柑橘果实中主要的真菌毒素及其检测技术

胡媛媛，马 良，2，*，张宇昊，3

（1.西南大学食品科学学院，重庆400715；2.农业部农产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室（重庆），重庆400716；3.重庆市特色食品工程技术研究中心，重庆400716）

柑橘是世界产量最大的水果，也是我国主要种植水果之一。柑橘在生长、采收、贮藏、运输、销售等各个过程，易受到病原微生物污染，产生并积累各种生物毒素。目前柑橘常见病害有青绿霉病，黑腐病，酸腐病，蒂腐病，炭疽病等。受柑橘生长条件的不同以及外界因素影响，病害主要发生在果实采收期和/或贮藏期，造成柑橘的大量腐烂，并产生代谢毒素，其中最主要的真菌毒素包括展青霉素（patulin，PAT），橘青霉素（citrinin，CIT），链格孢霉毒素（Alternaria mycotoxins）。目前，针对水果真菌毒素的研究主要集中在苹果及其产品中展青霉素和赭曲霉毒素（ochratoxin，OT）的研究，柑橘类水果中真菌毒素的研究很少，尤其是对CIT，链格孢霉素等的检测标准、限量标准以及柑橘类水果中真菌毒素产生、污染和分布等方面均缺乏基础数据和系统研究。因此对柑橘中主要真菌毒素检测、分布、污染控制等技术的研究，对柑橘及其产品的质量安全具有极其重要的意义。

1 影响柑橘质量安全的主要真菌毒素

柑橘采后贮藏阶段是病害污染和毒素产生的主要阶段。贮藏期的病害可分为贮藏期侵染病害和采前侵染病害。贮藏期侵染病害包括青霉病、绿霉病等，采前侵染病害包括柑橘黑腐病、柑橘褐腐病、黑色蒂腐病、炭疽病等，其中青绿霉病和柑橘黑腐病是产真菌毒素的主要病害[1]。意大利青霉和指状青霉是引发柑橘青、绿霉病的主要霉菌，它们的最适生长温度在25℃左右，最适水分活度为0.95，因此只要温湿适宜，就会引发柑橘的腐烂并产生大量真菌毒素，如展青霉素、橘青霉素、青霉酸等。柑橘黑腐病是由链格孢霉引起的，它的最低耐受温度可达-5℃左右，在采收前以菌丝体或分生孢子的形式吸附在果实表面，当温度适宜时从果实伤口或果蒂处侵入致病，产生大量链格孢霉素[2]。

青绿霉病从果实表面开始侵染柑橘，并存在交叉侵染的情况，在柑橘病害中具有高发性，柑橘黑腐病则主要是从果蒂处开始侵染，由内部开始破坏果实组织，具有隐藏性。因此它们是影响柑橘质量安全的主要病害，而它们所产生的真菌毒素应成为控制柑橘类产品质量安全的重点监控对象。

1.1 展青霉素

展青霉素（patulin，PAT）又名棒曲霉素，由曲霉菌、青霉菌和丝衣霉产生的次级代谢产物，是水果中常见真菌毒素。PAT是一种低分子量的半缩醛内酯，在柑橘中主要由指状青霉和意大利青霉产生，在两种霉菌受到抑制时，也可由乌来青霉产生[3]。青霉菌属的孢子利用柑橘伤口处的营养物质萌发形成菌丝，能够快速繁殖并产生毒素，溶解伤口附近的白皮层，再溶解黄皮层，完成对果实组织细胞的降解[4]。实验证明甜橙、克莱门柚、温州蜜柑中的黄烷酮橘皮苷，葡萄柚中的柚苷，以及柠檬中的黄烷酮橘皮苷和黄烷酮叶香木甙含量都会影响柑橘对青霉菌的敏感度，特别是甜橙、温州蜜柑中含高浓度的多甲基黄酮，被认为是对青霉菌最不敏感品种，因此展青霉素污染较少[5]。一般情况下PAT存在于青绿霉菌引发的腐烂部位处，且腐烂程度越大，PAT的浓度越高[5]。有研究发现，PAT在水果中扩散可能渗透到腐烂部位周围几厘米处，扩散速度与水果的种类、腐烂面积、成熟程度、含水率、糖酸比等因素有关，质地越松软，糖酸比越高，PAT的扩散速度越快，水果品种不同，也会影响PAT的扩散速度[6-7]。

PAT经不同途径接触动物，LD50为15～25mg/kg，具有急性毒性，包括对动物的肺、脑水肿、肝脏、脾脏、肾的损害和免疫系统的毒害作用；也具有慢性毒性，表现在对动物的细胞毒性，基因毒性和免疫毒性。对巯基有强亲和力，可与含巯基的蛋白和多肽反应，破坏DNA单链和双链，从而抑制DNA和RNA的合成，也可抑制多种酶活性，特别是一些生化指标中的酶，如碱性磷酸酶、二磷酸果糖酶和己糖激酶等。在相当大剂量范围内，可使小鼠大脑、肾脏、肝脏中DNA链破裂，其中大脑是最主要的靶器官[8]。此外，对成年哺乳动物和胚胎期动物的肾脏也有毒害作用[9]。直接接触皮肤，可引起DNA损伤，从而造成细胞周期阻滞和内部介导细胞凋亡，积累大量具有皮肤毒性的聚胺产物[10]。

鉴于PAT的遗传毒性和免疫毒性等危害，世界各国对PAT在水果中的限量标准大多规定在50μg/kg以内，主要以苹果和山楂作为主要限制对象，WHO规定在苹果汁中PAT的限量值为50μg/kg，欧盟关于PAT最新规定中苹果泥中最大允许限量为25μg/kg，特别指出婴儿食品中最大限量不超过10μg/kg，我国规定在苹果和山楂制品中限量值为50μg/kg。目前，国内外对柑橘属中PAT的限量标准属于空白，亟待针对不同柑橘种类、不同食用方式等进行相关PAT限量标准的研究和完善。

1.2 橘青霉素

橘青霉素（citrinin，CIT）是一类醌甲基化合物，由橘青霉、土曲霉、扩展青霉、纯绿青霉和一些红曲霉属产生。柑橘果实常常遭到橘青霉、土曲霉、扩展青霉、意大利青霉污染而产生CIT。它是一种酸性的淡黄色晶体，在250nm和330nm处有最大紫外吸收，熔点为172℃。CIT有强抑菌效果，可作为抗生素使用[11]。但它对动物和人类具有肾毒性、基因毒性、致癌性、胚胎毒性，它是一种肾毒素，会破坏动物肾小管，毒害胚胎期动物的肾脏，是巴尔干肾病的潜在的病原体[9]。它还会对小鼠生殖器官有一定的损害[12]。其胚胎毒性，主要体现在加快了细胞凋亡，使胎儿体重减少，用CIT处理过的胚囊的移植成功率大大降低[13]。此外，CIT能与其他毒素发生协同作用，它和赭曲霉素都是作为具有肾毒性的致癌物质，在同时存在时可极大增强基因毒性，加速DNA链的断裂和抑制细胞增殖[14]。

CIT在世界上没有统一的限量标准，主要原因是没有合适的常规分析方法。另外，加工过程中不同的加工技术会对CIT及其含量造成影响，也造成了CIT限量标准制定具有相当的困难。如，加工过程中可利用CIT的螯合能力和对pH和温度敏感性，进行食物中CIT的有效脱除[15]。但鲜果仍是柑橘果品最重要的食用方式之一，CIT具有的毒性及其对柑橘鲜果广泛的污染一直以来严重威胁着柑橘的消费安全。

1.3 链格孢霉素

链格孢霉素是由链格孢霉产生的一系列代谢产物，主要包括细交链孢菌酮酸（tenuazonic acid，TeA）、链格孢酚（alternariol，AOH）、链格孢酚甲基醚（alternariolmethyl ether，AME）、细格菌毒素、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ（altertoxinⅠ、Ⅱ、Ⅲ，ATX-Ⅰ、ATX-Ⅱ、ATX-Ⅲ）和AAL毒素（AAL-toxin）。其中TeA、AOH、AME均在柑橘类水果中检出，是污染柑橘的主要链格孢霉素[16]。不同品种的柑橘，对柑橘链格孢的敏感性也有所差异，以丹西红桔和王柑为亲本的杂交产物、葡萄柚、克里曼朋橘、皇帝柑极易感染柑橘链格孢霉，温州蜜橘和橙类品种（西班牙橙除外）表现出轻微的敏感性，柠檬和酸橙类品种（墨西哥酸橙轻微敏感）不易感染链格孢霉菌[17]。

链格孢菌在不同柑橘中的主要侵染方式不同，造成链格孢霉毒素在不同品种中分布情况不同。有研究报道，甜橙、柠檬类柑橘以蒂部侵入为主，而温州蜜柑类宽皮柑橘，以果皮侵染为主[18]。因此甜橙、柠檬类柑橘果实内部的链格孢霉素含量可能比外部高，温州蜜柑类宽皮柑橘果实外部毒素含量可能高于内部。类似链格孢霉的污染造成果实表面特征不能反映果实的实际质量，增加了柑橘鲜果、果皮类产品等安全风险。虽然柑橘鲜果含有果皮、白皮层、果肉，可有效隔绝病原微生物及其毒素对果肉的侵害和污染，但柑橘组织损伤时，这些污染是无法避免的[19]。Stinson等[20]在橙子和柠檬中发现了TeA、AOH和AME，其中TeA浓度分别为61.1和48.8μg/g，AOH和AME在柑橘中浓度分别为41、2.8μg/g，且橙子中毒素含量普遍高于柠檬。

TeA属于四氨基酸衍生物，具有抗菌活性，是一种水溶性链格孢霉素，雄性小鼠经口LD50=182mg/kg，雌性小鼠经口LD50=81mg/kg，被认为是所有链格孢霉代谢产物中毒性最强的毒素[21]。它可以抑制蛋白合成，抑制皮肤肿瘤恶化[22]。它也是一种天然植物毒素，表现在干扰光合系统Ⅱ中酶电子的接受传递，从而抑制光合系统Ⅱ的活性[23]。AOH和AME属于苯并吡喃酮衍生物，具有遗传毒性，单一TeA在200μmol/L下对DNA无明显破坏作用，但三种毒素混合具有协同作用，对DNA的破坏作用远超过单一组分效果之和[21]。也有报道AOH、AME、TeA在链格孢霉素致突变作用中，只起到小部分作用，并不是主要致突变成分[24]。Fatma等[25]利用人体结肠癌细胞，研究了AOH的细胞毒性，发现AOH通过激活细胞中线粒体造成细胞凋亡从而降低细胞活性。

越来越多的实验和报道证实链格孢霉素在柑橘污染中具普遍性，且对哺乳动物具有较强的遗传危害。但是目前国内外尚无各种链格孢霉素限量的相关法律法规，需要对相关领域进行研究。

2 水果检测的主要真菌毒素

水果中真菌毒素检测普遍使用的方法有薄层色谱法、高效液相色谱法、气相色谱法、免疫学方法等，液相色谱法是应用最广泛的方法，也是我国果品中真菌毒素检测的标准方法之一。由于TLC检测灵敏度低，且在羟甲基糠醛存在时对真菌毒素的分离效果差，因此只能用于定性或半定量分析。液相色谱应用后，TLC逐步淡出水果检测领域，目前已极少应用在水果中真菌毒素检测。与此同时，一些新的检测手段也开始应用于水果的毒素检测，如高效毛细管电泳法，近红外检测技术等。

目前这些检测技术主要用于苹果、梨、橄榄等水果中真菌毒素的检测，而针对柑橘中真菌毒素检测技术的系统研究属于空白。柑橘本身含有黄酮类化合物，故其果汁大多为黄色，在进行检测时，尤其是进行色谱检测时，容易造成干扰，影响分析结果。因此，综合各种水果中真菌毒素检测技术的研究进展，与柑橘果实本身的基质特性以及柑橘产业相结合，对今后柑橘产业链中真菌毒素的检测技术的研究以及真菌毒素的监控具有极其重大的意义。

2.1 色谱技术

2.1.1 液相色谱技术（liquid chromatography，LC） 影响液相检测结果的主要是样品前处理方式和检测器类型，利用液相色谱法检测水果真菌毒素常用检测器是荧光检测器和紫外检测器，不同检测器对不同毒素的灵敏度不同。研究发现，荧光检测CIT结果的灵敏度是紫外检测结果的100倍[26]，而在链格孢霉素检测时，从检出限到回收率，紫外检测的结果均优于荧光检测[27]。Scott等[28]将蔓越橘汁过固相萃取柱，利用反相LC-UV检测果汁中的链格孢霉素，AOH和AME的检出限均在0.4μg/L，回收率分别为93%和81%。陈月萌等[29]建立了同时检测水果中三种链格孢霉素的高效液相色谱-荧光分析方法，利用固相萃取作为样品前处理手段，成功检测出水果中残留链格孢霉素，回收率均在78.2%～103.6%范围内。Li等[30]用蒸发光散射检测器（evaporative light-scattering detector，ELDS）代替了传统的紫外检测器，与液相色谱仪结合，用于检测链格孢霉素，线性响应范围在0.4～4μg之间，检出限在6μg/m L，与经衍生处理后HPLC检测方法相比，HPLC-ELDS方法的灵敏度更高。液相色谱分析前，一般需要对待检物质进行分离纯化浓缩等前处理，有的真菌毒素还需要衍生处理，以提高检测结果的可靠性和准确性。选择不同的萃取方式也会影响检测结果的准确度，常见前处理方法包括液液萃取、传统固相萃取、免疫亲和柱富集等，它们各有其优势与不足。果汁中的PAT经固相萃取后，其浓度是液液萃取效果的十倍左右，大大增强了检测灵敏度[31]。同时，不同萃取方法适用的产品不同，基质分散固相萃取适用于对浓缩果汁PAT监控，而固相萃取更适用于稀释果汁的分析。Tokusoglu等[32]利用免疫亲和柱-高效液相色谱-荧光检测器同时检测水果中的CIT和OT，平均回收率均在90%以上，检出限均为0.05μg/kg，可用于水果及制品的快速检测。近年来，水果毒素分析中开始引入分子印迹技术，结合固相萃取，建立了一种改良的前处理方法，即分子印迹-固相萃取（molecularly imprinted solid phase extraction，MISPE）。它是一种基于固相萃取原理的新型萃取技术，分子印迹聚合物通过嫁接的聚合方法，吸附在二氧化硅珠上，用于PAT的提取，最大可吸附93.97%的PAT，且回收率超过90%，是一种良好的新型萃取方法[33]。Guo等[34]以1-羟基-2-萘酸为模板制备CIT分子印迹聚合物，结合液相色谱检测CIT，结果表明这种聚合物可以高选择性吸附CIT，回收率为86.7%～97.7%。

2.1.2 液相色谱-质谱技术（liquid chromatographymass spectrometry，LC-MS） 尽管液相色谱技术能够良好检测水果中的链格孢霉素，液相色谱与质谱联合检测，不仅可以避免衍生，缩短分析时间，还能提高对毒素的分辨率。当前检测果汁PAT时，多采用固相萃取、HPLC和MS结合，回收率可达90%，相对标准偏差RSD在1.5%～7.5%之间，检测灵敏度高[35]。Song等[36]将固相萃取与HPLC及MS相结合进行果汁中PAT、OTA、AFB1含量检测，定量限最低达0.8μg/kg，回收率在66%～127%范围内。Rodrigo等[37]采用HPLCMS对金桔的外果皮和中果皮（白色组织）中的AOH、AME进行检测，检测结果表现出良好线性范围0.5～20.0mg/kg，相关性为0.997，检测限和定量限分别小于0.13、0.5μg/kg。由于TeA是一种强酸，可以与金属发生螯合，特别是在分析含多种干扰物的基质时，极易影响仪器分析的准确性。

虽然LC-MS相较于LC提高了检测灵敏度，但是TeA类物质衍生时仍然存在这类问题，因此同位素薄弱化分析（stable isotope dilution assay，SIDA）作为一种优化手段，用于水果中真菌毒素检测。它主要是通过合成一种稳定的同位素标记物，作为待检物质内标物，以提高检测的准确度。Stefan等[38]将同位素薄弱分析方法用于检测TeA，首先合成稳定的同位素标记物[13C6，15N]-TeA作为对应毒素的内标物，进行LCMS扫描，紫外检测器检测，实验表明，该方法即弥补衍生反应的不完整性，还能简化操作，增加检测结果的可靠性。有研究表明SIDA引入水果毒素分析，再结合LC-MS检测水果中的PAT含量回收率高达94%～104%，符合欧盟检测最高要求水平[39]。

此外，大气压化学电离（atmospheric pressure chem ical ionization，APCI）也被引入LC-MS检测中，可用于检测五种链格孢霉素在果蔬汁产品中的含量，仅需简单萃取处理样品，大大节省了检测时间，是一种新型检测方法[40]。

2.1.3 气相色谱-质谱技术（gas chromatography-mass spectrometry，GC-MS） 气相色谱-质谱联用技术同样可以用于检测水果中PAT，该方法减少了浓缩和净化的步骤，有效缩短了前处理时间，但检出限偏高，虽然GC-MS对PAT有良好分辨率，可在分析中方便识别目标物，但精密度、重复性、检出限和成本等因素综合比较，HPLC-DAD更适用于日常分析研究[41]。在采用GC-MS方法检测PAT时，需选择一定内标物，如Cunha等以13C5-7PAT为内标物检测橙汁中的PAT，Xiao等以3-硝基苯甲醇为内标检测果汁中PAT，这样可以弥补目标分析物的损失，抑制样品基质影响[42-43]。

2.2 免疫速测方法

与液相色谱不同，免疫分析法不需要考虑净化、富集、衍生等问题，也无需考虑链格孢霉素荧光值的缺乏，被广泛用于检测展青霉素和链格孢霉素。同时，它也是检测水果中CIT的主要方法，虽然液相色谱也适用于CIT的检测，但是目前大多用于谷物、动物饲料等原料的CIT检测，而在水果中的应用较少。

目前，免疫速测方法检测水果真菌毒素，使用最多的是酶联免疫吸附法（ELISA），也可使用荧光免疫分析、胶体金免疫技术、化学发光免疫技术等。De Champdore等[44]建立了一种新型竞争性荧光偏振免疫检测方法检测PAT，这种分析方法是基于在PAT固定化衍生物和样品PAT之间建立一种竞争结合荧光标记抗体的竞争关系。通过检测PAT与荧光标记抗体结合过程中荧光基团发射的荧光值，判定样品中PAT含量，检出限为10μg/L，适用于PAT的微量检测。Yvonne[45]和Madeleine等[46]制备出AOH、TeA的单克隆抗体和多克隆抗体，利用直接竞争ELISA法检测水果及其饮料中的AOH、TeA，其中AOH的检测限可达1～2μg/kg，而TeA在水果中的检测范围达25～150μg/kg。

一些基于特异性抗体的快速检测设备同样被用于水果中PAT、CIT和链格孢霉素的检测，它们不仅可作为HPLC的前处理方法，如免疫亲和柱-液相色谱的应用，也有一些可直接用于检测，如ELISA试剂盒、生物传感器等。Qian等[47]将CIT抗体固定在改良固定相电极表面开发出一种新型电压免疫感应器，测定CIT含量，分析结果无明显交叉反应，线性范围介于25～100μg/m L。此外，微流体免疫传感器也可用于检测CIT，它是利用特异竞争免疫分析方法，引发氧化还原反应，产生电流，根据电流的强弱判断待测物中CIT的数量。这种微流体免疫传感器的适用范围在0.5～50ng/m L，且整个检测过程仅需45m in，与目前其他分析方法，特别是色谱分析相比，具有耗时短、选择性强、灵敏度高的特点[48]。

虽然免疫速测方法具备灵敏度高、耗时短、特异性强等优点，但真菌毒素的单克隆抗体制备过程较复杂，成本较高，且检测对象单一，不利于免疫方法的普及。因此，研究出一种可同时检测污染并可对水果主要真菌毒素的速测方法是今后研究的热点之一。

2.3 高效毛细管电泳技术（high performance capillary electrophoresis，HPCE）

高效毛细管电泳是集电泳和色谱为一体的新型液相分离技术，其分析速度快、灵敏度高、进样量少、再现性佳、能直接进样，易于自动化操作，作为一种重要的分离分析方法被广泛应用。

目前，胶束毛细管电泳法（micellar electrokinetic capillary chromatography，MEKC或MECC）已经成功用于果汁中PAT检测，且从回收率、精密度、检出限等方面均优于HPLC方法[49-50]。有研究中也提到优化后的微乳液毛细管电动色谱（microemulsion electrokinetic chromatography，MEEKC）和毛细管区带电泳也可用于果汁PAT的检测，到达理想的分离效果[51-52]。因此，HPCE技术在各种柑橘鲜果及制品PAT及各种毒素检测中，将发挥越来越重要的作用。

2.4 无损光谱检测技术

非侵入无损光谱检测技术包括稳态和时间分辨荧光光谱，紫外/可见/近红外光谱，双光子诱导荧光光谱。它已被用于谷物及其制品中真菌及其毒素检测，但在柑橘等水果中还处于检测其内部品质的阶段。其中紫外、荧光检测器常与HPLC联用，近红外光谱技术开始用于水果及其制品的PAT的研究，而双光子诱导荧光光谱，由于在双光子激发条件下可显著降低基质成分的背景辐射干扰，可用于葡萄酒和啤酒真菌毒素的定性定量检测[53]。

近年来，近红外光谱检测食品真菌毒素的研究多用于谷物、饲料等食品中，它区别与以往的化学检测，作用对象是检测样品本身，无需进行处理，既能节省时间，又能降低成本，但是在水果领域中的应用有待提高[54-55]。张亮[56]采用傅立叶近红外光谱法分析PAT，并建立了近红外光谱分析法检测不同体系中PAT的检测模型，在浓缩苹果汁中PAT平均回收率达99.97%，具有高精密度和准确度，可用于浓缩果汁的快速检测。值得注意的是，一方面，光谱法是通过光的反射或透射来检测的，因而其对表面污染的区分效果比深层污染更好；另一方面，由于水果的成分复杂，某些物质的吸收峰可能会覆盖毒素的部分特征吸收峰，只能通过加大样品量来增加模型稳定性。因此，近红外光谱技术检测水果中真菌毒素还需要进一步研究。

2.5 PCR技术

目前有报道采用各种分子生物学技术也可进行真菌毒素的快速鉴定。主要是通过PCR技术识别真菌毒素产生菌DNA片段，从而判断该水果是否可能含有该真菌产生的毒素[57]。M iguel等[58]利用链格孢霉与其产生毒素含量正相关的关系，通过采用基于序列遗传标记的PCR技术识别水果中链格孢霉的DNA，从而判断水果是否被链格孢霉素污染。也有研究通过检测PAT、OTA的复合PCR片段检测PAT、OTA产生菌的DNA，判定食物中致病菌污染情况[59-60]。但是，这种技术同样存在缺陷，如未经过前处理的PCR检测，因其不能有效区分活细胞和死细胞，可能过高估计产毒菌的含量，从而影响对毒素污染食品的检测结果。为此，Ana等[61]研究出一种新型的核酸染色插层法作为一种前处理手段，用以克服这类问题，但是该前处理中用到的DNA结合染料对细胞也可能造成一定的损害，因此选择适当的前处理方法和试剂也是目前PCR技术应用于水果中真菌毒素检测的难点之一。

3 展望与讨论

目前国内外缺乏统一的针对柑橘类鲜果及食品中毒素的检测标准，也没有针对可能污染柑橘毒素的限量标准。相关柑橘的研究主要集中在病害机理、病虫害防治、贮藏保鲜等方面，缺乏针对侵染后柑橘中真菌毒素的产生、污染分布和控制等的系统性研究。

在病虫害防治研究中化学防治仍然是目前使用最广泛的方法，其中杀菌剂对真菌毒素的影响，并没有引起普遍关注。近年来，一些杀菌剂被报道和证明不仅不会抑制真菌毒素的生长，还会刺激其含量的升高[62]。杀菌剂与真菌毒素的互作关系及机理不明，使用杀菌剂无法保证柑橘类食品的食用安全性。因此，了解真菌毒素在柑橘中的产生、污染、分布情况，对有效控制柑橘水果安全有重要意义。

目前柑橘真菌毒素污染控制主要存在以下三点问题：

工业生产橙汁，柠檬汁等果汁生产过程中主要是通过剔除腐烂部分降低毒素及病菌污染的风险，但是这并不能完全消除风险。有的病原菌，如链格孢菌属可使柑橘果实内部腐烂而表皮无明显变化，不能通过冲洗，分拣操作去除毒素，增加了果汁类产品的安全隐患。

柑橘中真菌毒素主要集中在果皮，由于柑橘属水果以鲜果果肉或果汁为传统食用方式，果皮弃去或用于制药、陈皮、饲料等，因此过去柑橘真菌毒素污染风险相对较低。但是随着柑橘果肉和果皮应用范围的扩大，极大增加了毒素污染风险和人类中毒的几率。近年来，柑橘皮渣的回收利用成为柑橘加工和副产品综合利用的一大重点，特别是作为新型动物饲料应用广泛。此外还有柑橘粉、柑橘酒、柑橘糖浆等副产物的研发，极大的扩展了柑橘类果皮的使用范围，而柑橘皮是真菌毒素污染的首要部分，这些产品极大增加了毒素污染柑橘食品和通过污染饲料继而污染畜禽等动物源性食品的风险，间接威胁人类饮食安全。

目前，国内外尚无针对柑橘类水果真菌毒素污染的检测标准及限量标准，难以实现对农产品以及工业化生产的安全监控。

总之，在柑橘产业链中真菌毒素的检测标准和污染控制研究处于空白阶段的情况下，需要结合国内外对水果真菌毒素的研究，对柑橘真菌毒素污染分布、快速检测及其控制技术进行确定和改良，这也是提高柑橘产品竞争优势的必要条件，研究如何在柑橘制品生产过程中去除污染的真菌毒素以及如何高效快速检测相关产品的污染水平将成为研究重点。

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