基于STA-Compact检测系统的儿童和青少年APTT和PT参考区间调查

郑建新，郑昭璟，杨 慧，李怀远，傅启华

(上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心检验科，上海 200127)

凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血活酶时间(APTT)是临床出凝血实验室执行最多的测试，广泛用于筛选各种出血性疾病检测、抗凝和溶栓治疗监测、术前患者止凝血功能评估等。目前，国内大多数儿科出凝血实验室还沿用成人的参考区间，而儿童的凝血试验参考区间与成人存在明显差异[1-3]。因此，建立属于儿童的凝血试验参考区间是非常必须的。各个实验室也应建立基于自身检测系统的、并与年龄相关的参考区间[1]。我们通过回顾性分析健康儿童的常规凝血结果，评估本地区儿童的凝血系统发育情况。

材料和方法

一、研究对象

通过实验室信息系统收集2008年1月至2010年12月期间在上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心行择期非感染手术的术前常规凝血功能检查结果。通过对医院信息系统和住院病史的查阅，参考 Li等[4]的标准，最终共有4166例患者符合本研究的纳入标准进入本研究，其中男3118例，女1048例，年龄1 d～18岁。将所有儿童按年龄分为≤30 d(481例)、31 d～1岁(986例)、2～6岁(1029例)、7～14岁(1164例)、15～18例(506例)5组。

二、仪器和试剂

法国Stago公司提供的STA-Compact自动出凝血检测仪，试剂为Stago公司出品的配套试剂，每日新鲜配置。所测定项目均经校准，质控良好。其中，PT检测试剂为PT-Fibrinogen HS，其国际敏感指数为1.23～1.41;APTT检测试剂为 APTT Lyophilized silica，采用5 mL模式。在血标本采集后4 h内完成APTT和PT的检测。

三、方法

用含有0.2 mL 109 mmol/L枸橼酸钠的真空试管定量抽取被测试者1.8 mL静脉血，立即混匀送检。标本接受后立即2500×g离心15 min，制备乏血小板血浆。取血浆在室温4 h内在STACompact自动出凝血检测仪上测定PT和APTT。

四、统计学方法

采用SPSS 17.0软件进行统计学分析。以单样本K-S检验分析PT和APTT数据是否呈正态分布。结果数据呈偏态分布，因此以中位数(P2.5～P97.5)表示。多组间比较采用非参数Kruskal-Wallis检验，两两比较采用Mann-Whitney U检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

结 果

一、各年龄组APTT和PT检测结果比较

除≤30 d组与31 d～1岁组、2～6岁组与7～14岁组APTT结果差异无统计学意义(P值分别为0.653、0.07)外，其余各组间 APTT 差异均有统计学意义(P=0.000)。见表1。

除了2～6岁组与7～14岁组PT结果差异无统计学意义(P=0.197)外，其余各组间PT差异均有统计学意义(P=0.000)。见表1。

从各年龄组的结果分布来看，≤30 d组和31 d～1岁组APTT检测结果相当，2～6岁组和7～14岁组的APTT有明显升高趋势，至15～18岁时又有明显回落。≤30 d组PT较长，31 d～1岁组PT最短，1岁之后PT又有增高趋势。见表2、3。

二、各年龄组不同性别之间APTT和PT检测结果比较

各年龄组中男童与女童间APTT和PT检测结果差异均无统计学意义(P均＞0.05)。

表1 各年龄组APTT和PT检测结果比较 (s)

表2 各年龄组中男童、女童APTT检测结果的比较 (s)

表2 各年龄组中男童、女童PT检测结果的比较 (s)

讨 论

本研究统计分析了本院近3年来进行择期小手术儿童的APTT和PT结果，所选择研究对象的凝血功能都为正常状态，符合美国临床和实验室标准化研究院(CLSI)C28-A3文件《医学实验室参考区间的定义、建立和确认》中对参考区间分组的研究例数的要求，且各组例数均远多于120例。因此，这份统计结果也可看作是对本地区健康儿童凝血系统发育和成熟的一个评估。

本研究中，新生儿(＜30 d)PT值明显高于其他各组，这与 Monagle 等[1]、Lippi等[5]及 Li等[4]的结果一致。儿童PT在2岁后有延长或增高趋势，这与 Monagle 等[1]、Li等[4]和 Flanders 等[6]的结果部分一致。

Andrew等[7]在20世纪80年代后期提出了“止血发育”的概念，现已被广泛接受。止血发育中，和临床最相关的常规凝血参数应是 APTT。APTT广泛用于筛选内源和共同凝血途径遗传性和获得性缺陷，监测肝素抗凝治疗，检测凝血抑制物[8]。本研究中，新生儿和1岁以内婴儿的APTT值相当，高于15～18岁儿童，但低于2～14岁儿童的测定值，这与文献报道[4-5，7]的结果不完全一致。由于＜6个月婴儿的止血系统还没有完全发育成熟，其参考区间和成人比较可存在明显差异[2-3]。本研究也显示新生儿和1岁以内婴儿APTT值较15～18岁儿童显著延长。本研究结果显示2～6岁组和7～14岁组儿童的APTT值最高，这一现象可能与幼年阶段更易反复遭受感染、循环中一过性狼疮抗凝物流行率较高有关[9-10]。

综上所述，健康儿童的凝血参考区间与其年龄变化紧密相关，其测定值与各实验室所用仪器和试剂系统不同而变化。因此，儿童专科医院应建立基于本实验室检测系统的、并与年龄相关的凝血实验参考区间，只有这样才能更好地正确诊断和处理新生儿及儿童的出凝血相关问题。

[1]Monagle P，Barnes C，Ignjatovic V，et al.Developmental haemostasis.Impact for clinical haemostasis laboratories[J].Thromb Haemost，2006，95(2):362-372.

[2]Andrew M，Vegh P，Johnston M，et al.Maturation of the hemostatic system during childhood[J].Blood，1992，80(8):1998-2005.

[3]Lippi G，Franchini M，Montagnana M，et al.Coagulation testing in pediatric patients:the young are not just miniature adults[J].Semin Thromb Hemost，2007，33(8):816-820.

[4]Li J，Lai X，Yan C，et al.Ageassociated developmental changes in the activated partial thromboplastin time(APTT)and causes of prolonged APTT values in healthy Chinese children[J].Clin Chem Lab Med，2009，47(12):1531-1537.

[5]Lippi G，Salvagno GL，Rugolotto S，et al.Routine coagulation tests in newborn and young infants[J].J Thromb Thrombolysis，2007，24(2):153-155.

[6]Flanders MM，Crist RA，Roberts WL，et al.Pediatric reference intervals for seven common coagulation assays[J].Clin Chem，2005，51(9):1738-1742.

[7]Andrew M，Paes B，Milner R，et al.Development of the human coagulation system in the full-term infant[J].Blood，1987，70(1):165-172.

[8]Lippi G，Favaloro EJ.Activated partial thromboplastin time:new tricks for an old dogma[J].Semin Thromb Hemost，2008，34(7):604-611.

[9]Li J，Lai X，Yan C，et al.Age-associated developmental changes in the activated partial thromboplastin time(APTT)and causes of prolonged APTT values in healthy Chinese children[J].Clin Chem Lab Med，2009，47(12):1531-1537.

[10]Male C，Lechner K，Eichinger S，et al.Clinical significance of lupus anticoagulants in children[J].J Pediatr，1999，134(2):199-205.