角果木地上部分的化学成分研究

霍丽丽，王 慧，吴 军

（三峡大学 天然产物研究与利用湖北省重点实验室，湖北 宜昌 443002）

角 果 木（Ceriopstagal）为 红 树 科（Rhizophoraceae）角果木属（Ceriops）的常绿植物.本属有5 个种，即角果木Ceriopstagal（Perr.）C.B.Robinson、十雄角果木C.decandra（Griff.）Ding Hou、澳洲角果木C.australis（White）Ballment，Smith ＆Stoddart、CeriopszippelianaBlume和CeriopspseudodecandraSheue，Liu，Tsai ＆Yang［1－4］.该属植物在我国仅有一个物种，即角果木.红树植物多数用于消炎解毒，部分具有收敛、止血等作用，可治疗烧伤、腹泻及炎症等，而角果木中分离鉴定的Dolabrane型二萜类成分具有显著的抗肿瘤活性［5］.本文对采自中国海南角果木的地上部分醇提物乙酸乙酯萃取部位的化学成分进行了研究，共分离鉴定了7 个化合物，包括3 个Dolabrane型二萜（1～3），3个羽扇豆烷型三萜（4～6）和1个黄酮类化合物（7）.化合物1～7的结构如图1所示.

图1 化合物1～7的结构式Fig.1 Structures of compounds 1～7

1 仪器与材料

Bruker AV－400核磁共振仪；AB API2000液质联用仪；Waters 600高效液相色谱仪，2996检测器，色 谱 柱 为YMC－Pack ODS－5－A 250 mm×10mm i.d.，5μm （半制备柱），YMC－Pack ODS－5－A 250mm×4.5mm i.d.，5μm（分析柱）；旋转蒸发仪（上海爱朗仪器有限公司）.薄层硅胶和柱层析硅胶（青岛海洋化工厂）；柱层析用ODS硅胶（北京金欧亚科技发展有限公司）；Sephadex LH－20（Amersham Pharmacia Biotech AB 公司）.高效液相色谱所用试剂为色谱纯，其余均为分析纯.

角果木植物地上部分于2002年采集于海南省三亚市，并经暨南大学药学院吴军教授鉴定.植物标本（CT－001）存放于暨南大学药学院海洋药物研究中心.

2 提取分离

干燥的角果木地上部分14.2kg粉碎后，于室温下用95%乙醇提取5次.合并提取液，浓缩得到浸膏（1.06kg）.浸膏经水悬浮，用乙酸乙酯萃取得到乙酸乙酯萃取部位（252.0g）.取乙酸乙酯萃取部位（100.0g），经正相硅胶柱色谱分离，氯仿／甲醇系统梯度洗脱（100∶0，50∶1，30∶1，20∶1，10∶1，5∶1，3∶1，1∶1）得到254个流分.TLC检测，合并相似流份38～66（A）、67～122（B）.流份A（0.6g）经Sephadex LH－20凝胶柱层析，氯仿／甲醇（1∶1）恒度洗脱得到21 个流份，根据TLC检测结果，合并流份A3～A18，并经RP－C18硅胶柱层析，丙酮／水系统（50∶50，60∶40，75∶25，90∶10，100∶0）梯度洗脱，得到25个流份，结合薄层色谱和HPLC 分析结果，合并流份6～7（Fr.1.1）和8～12（Fr.1.2），其中Fr.1.1采用高效液相制备色谱（68% MeCN／H2O，YMC－Pack ODS－5－A 250mm ×10mm i.d.，5μm）制备，得到化合物1（12.2mg），Fr.1.2经高效液相制备色谱 （77% MeCN／H2O，YMC－Pack ODS－5－A 250mm×10mm i.d.，5μm）制备，得到流份Fr.2、Fr.3、Fr.4.Fr.2经多次重结晶（丙酮），得到化合物6（35.0mg），剩余流份再经高效液相分析色谱 （76% MeOH／H2O，YMC－Pack ODS－5－A 250mm×4.5mm i.d.，5μm）制备，得到化合物2（1.0 mg）；Fr.3经高效液相分析色谱（62%MeCN／H2O，YMC－PackODS－5－A250mm×4.5mmi.d.，5μm）纯化，得到 化 合物4（1.5mg）；Fr.4经高效液相分析色谱（64%MeCN／H2O，YMC－PackODS－5－A250mm×4.5mmi.d.，5μm）纯化，得到化合物5（19.0mg）.B部分经SephadexLH－20凝胶柱层析、氯仿／甲醇（1∶1）恒度洗脱得到27个流份，根据TLC检测结果，合并流份3～22，并经RP－C18硅胶柱层析，丙酮／水系统（50∶50，60∶40，75∶25，90∶10，100∶0）梯度洗脱，得到54个流份.根据薄层色谱和HPLC分析结果，合并流份3～7（Fr.2.2）.Fr.2.2经高效液相制备色谱（34%MeCN／H2O，YMC－PackODS－5－A250mm×10mmi.d.，5μm）制备，得到4个流份（Fr.3.2、Fr.3.3、Fr.3.4、Fr.3.5）.Fr.3.4经过高效液相制备色谱（27%MeCN／H2O，YMC－PackODS－5－A250mm×10mmi.d.，5μm）制备，得到化合物3（1.0mg）；Fr.3.2经高效液相制备色谱（29%MeCN／H2O，YMCPackODS－5－A250mm×10mmi.d.，5μm；26%MeCN／H2O，YMC－PackODS－5－A250mm×4.5mmi.d.，5μm）制备，得到化合物7（2.0mg）.

3 结构鉴定

化合物1：淡黄色固体，ESI－MS（m／z）：339.9［M＋Na］＋，655.3［2M＋Na］＋，631.4［2MH］－.1H NMR（400MHz，CDCl3）δ：0.74（3H，s，H3－20），1.07（3H，s，H3－17），1.21（3H，s，H3－19），2.22（1H，d，J＝6.8Hz，H－10），3.09（1H，d，J＝6.0Hz，H－18b），3.13（1H，d，J＝6.0Hz，H－18a），4.87（1H，d，J＝10.8Hz，H－16b），4.92（1H，d，J＝17.6 Hz，H－16a），5.79（1H，dd，J＝17.6，10.8Hz，H－15），6.31（1H，d，J＝6.8 Hz，H－1）.13C NMR （100 MHz，CDCl3）δ：192.3 （C－3），150.8 （C－15），147.6（C－2），119.3（C－1），109.2（C－16），61.5（C－4），55.9（C－18），55.1（C－10），40.4（C－8），39.6（C－14），39.5（C－9），37.3（C－5），36.5（C－13），35.0（C－11），32.4（C－6），31.9（C－12），29.6（C－19），27.5（C－7），23.0（C－17），13.3（C－20）.以上波谱数据与文献数据［6］对照基本一致，故鉴定化合物1为tagalsin B.

化合物2：无色油状，分子式为C20H28O3..1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ：0.60（3H，s，H3－20），1.01（3H，s，H3－17），1.24（3H，s，H3－19），1.87（3H，s，H3－18），4.84（1H，d，J＝10.8 Hz，H－16b），4.90（1H，d，J＝17.6 Hz，H－16a），5.78（1H，dd，J＝17.6，10.8 Hz，H－15）.13C NMR （100 MHz，CDCl3）δ：193.1（C－2），150.9（C－15），144.5（C－3），135.8（C－4），108.9（C－16），54.5（C－10），41.6（C－8），39.0（C－5），38.8（C－14），38.1（C－9），38.0（C－6），36.2（C－13），34.2（C－11），33.2（C－1），31.7（C－12），31.6 （C－19），26.7 （C－7），23.1 （C－17），13.7（C－20），11.6（C－18）.以上波谱数据与文献数 据［6］对照基本一致，故鉴定化合物2为tagalsinG.

化合物3：无色透明的针状晶体，ESI－MS（m／z）：571.3［2M＋Na］＋，273.1［M－H］－，547.5［2M－H］－.1H NMR （400 MHz，CDCl3）δ：0.71（3H，s，H3－20），1.10 （3H，s，H3－19），1.30（3H，s，H3－17），5.33 （1H，s，H－18b），6.15（1H，s，H－18a），6.28（1H，d，J＝10.4 Hz，H－2），6.96（1H，dd，J＝10.4，6.0Hz，H－1）.13C NMR （100 MHz，CDCl3）δ：189.0（C－3），153.3 （C－1），149.8 （C－4），130.6 （C－2），117.6（C－18），71.3（C－13），57.6（C－10），44.2（C－8），43.4（C－14），40.7（C－5），40.0（C－9），37.6（C－11），36.5（C－6），35.7（C－12），33.6（C－19），26.9（C－17），25.5（C－7），12.5（C－20）.以上波谱数据与文献数据［7］对照基本一致，故鉴定化合物3为tagalsin Q.

化合物4：无色针状晶体（甲醇），ESI－MS（m／z）：441.6［M－H］－，477.6［M＋Cl］－，883.8［2M－H］－.1H NMR （400 MHz，CDCl3）δ：0.83（3H，s，H3－24），0.84 （3H，s，H3－25），0.94（3H，s，H3－23），1.00 （3H，s，H3－27），1.02（3H，s，H3－26），1.68 （3H，s，H3－20），3.33（1H，d，J＝10.8 Hz，H－28b），3.39（1H，br s，H－3），3.79（1H，d，J＝10.8Hz，H－28a），4.58（1H，d，J＝2.0 Hz，H－29b），4.68（1H，d，J＝2.0 Hz，H－29a）.13C NMR （100 MHz，CDCl3）δ：150.7 （C－20），109.8 （C－29），71.4（C－3），60.7（C－28），50.3（C－5），49.1（C－9），48.9（C－18），47.9（C－19），46.7（C－14），42.9（C－4），41.2（C－10），37.7（C－8），37.4（C－13），34.2（C－1），34.1（C－22），33.4（C－2），29.9（C－7），29.3 （C－16），28.4 （C－23），27.1 （C－21），25.5（C－15），25.3（C－12），22.3（C－30），20.8（C－11），19.2（C－25），18.4（C－6），16.1（C－26），16.1（C－27），15.0（C－24）.以上波谱数据与文献数据［8］对 照 基 本 一 致，故 鉴 定 化 合 物4 为3β－lup－20（29）－ene－3，28－diol.

化合物5：白色粉末，ESI－MS（m／z）：463.3［M＋Na］＋，439.8［M－H］－，475.7［M＋Cl］－，879.8［2M－H］－.1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ：0.93（3H，s，H3－24），0.99（3H，s，H3－25），1.03（3H，s，H3－23），1.06 （3H，s，H3－26），1.07（3H，s，H3－27），1.68 （3H，s，H3－30），3.34（1H，d，J＝10.8 Hz，H－28b），3.79（1H，d，J＝10.8 Hz，H－28a），4.59（1H，d，J＝2.0 Hz，H－29b），4.68（1H，d，J＝2.0Hz，H－29a）.13C NMR （100 MHz，CDCl3）δ：218.2（C－3），150.5（C－20），110.0（C－29），60.7（C－28），55.1（C－17），49.9（C－5），48.8（C－9），47.9（C－18，19），47.5（C－14），42.9（C－4），41.0（C－8），39.7（C－1），37.6（C－13），37.0（C－10），34.3（C－22），34.1（C－2），33.7（C－7），29.9（C－21），29.3（C－16），27.2（C－15），26.8（C－23），25.4（C－12），21.5（C－11），21.2（C－30），19.8（C－6），19.2（C－25），16.1（C－26），15.9（C－27），14.8（C－24）.以上波谱数据与文献数据［8］对照基本一致，故鉴定化合物5为羽扇－20（29）－烯－28－醇－3－酮.

化合物6：无色针状晶体（甲醇），ESI－MS（m／z）：479.3［M＋Na］＋，455.6［M－H］－，911.8［2M－H］－.1H NMR （400 MHz，CDCl3）δ：0.82（3H，s，H3－24），0.84 （3H，s，H3－25），0.94（3H，s，H3－23），0.94 （3H，s，H3－26），0.99（3H，s，H3－27），1.69 （3H，s，H3－30），3.01（1H，m，H－19），3.39（1H，br s，H－3），4.61（1H，d，J＝2.0 Hz，H－29b），4.74（1H，d，J＝2.0 Hz，H－29a）.13C NMR （100 MHz，CDCl3）δ：180.4（C－28），150.6（C－20），109.9（C－29），56.5（C－17），50.5（C－5），49.4（C－9），49.2（C－18），47.1（C－19），42.7（C－14），41.1（C－4），38.5（C－13），37.7（C－8），37.5（C－10），37.2（C－1），34.4（C－22），33.4（C－2），32.3（C－7），30.7 （C－16），29.8 （C－21），28.4 （C－23），25.6（C－15），25.6（C－12），22.3（C－30），20.9（C－11），19.5（C－25），18.4（C－6），16.2（C－26），16.1（C－27），14.9（C－24）.以上波谱数据与文献数据［8］对照基本一致，故鉴定化合物6 为3α－hydroxy－lup－20（29）－ene－28－oic acid.

化合物7：无色针状晶体（甲醇），［α］25D＝－49（c0.2，MeOH）.ESI－MS（m／z）：543.2［2MH］－.1H NMR（400 MHz，Acetone－d6）δ：2.73（1H，dd，J＝17.1，3.0 Hz，H－3e），3.19（1H，dd，J＝17.1，12.9Hz，H－3a），5.46（1H，dd，J＝12.9，3.0 Hz，H－2），5.96（1H，d，J＝2.0 Hz，H－6），5.97 （1H，d，J＝2.0 Hz，H－8），6.90（2H，d，J＝8.5 Hz，H－3′，5′），7.40（2H，d，J＝8.5 Hz，H－2′，6′）.13C NMR（100 MHz，Acetone－d6）δ：197.5（C－4），167.3（C－7），165.5（C－5），165.2 （C－9），158.7 （C－4′），130.9 （C－1′），129.2（C－2′，6′），116.3（C－5′），116.2（C－3′），103.3 （C－10），96.9 （C－6），95.9 （C－8），80.1（C－2），43.7（C－3）.以上波谱数据与文献数据［9］对照基本一致，故鉴定化合物7为（S）－柚皮素.

4 结论

本实验对角果木地上部分醇提物的乙酸乙酯萃取部位进行了系统分离，共分离得到了7个单体化合物，并通过理化性质和现代波谱技术鉴定了其结构，包括3 个Dolabrane 型二萜：tagalsin B，tagalsin G 和tagalsin Q；3个羽扇豆烷型三萜：3βlup－20（29）－ene－3，28－diol，28－hydroxylup－20（29）－ene－3－one，3α－hydroxy－lup－20 （29）－ene－28－oic acid；1个黄酮类化合物：（S）－柚皮素，该化合物为首次从该属植物中分离得到.以上研究结果进一步阐明了角果木的化学成分，为其化学成分及相关生物活性的研究奠定了基础.

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