α－亚麻酸、植物甾醇酯复方牛奶降血脂人体试食研究

陈 伟，母智深，李洪亮，于景华，2，白林春，闫宁环，季国志

(1.内蒙古蒙牛乳业( 集团) 股份有限公司，内蒙古呼和浩特011500;2.天津科技大学，天津300457;3.内蒙古化工职业学院，内蒙古呼和浩特010018)

α-亚麻酸、植物甾醇酯复方牛奶是以α-亚麻酸、植物甾醇酯为主要原料的一款功能性牛奶产品，其功效成分α-亚麻酸［1］甾醇酯。近期研究发现，植物甾醇具有降低血液胆固醇、甘油三酯、抑制乳腺增生、预防前列腺疾病和调节免疫等作用［2-3］。其中降低胆固醇是最为肯定的结论。通过对动物实验发现，产品具有辅助降血脂功能，本实验继续对该产品进行了人体实验，依据《保健食品检验与评价技术规范》［4］有关规则评判对产品是否具有辅助降低血脂功能进行评价［5］。为其在乳制品中应用打下理论基础。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

OLYMPUS AU600 生化试剂盒 日本奥林巴斯公司。

F- 820 型血球计数仪日本东亚公司;MIDIRON 尿10 项分析仪德国宝灵曼公司;Olympus AU600 全自动生化分析仪 日本奥林巴斯公司;日本阿洛卡-500 型B 超机 日本阿洛卡株式会社;HG 3200 型800 毫安X 线胸透机 日本岛津公司;6511 型心电图机 日本光电工业株式会社。

1.2 样品制备

含α-亚麻酸、植物甾醇酯复方牛奶的制备:生牛乳与植物甾醇酯、亚麻酸油及食品添加剂经过搅拌混合，再经均质、巴杀及灭菌制成。其中1000g 产品中植物甾醇酯(植物甾醇酯≥90%)的添加量为4.0g;亚麻酸油(α-亚麻酸≥60%)的添加量为4.0g。

安慰组牛奶的生产:与含α-亚麻酸、植物甾醇酯复方牛奶同一批次、同一包装，同一工艺条件下经均质、巴杀及灭菌制成的纯牛奶。

1.3 受试者选择

1.3.1 纳入标准 选择年龄在18～65 岁的高血脂症患者为受试者，要求保持平常饮食，半年内采血2 次均血清总胆固醇(TC)≥5.2mmol/L 或血清甘油三酯(TG)≥1.65mmol/L 者，均可纳入实验。

1.3.2 排除标准 妊娠或哺乳期妇女，对保健食品过敏者;合并有心、肝、肾和造血系统等严重疾病，精神病患者;短期内服用与受试功能有关的物品，影响到对结果的判断者;不符合纳入标准，未按规定服用受试样品，无法判定功效或资料不全影响功效或安全性判断者。

1.4 试食设计及分组

采用双盲随机分组、组间和自身两种对照设计。依照上述标准选择120 例高血脂症患者，按年龄、性别、血脂水平等随机分为试食组和对照组两组，其中试食组60 例，对照组60 例。在实验结束后计算因故终止实验的病例数(包括中途停服受试物、未参加复检等)，计算脱离率。

1.5 试食方法

试食组服用含α-亚麻酸、植物甾醇酯复方牛奶，对照组服用安慰剂(纯牛奶)，250mL/盒，每日2次，每次1 盒，连续观察45d。试食期间保持平日的生活和饮食习惯。

1.6 观察指标

各项指标于试食开始及结束时各测试一次。

1.6.1 安全性指标 一般体格检查:实验前详细询问并了解受试者的神、睡眠、饮食、大小便等情况，测量实验前后体重、血压变化;尿、大便、血液常规检查:包括红细胞计数(RBC)、血红蛋白(Hb)、白细胞计数(WBC);腹部B 超、心电图、X 线胸部透视检查(实验开始前测定一次);生化指标检查:谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)。另外记录不良反应观察结果。

1.6.2 功效性指标 空腹取血，测定血清总胆固醇(TC)水平及降低百分率、甘油三脂(TG)水平及降低百分率、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平及上升幅度。

1.7 试食数据统计

数据统计用SPSS13.0 版软件包，计数资料采用X2检验;计量资料采用t 检验。结果用均值± 标准差(¯x ±s)表示，试食前后自身比较用配对t 检验，组间比较用成组t 检验，后者需进行方差齐性检验，对非正态分布或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态方差齐后，用转换的数据进行t 检验;若转换数据仍不能满足正态方差齐要求，改用t'检验或秩和检验;但变异系数太大(如CV ＞50%)的资料应用秩和检验。

2 结果与分析

2.1 结果判断

血清总胆固醇(TC)降低＞10%;甘油三酯(TG)降低＞15%;高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)上升＞0.104mmol/L;各功效观察指标实验前后自身比较和试食后组间比较均有统计学意义，方可判定该指标阳性。

血清总胆固醇、甘油三酯二项指标阳性，高密度脂蛋白胆固醇不显著低于对照组，可判定该受试样品具有辅助降血脂功能作用:血清总胆固醇、甘油三酯二项指标中一项指标阳性，高密度脂蛋白胆固醇不显著低于对照组，可判定该受试样品具有辅助降低血清总胆固醇或辅助降低甘油三酯作用。

2.2 统计学处理结果

双盲法观察结果显示:服食1 号者为α-亚麻酸、植物甾醇酯复方牛奶，服食2 号者为安慰剂。120 例受试者中途放弃试食3 例(对照组2 例，试食组1 例)，未参加复检13 例(对照组7 例，试食组6 例)，最后确定受试者104 例，其中对照组51 例，试食组53 例。对照组脱离率15.00%，试食组脱离率11.67%。

2.2.1 安全性观察

2.2.1.1 一般资料 实验前血压、心率、大小便、血象、肝肾功能、胸透、心电图、B 超等检查，受试者均在基本正常范围，分组情况见表1，试食前两组受试者年龄、性别、血脂水平均无明显差异(p ＞0.05)，具有可比性。

表1 试食前一般资料比较Table 1 The information of two groups before administration

2.2.1.2 生化指标检查 结果见表2，食用受试物45d，两组血压、心率、血象、肝肾功能、大小便各项检测指标均在基本正常范围，试食期间也未见过敏反应及其他不良反应，说明α-亚麻酸、植物甾醇酯复方牛奶对机体健康无明显影响。

2.3 功效观察

2.3.1 临床观察 结果见表3，服食受试物45d，试食组临床观察总有效率为81.13%，与对照组(49.02%)比较差异有显著性(p ＜0.01)。

2.3.2 血清总胆固醇 结果见表4，自身比较:试食组试食后血清总胆固醇与试食前比较，差异有显著性(p ＜0.01);对照组试食后血清总胆固醇与试食前比较差异无显著性。组间比较:两组试食前血清总胆固醇无明显差异，试食后试食组血清总胆固醇与对照组比较差异有显著性(p ＜0.01)，其平均下降百分率为10.32% ±0.14%，说明α-亚麻酸、植物甾醇酯复方牛奶有降低血清总胆固醇作用。

表2 试食前后血象、肝肾功能、大小便的变化(¯x±s)Table 2 Changes in biochemical of blood，liver and kidney function，defecation of two groups before and after administration(¯x±s)

表3 临床观察功效比较Table 3 The results of function in clinical

表4 两组试食前后血清总胆固醇变化(mmol/L，¯x±s)Table 4 Changes in TC levels of two groups before and afrer administration(mmol/L，¯x±s)

2.3.3 甘油三脂 结果见表5，自身比较:试食组试食后甘油三脂与试食前比较，差异有显著性(p ＜0.01);对照组试食后甘油三脂与试食前比较差异无显著性。组间比较:两组试食前甘油三脂无明显差异，试食后试食组甘油三脂与对照组比较差异有显著性(p ＜0.01)，其平均下降百分率为15.58% ±0.34%，说明α-亚麻酸、植物甾醇酯复方牛奶有降低甘油三脂作用。

表5 两组试食前后甘油三脂的变化(mmol/L，¯x±s)Table 5 Changes in TG levels of two groups before and afrer administration(mmol/L，¯x±s)

2.3.4 高密度脂蛋白胆固醇 结果见表6，对照组HDL-C 试食前后只降低了0.02 无无显著性差异(p ＞0.05);试食组食用前后HDL-C 也只有降低0.01，无显著性差异(p ＞0.05);试食后对照组和试食组HDL-C 水平之相差0.02，俩组之间同样不存在显著性差异(p ＞0.05)。

表6 两组试食前后高密度脂蛋白胆固醇的变化(mmol/L，¯x±s)Table 6 Changes in HDL-C levels of two groups before and afrer administration(mmol/L，¯x±s)

3 结论

3.1 本次实验采用双盲对照法，选择120 例高血脂症患者，按年龄、性别、血脂水平等随机分为对照组和试食组，分别食用安慰剂和α-亚麻酸、植物甾醇酯复方牛奶，250mL/盒，每日2 次，每次1 盒。最后确定有效病例104 例，其中对照组51 例，试食组53例，观察期间保持平日的生活和饮食习惯。服食45d后，结果表明:α-亚麻酸、植物甾醇酯复方牛奶能降低血清总胆固醇(p ＜0.01)、甘油三脂(p ＜0.01)，血清总胆固醇平均下降10.32% ±0.14%，甘油三脂平均下降15.58% ±0.34%，而高密度脂蛋白胆固醇水平无显著性差异。其总有效率为81.13%，与对照组(49.02%)比较，差异有显著性(p ＜0.01)。依据《保健食品检验与评价技术规范》(2003 年版)有关规则评判，α-亚麻酸、植物甾醇酯复方牛奶有辅助降血脂功能。

3.2 近些年对于植物甾醇降低血脂的研究也特别多，主要是在高血脂动物进行研究，其结果与本实验结果一致也是本研究开展的基础。其中2011 年，王玉［6］植物甾醇酯对高血脂症小鼠的降血脂的研究，结果显示75mg/kg·d 的植物甾醇酯可以降低小鼠的血脂。2011 年张泽生［7］研究植物甾醇对高血脂大鼠血脂水平的影响植物甾醇对高血脂症大鼠血脂水平具有显著降低作用，并且具有抑制脂质过氧化和保护肝脏的作用。2012 年温超［8］等人的研究结果显示:2 种植物甾醇均有降低血脂和提高脂蛋白代谢酶活性的趋势，且此趋势随着时间的延长而逐渐消失。

3.3 植物固醇因具有降低血脂作用而受到越来越多的关注，植物甾醇是一种天然的营养强化剂，主要是从植物中提取得到，尤其是油料种子［9］中含量最高。植物固醇可以降低肠道细胞对胆固醇的转运，促进粪便排出，使胆固醇肠道吸收受到抑制［2］植物甾醇的降血脂机制［10］主要有以下3 点:抑制肠道胆固醇吸收;影响胆固醇运输;影响胆固醇合成和分泌。本实验主要从生化指标分析了植物甾醇的降血脂，其机制原理还有待做更进一步的深入研究。

［1］杨天奎，高春香，张超明，等.α-亚麻酸降血脂作用的研究［J］.中国油脂，1995，20(3) :46-49.

［2］盛漪，古文英.植物甾醇调节血脂功能研究［J］.食品科技，2006(9) :296-298.

［3］高芃，陈志飞，徐海滨.植物甾醇酯降血脂功能实验研究［J］.中国食品添加剂，2009，S1:281-284.

［4］昭日格图，娜日苏，博日吉汗格日勒图，等.黄芪多糖咀嚼片降血脂人体试食实验研究［J］.食品科学，2011( 11) :306-309.

［5］中华人民共和国卫生部.保健食品检验与评价技术规范(2003 版) ［S］.

［6］王玉，刘滨城，任运宏，等.植物甾醇酯对高脂血症小鼠的降血脂作用研究［J］.食品科学，2011(17) :326-329.

［7］张泽生，侯冬梅，贺伟，等.植物甾醇对高血脂大鼠血脂水平的影响［J］.食品科学，2011(11) :306-309.

［8］温超，吴萍，杨卫兵，等.不同类型植物甾醇对蛋鸡脂类代谢的影响［J］.中国粮油学报，2012(9) :85-89.

［9］韩军花，胡叶梅，王雷，等.我国保健食品常用植物资源中植物甾醇含量研究［J］.营养学报，2010，32(1) :82-85.

［10］陈志飞.植物甾醇影响胆固醇代谢机制的研究进展［J］.国外医学:卫生学分册，2008，35(6) :360-362.