孕妇血清胱抑素C生物参考区间验证

郭明卫，陈丽敏

(1、沙河市人民医院检验科，河北 沙河 054100；2、邢台县中心医院检验科，河北 邢台054000)

生物参考区间是解释分析检验结果的依据和程度[1]，由于孕妇体内一系列的特殊生理性变化，正常人群的血清胱抑素C(CysC)生物参考区间能否沿用正常人生物参考区间有待验证。根据ISO15189：2003《医学实验室-质量和能力的专用要求》，实验室必须建立自己的生物参考区间并定期评审，以确保依据的生物参考区间的有效性。我们结合ISO15189条款要求和已有的推荐方法[2]，验证并探讨该人群生物参考区间，以保证生物参考区间的可靠选用。

1 材料与方法

1.1 标本来源 2012年6月1日至2012年12月31日来我院门诊检查的健康孕妇，年龄23~37岁，平均为26.3岁。将健康孕妇分为3组，孕1~12周为早期妊娠组，孕13~27周为中期妊娠组，孕38周以上为晚期妊娠组，排除高血压、糖尿病等其他疾病，且肝功能、肾功能无异常，尿蛋白阴性。

1.2 标本采集 对入选的参考个体按《检验标本采集手册》抽取孕妇静脉血3~4ml于促凝管中(湖南安信医用高分子材料有限公司生产)，及时送检分离血清，标本要求无溶血、无脂血，于标本采集2h内检测完毕。

1.3 仪器 长春迪瑞CS800全自动生化分析仪，试剂、校准品和质控品由北京华宇亿康生物工程技术有限公司提供。操作过程严格遵守SOP文件，操作人员固定，仪器运转状态良好，试剂在有效期内使用。

1.4 方法

1.4.1 验证条件的确定 本文选择孕妇妊娠早、中和晚期，参照NCCLS C28-42推荐方法对血清CysC进行验证。

1.4.2 对生物参考区间的验证 分别收集各期孕妇血清标本40份，在经过性能评价验证可靠的检测系统上检测，检测结果95%(38名)内落在现用的参考区间内，判定现用生物参考区间有效。若试验数据有3名或3名以上的检测结果落在参考现用的生物参考区间外，先检查检测系统性能、检测程序是否正确，之后考虑该项目是否具有人群生物特性，再进一步调查。重新收集120名健康参考个体，进行测定，检测结果先做离群点的判断，数据中的疑似离群点的判断：将疑似离群点和其相邻点的差值(D)和全距(R)相除，D/R应≦1/3,＞1/3考虑为离群点。若有2个或以上疑似离群点，将最小的疑似离群点如上处理，若＞1/3则所有点都删去，若≦1/3则保留所有数据，若有离群点被删除后应立即将其他数据补上[2]。

1.4.3 检测系统/方法准备 参考区间验证前需掌握检测系统的性能和使用的检测方法，对检测系统/方法分析性能进行有效验证和评价，确保实验室检测系统性能的关键指标如不精密度和不准确度的评价方法和可接受标准，确保检测系统/方法准确稳定。检测系统采用配套的质控，并且在检测系统在控的状态下检测试验标本，记录试验数据，保证验证项目结果的可靠。

2 结果

本文检测的孕妇妊娠早、中和晚期CysC生物参考区间验证结果见表1。

表1 妊娠妇女妊娠早、中和晚期CysC生物参考区间验证结果

3 讨论

CysC是一种含120个氨基酸残基多肽链的低分子非糖基化碱性蛋白。人体几乎所有的有核细胞均可持续合成，并分泌到细胞外液如血液、精液和脑脊液[3]。在正常情况下CysC产生比较恒定，且不受年龄、性别和肌肉的影响[4]。文献报道，CysC在检测肾小球滤过率(GFR)方面有更高的敏感性和特异性，有可能取代血清肌酐(SCr)和肌酐清除率(CCr)成为常规指标，临床上已广泛用于各类高血压、糖尿病等肾脏损害的早期诊断。近年来有研究表明，CysC是反映妊娠妇女肾脏功能的良好指标[5]，故验证妊娠妇女各期的正常参考区间十分必要。

本文显示，孕妇妊娠早、中期的生物参考区间不适用于现用生物参考区间，经验证其参考区间分别为(0.63±0.21)mg/L 和(0.66±0.24)mg/L,妊娠晚期的生物参考区间适用于现用参考区间，各期检验结果低于邹海瑞等[6]报告，可能与检测系统不一致有关，但与其比较，各期检验结果分布趋势基本一致。正常孕妇外周血容量显著增加，肾小球产生高灌注，肾小球维持在较高的水平，Davision等[7]报道妊娠妇女肾小球滤过率较非妊娠期增加50%，在孕早期即出现，持续到孕6个月。本文显示，部分孕妇妊娠早期血中CysC浓度低于现用生物参考区间，并一直持续到中期都维持在较低浓度，证实了肾小球滤过率在此间的变化。但到晚期CysC接近于现用参考区间，可能是妊娠晚期基础代谢率较妊娠早中期增高，CysC生成增多，提示在妊娠晚期，孕周已不再是影响肾小球滤过率的因素[8]。

本文验证表明，在对妊娠妇女检查CysC时应考虑其特殊的生理变化。临床医师应熟练了解和掌握妊娠妇女不同时期的生物参考区间，对鉴别诊断孕产妇是否患有肾脏疾病及病理妊娠非常必要。

[1]陈桂山,杨有业,温冬梅,等.临床生化检验项目生物参考区间适用性验证探讨[J].中华检验医学杂志,2008,31(2):170-174.

[2]陈桂山,杨有业，梁锦胜，等.临床医学生物实验室生物参考区间的建立[J].检验医学，2008,23(4):421-424.

[3]Janowski R,Kozak M,Jankowska E,et al.Human cystatin C an amyloigenic protein,dimerizes through three-dimensional domain wapping[J].Nat Struct Biol,2001,8(4):316.

[4]Filler G,Bokenkamp A,Hofmana W,et al.Cystatin C as a marker of GFR-history,indications and future research[J].Clin Biochem,2005,38(1):1-8.

[5]陈淑芹,徐玮，李恺，等.血清胱抑素C测定用于孕妇肾功能监测的探讨[J].中国卫生检验杂志，2009,19(10):2353-2354.

[6]邹海瑞,覃冠德.血清胱抑素C在妊娠期生理变化的验证性研究[J].实验与检验医学,2012,30(6):603-605.

[7]Davison JM.Kidney function in pregnant women[J].Am J Kidney Dis,1987,9(4):248-252.

[8]鄢斌.血清胱抑素C在早、中、晚各期妊娠中水平调查[J].中国优生与遗传杂志,2009,17(8):47.