h;经4 000 lx光照24 h。取上述经酸、碱、强热及光照破坏的产物，照2.2项下方法制备供试品溶液，记录色谱图。结果表明，尼美舒利与各降解产物分离良好，分离度均大于1.5，说明该法专属性良好(见图1)。

图1 专属性试验色谱图

线性关系考察:精密量取对照品贮备液10 mL，置50 mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，分别精密量取1.0，2.0，5.0，10.0，15.0 mL，分别置 50 mL 容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，进样 10 μL，测定峰面积。以进样量(μg，X)为横坐标、峰面积(Y)为纵坐标绘制标准曲线，得 Y=1 992 384.46 X+1 581.45，r=0.999 9(n=5)。结果表明，尼美舒利进样量在0.047 4 ～0.711 0 μg范围内与峰面积线性关系良好。

精密度试验:取对照品溶液，连续重复进样5次，计算峰面积。结果的 RSD为0.42%，证明仪器精密度良好。

稳定性试验:取供试品溶液，在室温条件下放置，分别于0，2，4，8，12 h 时依法测定峰面积，结果的 RSD 为 0.62%(n=5)，表明供试品溶液在12 h内稳定。

重现性试验:取同一批号的供试品，按2.2项下方法制备供试品溶液5份，依法测定含量。结果平均含量为99.0%(RSD=0.31%)，表明该方法重现性良好。

加样回收试验:精密称取样品(批号为1110001，99.5%)6份，分为3组，每组分别精密加入对照品贮备液4，5，6 mL，配成低、中、高3个质量浓度，按2.2项下方法制备供试品溶液，依法测定回收率。结果见表1。

表1 尼美舒利加样回收试验结果(n=6)

2.4 样品含量测定

取尼美舒利对照品溶液及供试品溶液各10 μL，进样测定，记录色谱图，按外标法计算，批号为1110001，1110002，1110003的3批样品中含尼美舒利分别为标示量的99.0%，99.1%，99.4%，用现行方法测定结果分别为标示量的99.5%，99.4%，99.8%。

3 讨论

以流动相为溶剂，用岛津UV－2550型紫外分光光度计测定，尼美舒利在403 nm波长处有最大吸收，且吸收强度较大，故在此波长处测定含量。曾选择甲醇代替流动相中的乙腈，但峰形较差，用本法的流动相峰形对称(拖尾因子为1.03)，理论板数较高，符合系统适应性的要求。本法具有较宽的线性范围和较高的回收率，结果简便、可靠、准确。考察结果表明，用反相高效液相色谱法测定尼美舒利胶囊的含量可行。经破坏试验验证，尼美舒利主峰与各降解产物分离良好，能够排除降解产物的干扰，专属性强，可有效地控制尼美舒利胶囊的质量。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[M].北京:中国医药科技出版社，2010:225－226.

[2]WS1－(X－233)－2003Z－2011，国家食品药品监督管理局标准 [S].

[3]张先洲，罗顺德，刘 莉.尼美舒利片的HPLC测定[J].中国工业医药杂志，1998，29(4):182－183.