酸浆对高脂血症大鼠的抗氧化功能研究

王冬梅，安 英，徐 斌 (吉林医药学院，吉林 吉林 132013)

酸浆为茄科酸浆属多年生草本，酸浆果具有清热利尿之药效，外敷可消炎。另外，其囊状宿萼中含植物甾醇，味淡而微苦，泡水饮用有清咽、化痰、利尿的作用。在民间，人们将酸浆宿萼或叶晒干当茶饮，可清热去火。酸浆籽中含亚油酸、亚麻酸等人体所需的必需脂肪酸，对于调节血脂有非常重要的帮助。近年来国内外对酸浆属植物的研究较多，已报道从酸浆中分离得到一系列酸浆苦素类化合物，酸浆苦素类成分是目前发现我国仅有的醉茄内酯药物资源，该类化合物的抗肿瘤活性引起了学者的高度重视和研究［1］。现代科学分析，酸浆中含有18种氨基酸，钙、镁、硼、锌、硒、锗等21种微量元素和矿物质，还有8种维生素［2］，酸浆果实和宿萼中含丰富的黄酮类物质。黄酮类化合物具有显著的抗氧化性，并且它还是一种有效的自由基清除剂，具有抗肿瘤、抗糖尿病、抗菌及抗病毒等方面的功能。但对于这方面的功效缺乏深入的研究，本实验通过酸浆提取物对高血脂大鼠血清丙二醛(MDA)含量、血清超氧化物歧化酶(SOD)活性测定，与模型组进行比较来研究此类提取物对高血脂大鼠抗氧化能力的影响。

1 资料与方法

1.1 实验材料

酸浆鲜果购于药材市场，由吉林医药学院雷钧涛教授鉴定为正品并制备成提取液;高脂饲料:基础饲料94%(玉米粉52%，大豆粉23%，麦麸11%，面粉9%，钙盐2%，混合维生素，胆固醇1%，猪油5%)。

漩涡混合器(XW-891永嘉华联科学仪器厂);分析天平(FA1104N上海精密科学仪器有限公司);离心机(TD-5A湖南凯达科学仪器有限公司);HHS型电热恒温水浴锅(上海博讯实业有限公司医疗设备厂);可见分光光度计(722上海菁华科技仪器有限公司);架盘药物天平(HC-TP11-5上海精密科学仪器有限公司);自动平衡微型离心机(LDZ4-0.8北京医用离心机厂制造)。

SOD、MDA、羟自由基(·OH)试剂盒(南京建成生物工程研究所)。

1.2 实验动物处理

Wistar大鼠50只，雌雄各半，体重150～200 g(购于吉林大学白求恩医学部动物饲养中心)，随机分为5组，每组10只，即空白组(基础饲料)，高脂组(高脂饲料)，酸浆提取液高、中、低剂量组，空白组喂养基础饲料，其余各组均喂养高脂饲料，连续喂养30 d，自由饮水，建立高脂模型。之后酸浆提取液低、中、高三组分别按大鼠体重3 g/70 kg、15 g/70 kg、75 g/70 kg给予酸浆提取液灌胃，空白组和高脂组灌蒸馏水，各组均灌胃1.5 mL连续30 d，各组均喂养基础饲料，实验结束时末次给药后24 h禁食禁水。

1.3 血样的采集及处理

实验结束时用水合氯醛(3 mL/kg)麻醉大鼠后，从腹主动脉取血分离血清(3 000 r/min离心10 min)，按照试剂盒说明测定SOD和MDA含量。

1.4 酸浆体外清除·OH的测定

将酸浆提取液及VC配制成浓度为1～9 mg/mL。取10 mL具塞试管，按顺序加入6 mmol/L FeSO42 mL，6 mmol/L水杨酸2 mL，酸浆提取液浓度分别为8.57 mg/mL、42.85 mg/mL、214.25 mg/mL溶液各2 mL，最后加6 mmol/L H2O22 mL启动反应，37℃下反应1 h。在510 nm下测量各浓度的吸光度，空白对照组以蒸馏水代替样品。以6 mmol/L FeSO42 mL，6 mmol/L水杨酸2 mL，三种浓度的酸浆提取液2 mL和2 mL蒸馏水混合作为样品的本底吸收。将测定值代入下式计算清除率。

Ao:空白对照液的吸光度;Ax:加入酸浆提取液后的吸光度;Axo:不加显色剂H2O2样品溶液本底的吸光度。

1.5 统计方法

采用Spss17.0软件包，对数据进行显著性检验。

2 结果

2.1 SOD活性和MDA含量的测定

酸浆提取液对高血脂大鼠血清SOD活性和MDA含量的影响见表1。由表中可看出酸浆提取液中、高剂量组大鼠血清SOD活性与高脂组大鼠相比，显著增加(P＜0.05)，酸浆提取液低、中、高剂量组大鼠血清MDA含量与高脂组大鼠相比，显著下降(P＜0.05)。

表1 酸浆提取液对大鼠SOD和MDA的影响±S，n=10)

表1 酸浆提取液对大鼠SOD和MDA的影响±S，n=10)

与高脂组相比较，*:P＜0.05，＊＊:P＜0.01

组别 SOD活力(U/mL)MDA含量(μmol/L)空白组 34.4±4.2＊＊ 9.5±4.3＊＊高脂组 30.6±5.0 52.4±8.2低剂量组 38.3±4.1* 27.2±3.7中剂量组 47.8±6.1＊＊ 21.1±3.0＊＊高剂量组 62.8±7.6＊＊ 11.6±2.6＊＊

2.2 体外·OH清除率的测定

酸浆提取液对·OH的体外清除作用结果为:8.57 mg/mL剂量组清除率50.69%，42.85 mg/mL剂量组清除率62.81%，214.25 mg/mL剂量组清除率87.16%，可见酸浆提取液对·OH的清除率随酸浆浓度升高而增加，与空白对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。

3 讨论

机体过量的自由基可以引发生物膜不饱和脂肪酸发生脂质过氧化，产生MDA和过氧化脂质，它们的含量变化可定量反映生物膜如线粒体膜、细胞膜等的受损程度。膜的完整性受损，从而使膜的通透性增加，引起膜内外物质的外泄和内流，造成如红细胞溶血和线粒体膨胀等现象的发生［3］。破坏正常的氧化和抗氧化平衡，造成机体的氧化应激［4］，进而损坏各器官和酶等系统，引起衰老、肿瘤、动脉粥样硬化等疾病。越来越多的研究显示抗氧化是预防衰老的重要步骤，因为自由基或氧化剂会将稀薄和组织分解，影响代谢功能，并会引起不同的健康问题。如果能够消除过多的氧化自由基，对于许多自由基引起的及老化相关疾病都能够预防。补充抗氧化物质有利于运动机体减少自由基的产生或加速其清除，以对抗自由基的副作用，因而对一般人或者动物的健康都有益，可能延缓运动性疲劳发生和加快体能恢复。

SOD是生物体产生的一种天然抗氧化酶，它通过歧化反应清除体内生成的氧自由基，阻断脂质过氧化连锁反应。而MDA是脂质过氧化物的分解产物，其含量反映了脂质过氧化反应程度的强弱和机体细胞受自由基攻击的程度。因此测定高血脂大鼠血清中的SOD活性和MDA的含量，可以从两个方面提示机体的氧化损伤情况。

·OH是目前所知活性氧中对生物体危害最大的一种自由基，对细胞内DNA的破坏作用最大。活性氧所导致的DNA损伤在细胞里的积累被认为是机体老化的主要原因［4］。因此研究·OH的清除作用具有重要的应用价值。

本研究显示，酸浆提取液无论是高剂量组还是低剂量组都能增强高血脂大鼠血清SOD活性，都能使血清MDA含量下降。其中高剂量组大鼠血清SOD活性明显强于高脂组大鼠，高剂量组大鼠血清MDA含量明显低于高脂组大鼠。酸浆体外抗氧化说明酸浆提取液对·OH有很好的清除作用，研究表明酸浆提取液对高血脂大鼠具有抗氧化作用，在一定范围内，酸浆剂量越高，抗氧化作用效果越明显。酸浆提取液具有抗氧化作用，但是具体是什么物质起到抗氧化作用还有待研究。

近年来，随着物质生活的逐步提高，人们对高质量生活的追求越来越强烈。保健养生、合理膳食、营养搭配、食药两用的研究逐渐崭露头角，成为医学领域中的新宠。同时随着近年来人们生活方式和饮食结构的改变，饮食中脂肪摄入的增多及运动量的减少，使得高脂血症的发病率在不断增加。酸浆的多种营养成分和生物活性使其成为无污染、风味独特、营养丰富的天然食品［5］，并以其安全有效、副作用小可为治疗高脂血症开辟新的领域，研究酸浆的抗氧化作用，必将产生一定的社会效益和经济效益。

［1］ 陈 荣，梁敬钰，杨 洋，等.酸浆化学成分及酸浆苦素G的结构订正［J］.中国天然药物，2007，5(3):187-189.

［2］ 王家东，王晓闻.酸浆营养成分的分析［J］.山西农业大学学报:自然科学版，2005，25(4):376-379.

［3］ 杨建雄，朱淑云，李发荣.连翘叶茶的体外抗氧化活性［J］.食品科学，2002，23(12):120-122.

［4］ 高晓黎，季兴梅.葡聚糖凝胶柱色谱法测定脂质体包封率的条件筛选［J］.中国药学杂志，2003，38(7):515-517.

［5］ 张 娜，别智敏，秦文静，等.酸浆的化学成分及生理功效［J］.吉林医药学院学报，2008，29(2):104-106.