失笑散颗粒对异丙肾上腺素所致大鼠心肌损伤的保护作用观察及机制初探

靳刚强徐 敏李福雷尹 航于永军

（1 河北省沧州市人民医院，河北 沧州 061000；2 河北省沧州医学高等专科学校，河北 沧州 061000）

失笑散颗粒对异丙肾上腺素所致大鼠心肌损伤的保护作用观察及机制初探

靳刚强1徐 敏1李福雷1尹 航1于永军2

（1 河北省沧州市人民医院，河北 沧州 061000；2 河北省沧州医学高等专科学校，河北 沧州 061000）

目的探究失笑散颗粒对异丙肾上腺素所致大鼠心肌损伤的保护作用及其作用机制。方法将心电图正常的Wistar健康大鼠随机均分为6组，空白对照组、模型对照组、小剂量组，中剂量组，高剂量组，阳性对照组（复方丹参滴丸），连续灌胃给药7d，从第3日起除正常对照组外，其余各组均于给药后1h皮下注射异丙肾上腺素5mg/(kg·d)，连续5d，时间间隔为24h，正常对照组给予等量生理盐水皮下注射，用心电图机记录不同时间段的Ⅱ导联心电图J值的变化。并测定末次注射iso 2h后CRP、TNT、BNP、SOD及MDA水平。结果与空白对照组相比，模型对照组中大鼠的J 值下降值、CRP、TNT、BNP、SOD及MDA水平明显提高（P＜0.05）；与模型对照组相比，失笑散颗粒小剂量组能使心肌损伤大鼠的心电图J值下降值、CRP、TNT、BNP、SOD及MDA水平降低，P＞0.05，无统计学意义，而中剂量组及高剂量组、阳性对照组均能使心肌损伤大鼠的心电图J值下降值、CRP、TNT、BNP、SOD及MDA水平明显降低(P＜0.05)。结论失笑散颗粒对异丙肾上腺素所致大鼠心肌缺血保护作用显著，增强SOD活力系数，清除自由基，从而减轻心肌损伤。

心肌缺血；异丙肾上腺素；失笑散；保护作用；作用机制

冠状动脉性心脏病简称冠心病，又称缺血性心脏病。它指由于脂质代谢不正常，血液中的脂质沉着在原本光滑的动脉内膜上，在动脉内膜一些类似粥样的脂类物质堆积而成白色斑块，称为动脉粥样硬化病变。这些斑块渐渐增多造成动脉腔狭窄，使血流受阻，导致心脏缺血，产生心绞痛[1,2]。失笑散出自于宋·《太平惠民和剂局方》，由蒲黄和五灵脂等份经过一系列颗粒制作工艺而制成颗粒，具有活血祛瘀，散结止痛的功效。经过大量的临床研究，失笑散能有效地改善心电图异常，抗动脉粥样硬化，抗心肌缺血，改善心肌供血能力[3]。本文通过观察失失笑散颗粒对异丙肾上腺素所致大鼠心肌损伤的保护作用，探究其作用机制，现将工作总结如下。

1 材料与方法

1.1 动物

雄性Wistar健康大鼠，体质量180～220g，由河北医科大学实验动物中心提供，动物合格证号：DK0608-0062。

1.2 仪器、试剂与药物

XDH-B型心电图机（上海医用电子仪器厂）；Humalyzer 2000型半自动生化分析仪（美国）；异丙肾上腺素（iso）为上海禾丰制药有限公司生产，批号20120706；复方丹参滴丸为天津天士力制药股份有限公司产品，批号20120608；失笑散颗粒（蒲黄，五灵脂等份自制）。

1.3 分组及给药处理

表1 六组大鼠血清CRP、TNT、BNP、SOD及MDA含量变化（χ—±s）

将心电图正常的大鼠随机分为6组，每组10只，共60只。空白对照组给等容量生理盐水，模型对照组给等容量生理盐水，小剂量组8g/kg，中剂量组12g/kg，高剂量组16g/kg，阳性对照组72.9mg/kg复方丹参滴丸，各组均连续灌胃给药7d。从第3日起除正常对照组外，其余各组均于给药后1h皮下注射异丙肾上腺素5mg/(kg·d)，连续5d，时间间隔为24h，正常对照组给予等量生理盐水皮下注射，记录给药前及第5次注射ISO后心电图，观察J值变化，J值下降值=注射iso后J值-注射iso前J值。末次注射后2h，处死动物，取血，制备血清，测定AST（谷草转氨酶）、CK-MB（磷酸肌酸激酶同工酶）、CK（磷酸肌酸激酶） 及LDH（乳酸脱氢酶）含量采用试剂盒（Beacon Analytical Systems，Inc.）。

1.4 统计学方法

采用SPSS17.0统计软件统计处理及分析，计量资料以（χ—±s）表示，采用t检验，计数资料采用χ2检验，P＜0.05差异显著，认为具有统计学意义。

2 结 果

2.1 不同组J值下降值对比

如图1所示，与空白对照组相比，模型对照组大鼠的J值明显提高（P＜0.05)；与模型对照组相比，失笑散颗粒小剂量组能使心肌损伤大鼠的心电图J值下降值降低，P＞0.05，差异不明显，无统计学意义，而中剂量组及高剂量组、阳性对照组均能使心肌损伤大鼠的心电图J值下降值明显降低(P＜0.05)。

图1 六组大鼠心肌缺血心电图中不同时间J值下降值趋势图

2.2 血清CRP、TNT、BNP、SOD及MDA含量

与空白对照组相比，模型对照组大鼠的血清CRP、TNT、BNP、SOD及MDA水平明显提高(P＜0.05)；与模型对照组相比，失笑散颗粒小剂量组大鼠血清 CRP、TNT、BNP、SOD及MDA水平降低了，P＞0.05，差异不显著，无统计学意义，而中剂量组及高剂量组、阳性对照组大鼠血清CRP、TNT、BNP、SOD及MDA水平明显减轻(P＜0.05)；失笑散颗粒中剂量组及高剂量组与阳性对照组比较，CRP、TNT、BNP、SOD及MDA水平降低值相当，效果相当。见表1。

3 讨 论

异丙肾上腺素（ISO）为β受体激动剂，持续给予大鼠ISO会引起细胞内Ca2+浓度的升高及自由基产生，增加心肌耗氧量，导致大鼠心肌缺血性损伤，而这种动物模型与人体心肌损伤相似程度较大，故本文通过异丙肾上腺素造模，评价抗心肌缺血情况[4]。当出现心肌缺血损伤时，由于无氧代谢受到障碍，所致能力供应不足，有害物质在体内堆积，加之细胞内钙离子超载等因素造成心功能下降，心肌收缩力减弱，细胞膜通透性增强，使细胞内酶大量释放入血液。心电图J点变化值是个评估心肌缺血性损伤的重要指标，微小的变化就能反映心肌损伤的情况。

目前，大量研究表明心肌缺血性损伤与自由基的大量产生、细胞内钙离子的超载、心肌能量代谢紊乱、内分泌细胞因子增多等有直接的关系。自由基数量的增多，造成心肌细胞组织脂质体数量的大增，改变了心肌细胞膜的结构，导致膜的性质发生异常，对各种物质的通透性增大，大量因子释放到血清中。超氧化物歧化酶(SOD)是一种源于生命体的活性物质，能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质。SOD是生物体内清除自由基的首要物质，如果SOD水平下降到一定程度时意味着衰老与死亡的直观指标。它可对抗与阻断因氧自由基对细胞造成的损害，并及时修复受损细胞，复原因自由基造成的对细胞伤害。自由基作用于脂质发生过氧化反应，氧化终产物为丙二醛（MDA），会引起蛋白质、核酸等生命大分子的交联聚合，且具有细胞毒性。机体通过酶系统与非酶系统产生氧自由基，后者能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸，引发脂质过氧化作用，并因此形成脂质过氧化物。CRP是一种环状五聚体蛋白具有显著的耐热及抗蛋白酶降解的能力，能与补体系统的相互作用使其表现出很多生物活性，包括宿主对感染的防御反应、对炎性反应的吞噬作用和调节作用等。与受损细胞、凋亡细胞及核抗原的结合，使其在自身免疫病方面也起着重要作用。B型尿钠肽又称脑尿钠肽（BNP），是由心肌细胞合成的具有生物学活性的天然激素，主要在心室表达，同时也存在于脑组织中。当左心室功能不全时，由于心肌扩张而快速合成释放入血，有助于调节心脏功能。本文研究表明，与模型对照组相比，失笑散颗粒小剂量组能使心肌损伤大鼠的心电图J值下降值降低，P＞0.05，而中剂量组及高剂量组、阳性对照组均能使心肌损伤大鼠的心电图J值下降值明显明显降低，这提示，失笑散颗粒剂量组对心电图ST值变化有明显影响，具有改善心肌缺血的作用，P＜0.05。与空白对照组比较，模型对照组的大鼠血清生化标志物指标含量均有差异，而与模型组比较，失笑散颗粒剂量组均能明显降低这些指标的含量，说明失笑散颗粒剂量组对异丙肾上腺素所致的心肌缺血后血清生化标志物含量变化有所控制，增强细胞膜的稳定性，对心肌细胞起到保护作用，减少心肌损伤标志物的渗出，而且控制程度与一定的剂量有直接的关联。

综上所述，失笑散颗粒对异丙肾上腺素所致大鼠心肌缺血有明显的保护作用，对自由基有较强的清除作用，减少自由基对心肌细胞膜的脂质过氧化反应，能有效地减轻心肌损伤，值得进一步研究与应用。

[1] 祝光礼,周凡,陈铁龙.黄芪失笑散抗心肌缺血的实验研究[J].中华中医药学刊,2007,25(11) :2232-2234.

[2] 陈莹,周波,路秀云,等.全真一气汤合并失笑散治疗冠心病稳定型心绞痛的临床观察[J].中医药学报,2012,40(1): 108-110.

[3] 潘志伟,王秋娟,杨涓,等.淫羊藿苷对异丙肾上腺素致大鼠急性心肌缺血的影响[J].中国药理学通报,2007,23(5):622-625.

[4] 任雪梅,曹志然.加味失笑散治疗冠心病心绞痛的临床应用及作用机理研究进展[J].世界中西医结合杂志,2010,5(12): 1084-1085.

R-3

B

1671-8194（2013）17-0087-02