双黄花颗粒抗炎解热药理作用的实验研究*

刘 林 莫韦皓 邓东方 孟 盼 杨 蕙 王宇红△

（1.湖南中医药大学第一附属医院，湖南 长沙 410007；2.湖南中医药大学，湖南 长沙 410208）

双黄花颗粒抗炎解热药理作用的实验研究*

刘 林1莫韦皓1邓东方1孟 盼2杨 蕙2王宇红2△

（1.湖南中医药大学第一附属医院，湖南 长沙 410007；2.湖南中医药大学，湖南 长沙 410208）

目的 观察双黄花颗粒的抗炎、解热的药理作用。方法 采用足肿胀、耳肿胀及毛细血管通透性实验来观察该制剂抗炎作用；采用酵母致大鼠发热实验来观察该制剂解热作用。结果 在足肿胀实验中，双黄花高、中剂量组在药后2、4 h均显著抑制角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀。此外双黄花高剂量组能显著抑制二甲苯致小鼠耳肿胀的肿胀度及小鼠腹腔毛细血管通透性的增加。在酵母致热实验中，双黄花高剂量组大鼠药后不同时间点体温值显著降低，双黄花中剂量组给药后2 h体温值显著降低。结论 双黄花颗粒具有较好的抗炎、解热作用，为其临床应用提供了理论基础。

双黄花颗粒 急性上呼吸道感染 抗炎 解热

△通信作者

双黄花颗粒是由黄芪、黄芩、金银花组成中药复方颗粒制剂，具有清宣肺卫、解毒益气、平衡阴阳之效。临床上用于治疗风热阻肺（卫）兼气虚证急性上呼吸道感染疗效显著，能明显改善急性上呼吸道感染患者的临床症状，降低体温、缩短发热患者的解热时间［1］。实验研究表明双黄花对急性上呼吸道感染患者有一定的抗病毒作用，且无不良反应［2］。为进一步探讨其作用机制，从理论上为其临床使用提供依据，本研究通过采用足肿胀、耳肿胀及毛细血管通透性实验来观察该制剂抗炎作用，采用酵母致大鼠发热实验来观察该制剂解热作用。

1 材料与方法

1.1 实验药物双黄花颗粒，由湖南中医药研究院提供，批号20110611；阿司匹林，阿斯利康制药有限公司生产，批号：1101083；莲花清瘟胶囊，石家庄以岭药业股份有限公司生产，批号：110222；布洛芬缓释胶囊，中美天津史克制药有限公司，批号：11080517；醋酸泼尼松片，浙江仙琚制药股份有限公司，批号：110340。

1.2 动物SPF级SD大鼠150只，雄性；SPF级ICR小鼠130只，雌雄各半。均购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司，生产许可证号：SCXK（湘）2009-0004。

1.3 试剂与仪器干酵母片，安徽宏业药业有限公司生产，批号：110909；氯化钠注射液，湖南科伦制药有限公司，批号：D110907G；角叉菜胶，sigma公司；水合氯醛，天津市科密欧化学试剂有限公司，批号：2011030。AY-120电子分析天平，日本岛津；DT-1000A电子天平，江苏常熟市意欧仪器仪表有限公司；YLS-7B足趾容积测定仪，山东省医学科学院设备；CW100型温度换能器，北京新航兴业科贸有限公司；BL-420F生物机能实验系统，成都泰盟科技有限公司；TG16-WS台式高速离心机，湖南湘仪实验室仪器开发有限公司；UV-1800紫外分光光度计，日本岛津。

1.4 大鼠足肿胀实验［3］取雄性SPF级SD大鼠60只，体质量180～200 g。按体质量随机分为6组：模型对照组（予蒸馏水），阿司匹林组（0.162 g/kg），莲花清瘟组（0.756 g/kg）、双黄花高剂量组（10.368 g/kg）、双黄花中剂量组（5.184 g/kg）、双黄花低剂量组（2.592 g/kg），每组10只。灌胃给药3 d，灌胃体积为10 mL/kg，模型对照组给予等剂量的生理盐水。末次给药前测定大鼠右后足足趾容积为致炎前容积，末次给药1 h后，大鼠右后足趾中部皮下注射1%角叉菜胶0.1 mL致炎，于致炎后1、2、4、6 h各测右后足足趾容积1次。计算肿胀率：肿胀率=（致炎后足趾容积-致炎前足趾容积）／致炎前足趾容积×100%。

1.5 小鼠耳肿胀实验［3］取70只SPF级ICR小鼠，雌雄各半，体质量18～22 g。适应性饲养3 d，按性别、体质量分层随机分为模型对照组（蒸馏水），阿司匹林组（195 mg/kg），连花清瘟组（1.092 g/kg），双黄花高剂量组（14.976 g/kg），双黄花中剂量组（7.488 g/kg），双黄花低剂量组（3.744 g/kg），每组10只。所有动物灌胃给药，灌胃体积20 mL/kg，除模型对照组给予等体积蒸馏水外，其余各组给予相应药物，每日1次，共7 d。末次灌胃1 h后，各组均于右耳正反面各均匀涂抹25 μL二甲苯致炎，致炎后60 min后处死动物，用8 mm打孔器打取左右耳同一部位圆片，称重，按下式计算肿胀度和肿胀率。肿胀度=右耳片质量-左耳片质量。耳肿胀抑制率 =［（模型对照组耳肿胀度-给药组耳肿胀度）／模型对照组耳肿胀度］×100%。

1.6 小鼠毛细血管通透性实验［3］取60只SPF级ICR小鼠，雌雄各半，体质量18～22 g。适应性饲养3 d，根据体质量随机分为模型对照组、醋酸泼尼松组（7.8mg/kg）、莲花清瘟组（1.092 g/kg）、双黄花高（14.976 g/kg）、中（7.488 g/kg）、低（3.744 g/kg）剂量组，每组 10 只。 每日灌胃给药1次，灌胃体积为20 mL/kg，模型对照组给予等剂量蒸馏水，连续给药7 d。第7日末次给药前禁食不禁水12 h，给药30 min后，尾静脉注射0.5%伊文氏蓝生理盐水溶液（10 mL/kg），同时各组立即腹腔注射0.8%醋酸生理盐水溶液10 mL/kg。20 min后断颈处死小鼠，腹腔注射5 mL生理盐水，轻揉腹部1 min，剪开腹部用采集管吸取腹腔溶液，离心（3000 r/min，15 min），取上清液，于紫外分光光度计590 nm处测定吸收度值（A）。

1.7 啤酒酵母致大鼠发热实验 ［3］取雄性SPF级SD大鼠90只，体质量130～160 g。适应性饲养2 d，实验前预测体温3次，剔除不在正常体温范围及体温波动＞0.3℃的动物。剩下的动物按体质量分层随机分组，分为模型对照组（蒸馏水）、布洛芬组（0.054 g/kg）、莲花清瘟组（0.7 g/kg）、双黄花高剂量组（10.368 g/kg）、双黄花中剂量组（5.184 g/kg）、双黄花低剂量组（2.592 g/kg）。灌胃给药，体积20 mL/kg，连续给药3 d，末次给药前先预测动物基础体温1次，然后背部皮下注射10%酵母液 2 mL/100 g，6 h后灌胃相应药物。测量给药后 1、2、3、4、5 h体温各1次，共5次，记录各时间点各组体温值。

1.8 统计学处理应用SPSS16.0统计软件。计量资料以（±s）表示，采用 t检验。 P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 双黄花对大鼠足肿胀实验的影响见表1。与模型对照组比较，双黄花高、中剂量组在观察2、4 h时间点均能显著抑制角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀 （P＜0.05），低剂量未显示较好的抑制肿胀作用（P＞0.05）。

表1 各组大鼠足肿胀情况比较（%，±s）

表1 各组大鼠足肿胀情况比较（%，±s）

与模型对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。下同。

组 别 n模型对照组 10阿司匹林组 10莲花清瘟组 10 1 h 2 h 4 h 6 h 39.59±9.58 47.80±10.97 53.71±9.98 48.69±9.19 24.21±10.85**22.69±9.07** 38.79±9.68**39.11±10.20*32.88±9.05 35.42±7.49** 41.68±9.64*43.22±8.75双黄花高剂量组 10 31.9±10.26 35.41±8.93* 41.29±10.51*43.23±10.28双黄花中剂量组 10 35.31±9.55 38.02±9.37* 44.12±7.97*45.78±9.80双黄花低剂量组 10 37.56±10.13 40.31±8.60 45.81±6.25 46.37±8.02

2.2 双黄花对二甲苯致小鼠耳肿胀实验的影响见表2。与模型对照组比较，双黄花高剂量组能显著抑制二甲苯致小鼠耳肿胀的肿胀度（P＜0.05）；中、低剂量未显示较好的抑制肿胀作用（P＞0.05），但具有一定抑制肿胀趋势。

表2 各组小鼠耳肿胀情况比较（±s）

表2 各组小鼠耳肿胀情况比较（±s）

组 别 n模型对照组 10阿司匹林组 10莲花清瘟组 10肿胀度（mg） 抑制率（%）14.24±5.20 —7.73±3.16** 45.7 9.30±6.04* 34.7双黄花高剂量组 10 9.52±4.53* 33.1双黄花中剂量组 10 10.77±6.69 24.4双黄花低剂量组 10 11.04±5.37 22.5

2.3 双黄花对小鼠毛细血管通透性实验的影响见表3。与模型对照组比较，双黄花高剂量组对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性的增加有显著抑制作用（P＜0.05）；中、低剂量未显示较好的抑制作用（P＞0.05），但具有一定抑制肿胀趋势。

表3 各组小鼠毛细血管通透性比较（±s）

表3 各组小鼠毛细血管通透性比较（±s）

组 别 n模型对照组 10醋酸泼尼松组 10莲花清瘟组 10吸收度（A）0.563±0.132 0.324±0.127**0.393±0.169*双黄花高剂量组 10 0.385±0.213*双黄花中剂量组 10 0.436±0.203双黄花低剂量组 10 0.483±0.225

2.4 双黄花对酵母致大鼠发热实验的影响见表4。与模型对照组比较，双黄花高剂量组大鼠药后不同时间点体温值显著降低（P＜0.05）；双黄花中剂量组大鼠药后各小时亦有降温作用，药后2 h作用显著 （P＜0.05）。

表4 各组大鼠用药前后体温比较（℃，±s）

表4 各组大鼠用药前后体温比较（℃，±s）

组 别 n 基础体温用药后体温1h 2h 3h 4h 5h模型对照组 10布洛芬组 10莲花清瘟组 10 37.07±0.16 38.79±0.37 38.62±0.47 37.13±0.17 38.09±0.54**37.89±0.45**36.94±0.14 38.42±0.36*38.21±0.31*双黄花高剂量组 10 37.05±0.17 38.38±0.37*38.20±0.25*双黄花中剂量组 10 37.08±0.20 38.47±0.45 38.23±0.28*双黄花低剂量组 10 37.05±0.17 38.56±0.61 38.35±0.45 38.39±0.52 37.71±0.56**38.05±0.29 38.01±0.21*38.22±0.35 38.25±0.44 38.25±0.4138.21±0.39 37.51±0.52**37.52±0.38**37.85±0.34*37.91±0.47 37.88±0.25*37.89±0.28*38.14±0.3138.13±0.51 38.16±0.2838.14±0.36

3 讨 论

双黄花颗粒由黄芩、黄芪、金银花等经现代工艺加工制备而成，具有清宣肺卫、解毒益气、平衡阴阳之效，临床上常用于治疗急性上呼吸道感染患者，能明显改善患者症状，疗效甚为满意。金银花富含挥发油、黄酮类、有机酸、三萜皂苷类等化学成分，具有解热、抗炎、抗菌、抗病毒、调节免疫等药理作用。其水煎液、口服液及注射液对鹿角菜胶、三连菌苗致热有不同程度的退热作用，对蛋青、鹿角菜胶、二甲苯所致水肿有不同程度的抑制作用［4］。黄芩主要有效成分为黄芩素、黄芩苷，具有抗炎、抗病毒、抗肿瘤等药理作用，其抗炎机制可能与其药用成分黄芩苷可显著抑制白细胞内白三烯B4、白三烯C4的生物合成，促进细胞内环磷腺苷水平提高有关［5］。黄酮类成分是黄芪中主要活性成分，具有增强机体免疫功能、广泛的抗菌作用等药理作用［6］。本研究中双黄花颗粒可显著抑制角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀，抑制二甲苯致小鼠耳肿胀，对醋酸所致的毛细血管通透性增加有显著性抑制，对酵母所致的大鼠发热亦有抑制作用。表明双黄花颗粒具有较好的抗炎，解热作用。

综上所述，双黄花颗粒通过其抗炎、解热等多种作用，缩短退热时间、缓解患者症状，促进疾病的恢复。双黄花颗粒具有较好的抗炎，解热作用是其治疗急性上呼吸道感染的作用机理之一。至于其抗炎、解热作用物质基础还有待进一步研究。

［1］贺海霞，胡学军，蔡光先，等.双黄花颗粒治疗急性上呼吸道感染临床观察［J］.中国中医急症，2011，20（10）：1551.

［2］蔡光先，贺海霞，伍参荣，等.双黄花颗粒对急性上呼吸道感染患者血清病毒含量的影响［J］.中华中医药学刊，2012，30（4）：684-685.

［3］魏伟，李希美，李元健.药理实验方法学［M］.北京：人民卫生出版社，2010：738，742-746，769-770.

［4］孙立娟.金银花的成分及药理学研究［J］.中国实用医药，2011，6（30）：239-340.

［5］宋琳莉，孟庆刚.黄芩的药理作用研究进展［J］.中华中医药学刊，2008，26（8）：1676-1678.

［6］颜培宇，于晓红，张德山，等.黄芪总黄酮对免疫功能低下小鼠T细胞极化的影响［J］.浙江中医药大学学报，2008，32（2）：163-164.

Experimental Study of Shuanghuanghua Granule on the Pharmacological Action of Anti-inflammatory

and Antipyretic

LIU Lin，MO Wei-hao，DENG Dong-fang，et al. The First Hospital of Hunan University of Chinese Medicine，Hunan，Changsha 410007，China

Objective:To study the pharmacologial action and antipyretic effects of Shuanghuanghua Granule with anti-inflammatory.Methods:The anti-inflammatory effects were observed by the rat metatarsal swelling，the mouse auricular swelling and the acetic acid-induced capillary permeability in abdominal cavity in mice experiments.Meanwhile，the antipyretic effect was detected by the fever rat models established by subcutaneous injection of yeast.Results:High and middle does group of Shuanghuanghua Granule significantly reduced the rate of swelling in hind paw after drug 2 and 4 hours.The high does group of Shuanghuanghua Granule obviously decreased mouse ear swelling induced by dimethyl benzene and capillary permeability in abdominal cavity induced by acetic acid-induced.Also，this group of Shuanghuanghua Granule remarkably decreased the body temperature of rats all time.The middle does groups of Shuanghuanghua Granule can significantly decrease the body temperature of rats after drug 2 hours.Conclusion:Shuanghuanghua Granule has obvious anti-inflamation and antipyretic effects.

Shuanghuanghua Granule；Acute upper respiratory infection；Anti-inflammatory；Antipyretic

R285.5

A

1004-745X（2013）06-0887-03

湖南省教育厅科研项目（09C751）；湖南省中医药管理局科研项目（2009030）

2013-02-04）