HPLC法测定维吾尔药消食阿米勒努西颗粒中没食子酸的含量

热孜玩姑丽·阿不都热依木 木合塔尔·木明

(新疆喀什地区药品检验所，新疆 喀什 844000)

消食阿米勒努西颗粒是传统的维吾尔药制剂，原标准收载于《中华人民共和国卫生部标准》(维吾尔药分册)，标准编号为:WS3－BW－0177－98。由余甘子、薰鲁香、肉豆蔻衣、肉桂、玫瑰花、甘松、巴旦任等14味药组成，用于食欲不振、胃痛、消化不良、神经衰弱等治病。由于基础研究薄弱，原标准仅有挥发油和没食子酸的薄层鉴别，缺乏方中主要指标成分的含量测定［1］。

文献报道，没食子酸是余甘子的活性成分，可作为余甘子及其复方制剂质量控制的指标成分［2］。本试验采用HPLC方法测定没食子酸的含量，为完善消食阿米勒努西颗粒的质量标准提供参考依据。

1 仪器、药品及试剂

1．1 仪器:日本岛津LC20AT全自动高效液相色谱仪，SPD－M20型检测器。

1．2 药品:消食阿米勒努西颗粒(购于新疆维吾尔自治区维吾尔医医院)，没食子酸对照品(含量测定用，批号为110831－201204，购自中国药品生物制品检定院)。

1．3 试剂:甲醇为色谱纯，其余试剂、试药为分析纯，水为超纯水。

2 方法与结果

2．1 色谱条件:色谱柱:菲罗门Phenomenex Luna C18(250×4．60mm，5μm)，流动相:甲醇:0．2%磷酸溶液(5:95);检测波长:273nm;流速:1．0mL·min－1;柱温:35℃。

按上述色谱条件下，没食子酸与其他组分色谱峰完全分离，理论塔板数大于2000，对照品与供试品色谱图见图1。

图1 维吾尔药消食阿米勒努西颗粒HPLC图谱

2．2 对照品溶液的制备:取没食子酸对照品11．05mg，置100m L量瓶中，用50%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，在精取1mL置10mL量瓶中用50%甲醇稀释制成每1mL中含25μg的溶液，即得。

2．3 测定波长的选择:取没食子酸对照品，加甲醇制成每1mL含0．1mg的溶液，采用紫外－可见光分光光度计在200－400nm波长范围检测吸收光谱，结果表明，没食子酸在273nm处有最大吸收峰，因此选择273nm作为本品没食子酸含量测定的检测波长。

2．4 供试品溶液的制备:取供试品粉末(过三号筛)精密称定2g，置锥形瓶中，精密加入50% 甲醇50mL，称定重量，超声处理30min，冷却，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取1mL置100mL量瓶中，用50% 甲醇稀释至刻度，用0．45μm微孔滤膜滤过，即得。

2．5 线性关系的考察:精密量取没食子酸对照品11．05mg，置100m L量瓶中，用50%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得每1mL含0．11mg的溶液作为储备液，分别精密量取储备液．0，2．0，3．0，4．0，5．0mL 置mL 量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀注入液相色谱仪，测定。以进样浓度为横坐标，峰面积为纵坐标进行回归制的得标准曲线，回归方程为y=238803x－32570，r=0．9997。表明没食子酸在．05 ～55．25μg·mL－1范围内呈良好的线性关系。结果见图2。

图2 线性关系测定结果

2．6 精密度试验:精密量取同一对照品溶液(22．0μg·mL－1)，重复进样 次，每次进样μL，结果 RSD 为．15%，表明该方法的精密度良好。

2．7 稳定性:取同一批号分别在同一天的不同时间(2，4，8，12，24h)用含量测定方法重复测定5次，计算余甘子峰面积RSD为0．14%，结果见表1。

表1 稳定性试验测定结果

2．8 重现性试验:取同批次样品，按供试品溶液的制备方法制备 份样品。测的结果分别为．4851，2．4790，2．4698，2．4841，2．4699mg·g－1，平均．4776mg·g－1，RSD为．7%。

2．9 加样回收率试验:采用标准添加法测定回收率。精密称取供试品(批号20110202)2g，按供试品溶液的制备方法制备，精密量取5．0mL，共7份，分别置10mL量瓶中，第1，2份作为空白回收，其余5份分别加入浓度为．0μ·mL－1的没食子酸对照品溶液各1．0mL，摇匀，各取10μL进样测定。结果没食子酸平均回收率为102．40%，RSD为0．6%;结果见表2。

表2 加样回收试验验测定结果

2．10 样品含量测定:精密称取样品5份，按样品处理方法处理，根据上述HPLC条件测定，结果表明，每克样品所含没食子酸量平均为2．4860mg，RSD为0．3%。

3 讨论

余甘子是大戟科植物干燥成熟果实，维吾尔医认为:余甘子具有清热凉血、消食健胃、生津止咳、护肝解毒之功。用于血热血瘀、消化不良、胃肠炎、腹泻、腹胀、咳嗽、喉肝病、口干等作用。余甘子中没食子酸具有多种生理活性，其含量受生长环境以及不同生长阶段影响。我们用HPLC法测定消食阿米勒努西颗粒中没食子酸的含量，取得了较为满意的结果，该方法灵敏度、重现性较好，样品处理简单，为消食阿米勒努西颗粒的质量评价提供了快捷、有效的检测方法。

［1］国家药典委员会．中华人民共和国卫生部药品标准(维吾尔药分册)［S］．乌鲁木齐:新疆科技卫生出版社，1999:111．

［2］国家药典委员会．中华人民共和国药典［S］．一部．北京:中国医药科技出版社，2010:167