结核感染T细胞斑点试验诊断老年人肺结核的价值

李晓辕 温忠梅 荆 蕾 彭丽萍 刘超英 (吉林大学第一医院呼吸科，吉林 长春 130021)

WHO估计目前全世界有大约至少20亿人感染结核〔1〕。同时根据调查，肺结核的发病率、患病率高峰正倾向于老年人群，由于该人群感染肺结核后起病隐匿，临床表现不典型，诊断率低〔2〕，造成中老年人肺结核的误诊率、病死率高〔3〕。目前临床上对肺结核的诊断除了痰结核菌涂片、支气管镜下取病理或行肺泡灌洗液行结核菌涂片外，辅助检查多用血沉(ESR)、血结核抗体(TB-CK)、结核菌素皮肤试验(TST)、结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)。但诊断方法在临床上应用局限，而TSPOT.TB是目前诊断该疾病方法中比较有优势的无创检测方法。本文通过比较ESR、TB-CK、痰结核菌涂片、T-SPOT.TB检查，进一步明确T-SPOT.TB对诊断老年人肺结核的价值。

1 材料及方法

1.1 材料

1.1.1 对象 2012年3～9月因发热、咳嗽、咳痰、痰中带血就诊于我院门诊确诊为肺结核的62例老年患者进行研究。诊断标准:痰结核菌涂片、支气管镜肺泡灌洗液涂片至少1次(+)或支气管镜取病理报告:可见干酪样坏死。其中男32例，女30例，年龄60～68〔平均(63.98±2.56)〕岁。选择15名非结核呼吸系统疾病的老年志愿者为非肺结核感染对照组，包括急性上呼吸道感染、肺炎、支气管哮喘、慢性阻塞性肺病急性加重期病人，同时测定其上述指标，其中男8例，女7例，年龄60～70〔平均(65.67±3.09)〕岁。非肺结核对照组确诊后给予对症治疗病情好转的病人。

1.1.2 纳入标准 ①年龄60～68岁，性别不限。②近期有发热、咳嗽、咳痰、痰中带血等症状之一。③辅助检查:X线胸片可见单侧或双侧肺上野少许斑片影。痰结核菌涂片、支气管镜肺泡灌洗液涂片至少1次(+)或支气管镜取病理报告可见干酪样坏死。④依从性好。

1.2 检测方法 患者均在知情、自愿情况下分别行ESR、TBCK、TST及T-SPOT.TB测定。

1.2.1 ESR、TB-CK TB-CK采用金标法，试剂盒由福建海天蓝波生物技术有限公司提供。操作方法完全严格按照说明书进行。ESR≥20 mm/h为阳性。

1.2.2 TST 操作方法:于受试者前臂曲侧中上1/3处皮内注射0.1 ml PPD，72 h后测量硬结直径，≥5 mm为(+)。

1.2.3 T-SPOT.TB 试剂盒由上海复兴有限公司生产提供。操作方法完全严格按照说明书进行。

1.3 统计学方法 应用SPSS16.0统计软件进行分析，数据资料以±s表示，使用t检验和χ2检验。

2 结果

肺结核组及非肺结核对照组ESP分别为(44.71±24.36)mm/h、(30.33±6.67)mm/h;TST平均硬结直径为(8.40±6.74)mm、(2.65±0.37)mm，差异均有统计学意义(均P＜0.05)。肺结核组及非肺结核对照组的各项检查方法的敏感性、特异性，见表1。

表1 肺结核组及非肺结核对照组的各项检查方法的敏感性、特异性比较

3 讨论

早在1990年WHO就把肺结核认定为全球主要健康问题，而其中老年人是肺结核感染的重要人群〔4，5〕。由于老年人免疫功能低下而造成一些疾病，尤其是免疫屏障功能降低(T淋巴细胞增殖及活性降低)，造成老年人感染肺结核后临床表现与其他年龄组比较不典型〔6〕，所以造成该疾病的漏诊率、病死率高。目前认为对结核的早起诊断是治疗降低死亡率至关重要的因素。就目前诊断肺结核的方法主要分为以下几种:(1)明确诊断检查方法:支气管镜取病理或肺泡灌洗液、痰的结核菌涂片检查。(2)辅助检查方法:主要包括 ESR、TB-CK、TSPOT.TB等。由于支气管镜取病理或行肺泡灌洗检查为有创检查，对于老年人风险性高，所以造成该诊断方法在临床上应用受到限制。痰结核菌涂片检查由于阳性率低，ESR由于受炎症、应激、血液成分改变而不能准确反应是否感染结核，所以特异性较差。TB-CK由于受患者既往感染过结核或对结核菌有免疫力而造成假阳性，或由于患者体质因素影响而产生假阴性，所以造成该结果差。结核菌素试(PPD)实验由于受实验技术及环境及既往卡介茵(BCG)疫苗接种、非结核分枝杆菌的影响而产生假阳性或假阴性结果〔7〕。T-SPOT.TB是基于Codecasa等〔8〕发现的结核“RD1”基因序列编码产生两种蛋白:早期分泌性抗原靶6(ESAT-6)和青色荧光蛋白10(CFP-10)。进而刺激外周血单个核细胞上的不同表位进行刺激，产生γ干扰素而进行检测〔9〕，所以使其敏感性及特异性较其他检查高。结合相关研究结果〔10，11〕，与本实验结果相同，进一步明确了结核感染T细胞检查在无创手段中辅助诊断结核的价值，与相关研究结果一致，为临床上的进一步应用提供了更好的理论依据。

1 Lonnroth K，Raviglione M.Global epidemiology of tuberculosis:prospects for control〔J〕.Semin Respir Crit Care Med，2008;29(5):481-91.

2 乐 军，梁 莉，李苏辉，等.酶联免疫斑点试验快速诊断结核分枝杆菌感染的临床应用价值〔J〕.中华检验医学杂志，2006;29(11):1005-8.

3 杜 娟，桂 坤，龙启忠.77例老年肺结核临床特点分析〔C〕.中华医学会2008年全国结核病学术会议.中国湖南长沙，2008:3.

4 Zhang H，Huang F，Chen W，et al.Estimates of tuberculosis mortality rates in China using the disease surveillance point system，2004-2010〔J〕.Biomed Environ Sci，2012;25(4):483-8.

5 Korzeniewska-Kosela M.Tuberculosis in Poland in 2010〔J〕.Przegl Epidemiol，2012;66(2):329-34.

6 马 玙，黄学锐.老年人肺结核的临床特点及诊治对策〔J〕.中华老年医学杂志，2005;24(6):406-9.

7 Soysal A，Bakir M.T-SPOT.TB assay usage in adults and children〔J〕.Expert Rev Mol Diagn，2011;11(6):643-60.

8 Codecasa L，Mantegani P，Galli L，et al.An in-house RD1-based enzymelinked immunospot-gamma interferon assay instead of the tuberculin skin test for diagnosis of latent Mycobacterium tuberculosis infection〔J〕.J Clin Microbiol，2006;44(6):1944-50.

9 Skinner MA，Ramsay AJ，Buchan GS，et al.A DNA prime-live vaccine boost strategy in mice can augment IFN-gamma responses to mycobacterial antigens but does not increase the protective efficacy of two attenuated strains of Mycobacterium bovis against bovine tuberculosis〔J〕.Immunology，2003;108(4):548-55.

10 张 瑛，孙亚蒙，徐欣晖，等.结核感染T细胞斑点试验在结核性疾病中的诊断价值〔J〕.中华临床医师杂志(电子版)，2010;4(12):2431-4.

11 陶 臻，曾 娟.结核感染T细胞斑点试验在结核病诊断中的应用价值〔J〕.临床肺科杂志，2012;17(9):1632-3.