东营地区哮喘患儿血清过敏原特异性IgE和总IgE检测分析

彭 瑜，李泽焰，周明琪

(1胜利油田滨海医院，山东东营257237;2胜利油田中心医院)

支气管哮喘是儿童常见的呼吸道疾病，过敏原是儿童哮喘发作的常见触发因素［1］。早期检测过敏原并采取相应防护措施，避免哮喘儿童与之接触或进行针对性脱敏治疗，是哮喘病防治的最有效方法。为探讨东营地区儿童支气管哮喘与常见过敏原的关系，本文对126例哮喘患儿进行了血清过敏原特异性IgE(sIgE)和总IgE(TIgE)测定。现报告如下。

1 资料与方法

1．1 临床资料 选择2011年12月～2012年12月胜利油田滨海医院、胜利油田中心医院确诊的支气管哮喘患儿126例，男67例、女59例，均符合儿童哮喘诊断标准［2］。根据年龄将患儿分为婴幼儿组(＜3岁)和儿童组(3～14岁)各63例。婴幼儿哮喘表现为喘息发作≥3次，发作时双肺闻及呼气相哮鸣音、呼气相延长，且无其他引起喘息的疾病。儿童哮喘表现为喘息反复发作，发作时双肺闻及呼气相哮鸣音、呼气相延长，支气管舒张剂有明显疗效，无其他引起喘息、胸闷和咳嗽的疾病。

1．2 检测方法 采集受试者静脉血2．5 mL，分离血清后检测或-20℃保存备用。血清sIgE和TIgE由Allergy Screen过敏原检测系统完成，试剂由MEDIWISSAnalytic GmbH公司提供，采用免疫印迹方法，血清sIgE＞0．35 IU/mL为检测结果阳性。检测的sIgE过敏原包括吸入性过敏原如户尘螨、屋尘、桑树、猫毛皮屑、狗毛皮屑、蟑螂、笕、点青/分枝/烟曲/交链霉、矮豚草/篙/葎草/藜、柏/榆/柳/桦/枫/胡桃/梧桐/杨以及食入性过敏原如鸡蛋白、牛奶、虾、牛肉、贝、蟹、芒果、腰果、菠萝共19项。检测步骤:①将试剂盒恢复到室温(20～22℃);②用蒸馏水稀释洗脱液(洗脱液∶蒸馏水为1∶25);③用清洗液湿润硝酸纤维素膜，在检测板上加入血清标本，在混匀器上室温孵育45 min;④冲洗，手持反应槽上下翻转让清洗液充分流过;⑤加入250μL标记生物素的抗人IgE抗体，在混匀器上室温孵育45 min;⑥冲洗，加入250μL链霉亲和素标记物，在混匀器上室温孵育20 min;⑦冲洗，加入250μL底物酶作用底物，在混匀器上室温孵育20 min;⑧流水冲洗，终止底物酶反应;⑨完全干燥后，将带检测条的反应槽插入专用阅读仪测量，使用数字成像系统和配套软件进行分析。先用专用CCD相机进行摄影读取结果，再用专用软件分析相应的过敏原条带颜色，计算得出每一条带的面积积分，再与软件中已存储的标准曲线作对比，以此得出血清sIgE、TIgE浓度。

1．3 统计学方法 采用SPSS11．5统计软件，率和构成比以百分比表示，组间比较采用χ2检验。P≤0．05为差异有统计学意义。

2 结果

2．1 两组各类过敏原致敏情况 126例哮喘患儿中，84例呈 1种或多种 sIgE阳性，阳性率为66．67%;其中婴幼儿组sIgE阳性36例(57．14%)，儿童组sIgE阳性48例(76．19%)，两组sIgE阳性率比较P＜0．05。19种过敏原中，户尘螨阳性率最高，其次为猫毛皮屑、狗毛皮屑及矮豚草/篙/葎草/藜，再次为牛奶、鸡蛋白和霉菌。见表1。

表1 两组各类过敏原阳性致敏结果(n=63)

2．2 婴幼儿组与儿童组sIgE阳性患儿吸入性和食入性过敏原构成情况 两组sIgE阳性患儿吸入性、食入性过敏原构成比较，P＜0．05。见表2。

表2 两组sIgE阳性患儿吸入性和食入性过敏原构成［例(%)］

2．3 sIgE水平与TIgE的相关性分析 见表3。sIgE 水平与 TIgE 存在相关性(χ2=13．536，P ＜0．01)

表3 TIgE水平与sIgE阳性的关系［例(%)］

3 讨论

近年来，儿童支气管哮喘发病率逐年上升，其中80%为过敏性哮喘。支气管哮喘患儿气道存在对各种触发因素的高反应性，避免接触相应过敏原或特异性脱敏治疗对哮喘患儿的预防和治疗极为重要。

多数文献认为，Immuno CAP是血清学特异性IgE检测的“金标准”。黎明等［3］在小儿Ⅰ型变态反应研究中采用Allergy Screen和Immuno CAP两个系统检测 sIgE，两者符合率达90%。本研究采用Allergy Screen过敏原检测系统对126例哮喘患儿进行血清 sIgE和TIgE检测。结果显示，东营地区50%以上的儿童哮喘与接触过敏原有关，与文献报道基本一致［4］。其中婴幼儿组sIgE阳性检出率明显低于儿童组，其原因与病毒感染是婴幼儿时期哮喘最主要的触发因子有关。过敏原种类分布分析显示，婴幼儿以食物过敏原为主，此可能与婴幼儿胃肠功能发育不完善、免疫功能不健全、对某些消化酶的合成和分泌不够完善、食物性过敏原经消化后仍能产生致敏作用有关。随着年龄增长，免疫功能不断完善，活动范围扩大，接触各种过敏原的机会增加，致使儿童吸入性过敏原sIgE检出率较高。

研究显示，我国哮喘患儿螨虫皮试阳性率为69．7%，正常儿童为12．1%。本研究显示，东营地区小儿哮喘过敏原中尘螨阳性率为31．21%，较全国报道低，可能与该地区天气多风、空气干燥不利于尘螨生长繁殖有关。但本研究中尘螨仍是所测19项过敏原中阳性率最高者，说明尘螨仍为本地区最重要的过敏原。尘螨包括屋尘螨和户尘螨，常居生于床垫、毛毯、地毯、沙发类家具中，其螨虫体和螨的排泄物是许多过敏原的来源。阴暗潮湿环境最适宜螨虫生长、繁殖［5］，故对于螨虫过敏者应通风，保持室内干燥，避免使用毛毯等物品。

正常人血清TIgE＜100 IU/mL、＞200 IU/mL一般表明机体处于致敏状态。本研究结果表明，小儿哮喘TIgE＞200 IU/mL者与同组sIgE阳性检出率有明显相关性，提示TIgE＞200 IU/mL可作为判定过敏状态的良好指标。但在TIgE＞200 IU/mL的87例患者中仍有20例sIgE检测呈阴性。其原因可能是患儿存在某种sIgE，而这些sIgE未包含在本研究所检测的19项sIgE中。

本研究结果提示，对儿童支气管哮喘应针对不同年龄分期、不同过敏原组成应用不同的预防方法。婴幼儿期应多寻找食物性过敏原，注意食物和日常用品中过敏物质的存在，去除食物过敏原，进行饮食指导;较大儿童应注意环境卫生、改善居住环境，注意减少对尘螨的暴露。

［1］余胜华．吸入性糖皮质激素治疗儿童哮喘的临床应用［J］．实用儿科临床杂志，2004，19(12):1081-1020．

［2］薛辛东．儿科学［M］．北京:人民卫生出版社，2006:294．

［3］黎明，沈铮，沈霞．Allergy Screen系统在儿童Ⅰ型变态反应中的应用［J］．上海第二医科大学学报，2004，24(9):785-787．

［4］Soderstrom L，Kober A，Ahlstedt S，et al．A further evaluation of the clinical use of specific IgE antibody testing in allergic diseases［J］．Allergy，2003，58(4):921-928．

［5］周晓庆，金永堂，何兴周．环境因素致皮肤过敏与支气管哮喘发病之间关系的分析［J］．卫生研究，2004，33(2):236-238．