野生於术与栽培白术化学成分比较研究

朱 樵 李 亚 章力勤 浙江省临安市人民医院 临安311300

宋剑锋 浙江省衢州市食品药品检验所

·药学园地·

野生於术与栽培白术化学成分比较研究

朱 樵 李 亚 章力勤 浙江省临安市人民医院 临安311300

宋剑锋 浙江省衢州市食品药品检验所

野生於术 栽培白术 化学成分

白术Atractylodes macrocephala Koidz，又称为天蓟、山姜、乞力伽、山精、山连。具有健脾益气、燥湿利水、止汗、安胎功效。用于脾虚食少，腹胀泄泻，痰饮眩悸，水肿，自汗，胎动不安。主产区主要分布在浙江、安徽、湖南、江西等地。其中产于浙江临安的白术由于品质独特，称之为於术，有南术北参的称谓[1-2]。於术是浙江临安的道地药材，关于野生於术与栽培白术之间成分的比较研究较少。笔者采用HPLC法对野生於术和栽培白术的成分进行比较研究，发现一种野生於术中的特异性成分。利用聚酰胺柱色谱、硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱和制备HPLC等分离手段和经详细的波谱学鉴定特异性成分为香草醛，为於术道地药材的特性研究打下物质基础。

1 实验材料

1.1药 材 野生於术采自浙江临安天目山，种植白术购自浙江磐安，经衢州市药检所宋剑锋副主任中药师鉴定为白术Atractylodes macrocephala Koidz的根茎。野生於术：取原药材，除去杂质，阴干，润软后，切段，干燥备用。栽培白术：取原药材润软后，切段，干燥备用。

1.2仪 器 LC-2010A型高效液相色谱仪，包括：UV检测器、CLASS-VP工作站（日本岛津公司）；INOVA-500核磁共振仪，TMS为内标；薄层色谱硅胶GF254和柱色谱用硅胶（100-200目，160-200目，200-300目）均为青岛海洋化工厂产品；聚酰胺（60-90目）为临江化工有限公司产品；葡聚糖凝胶Sephadex LH-20为 Pharmacia公司产品；Agilent 1100和Shimadzu LC-6AD高效液相色谱仪（YMC公司Pack ODS-A C18制备柱，20×250mm，10μm）；凝胶树脂Toyopearl HW-40 C（50-100μm）为Tosoh公司产品。

2 方法及结果

2.1色谱条件 色谱柱：SinoChrom ODS-BP柱（4.6mm×150mm，5μm）；流动相：乙腈-0.2%磷酸水溶液，梯度洗脱（表1）；检测波长：230nm；流速：1.0mL/ min；柱温：30℃。

2.2样品制备 野生於术和栽培白术研细，取约0.05g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇100mL，称定重量，超声处理（功率250W，频率50kHz）30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，微孔滤膜（0.45μm）滤过，取续滤液，即得。在210nm检测波长条件下，实验结果显示栽培白术和野生於术主要成分类似，见图1，其中compound A明显是野生於术区别于栽培白术的特异性成分，见图2。

图1 栽培白术成分色谱图

图2 野生於术成分色谱图

2.3特异性成分分离 野生於术200g，粉碎后用70%乙醇回流提取3次，分别提取2、1.5、1h，①减压浓缩至无醇味，加水稀释，用乙酸乙酯萃取3次，浓缩得到乙酸乙酯部分浸膏。乙酸乙酯部分通过聚酰胺柱，分别用水、30%乙醇、60%乙醇、95%乙醇洗脱。其中水洗脱部分经硅胶柱色谱粗分为1～4四个部分，第3部分经硅胶柱色谱，得到14流分，其中流分5经Toyopearl HW-40 C柱色谱、制备液相色谱纯化得到含有compound A的粗品，再经Sephadex LH-20柱色谱、制备液相色谱纯化得到化合物compound A（3mg），见图3。

2.4Compound A的结构鉴定 分离得到的特异性成分compound A经过详细的一维NMR实验分析，对比已有化合物数据，鉴定该成分的结构为香草醛（Vanillin;4-Hydroxy-3-methoxybenzaldehyde）。化合物A白色粉末。1H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：9.807（s，OH），7.41（1H，d，J=8.0Hz，H-2），7.03（1H，d，J= 8.0Hz，H-3），6.46（1H，s，H-6），3.94（3H，s，OCH3）。13C-NMR（CDCl3，125MHz）δ：191.3（CH0），152.0（C-3），147.4（C-4），130.0（C-1），127.8（C-2），14.6（C-3），109.0（C-6），56.3（OCH3）。根据文献[3]确定化合物A为香草醛，见图4。

图3 Compound A的1 H NMR图谱

图4 Compound A的13C NMR图谱

3 讨 论

培育优质的品种是最基本、最可靠、最经济有效的中药材可持续利用手段，是药用植物品质（产量及药用成分）的优良性、保证中药生产和中成药疗效的首要环节。通过该研究说明地道药材於术与栽培白术有化学成分的差异。於术为野生品种，没有经过系统的人工选择，在生产上还没有真正意义上的栽培品种。本实验结果为於术选择育种提供了参考，同时为於术的道地特异性研究打下基础。

［1］孟建荣，吴志荣.地道药材於术特异性考［J］.中药材，1999，22（2）：98-100.

［2］马全民，陈兆年.白术、於术中挥发油化学成分的研究［J］.现代应用药学，1996，13（3）：11-13.

［3］贾红梅，李宁，李铣.红车轴草的化学成分研究［J］.中南药学，2008，6（5）：534-536.

2013-03-23

浙江省临安市医疗科研及重点专科专病项目（No.20110833B55）

通迅作者：宋剑锋，Tel:0570-8587269，E-mail:sjfqz@163.com