野生於术与栽培白术化学成分比较研究

2013-06-05 15:34章力勤浙江省临安市人民医院临安311300
浙江中西医结合杂志 2013年9期
关键词:临安市临安硅胶

朱 樵 李 亚 章力勤 浙江省临安市人民医院 临安311300

宋剑锋 浙江省衢州市食品药品检验所

·药学园地·

野生於术与栽培白术化学成分比较研究

朱 樵 李 亚 章力勤 浙江省临安市人民医院 临安311300

宋剑锋 浙江省衢州市食品药品检验所

野生於术 栽培白术 化学成分

白术Atractylodes macrocephala Koidz,又称为天蓟、山姜、乞力伽、山精、山连。具有健脾益气、燥湿利水、止汗、安胎功效。用于脾虚食少,腹胀泄泻,痰饮眩悸,水肿,自汗,胎动不安。主产区主要分布在浙江、安徽、湖南、江西等地。其中产于浙江临安的白术由于品质独特,称之为於术,有南术北参的称谓[1-2]。於术是浙江临安的道地药材,关于野生於术与栽培白术之间成分的比较研究较少。笔者采用HPLC法对野生於术和栽培白术的成分进行比较研究,发现一种野生於术中的特异性成分。利用聚酰胺柱色谱、硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱和制备HPLC等分离手段和经详细的波谱学鉴定特异性成分为香草醛,为於术道地药材的特性研究打下物质基础。

1 实验材料

1.1药 材 野生於术采自浙江临安天目山,种植白术购自浙江磐安,经衢州市药检所宋剑锋副主任中药师鉴定为白术Atractylodes macrocephala Koidz的根茎。野生於术:取原药材,除去杂质,阴干,润软后,切段,干燥备用。栽培白术:取原药材润软后,切段,干燥备用。

1.2仪 器 LC-2010A型高效液相色谱仪,包括:UV检测器、CLASS-VP工作站(日本岛津公司);INOVA-500核磁共振仪,TMS为内标;薄层色谱硅胶GF254和柱色谱用硅胶(100-200目,160-200目,200-300目)均为青岛海洋化工厂产品;聚酰胺(60-90目)为临江化工有限公司产品;葡聚糖凝胶Sephadex LH-20为 Pharmacia公司产品;Agilent 1100和Shimadzu LC-6AD高效液相色谱仪(YMC公司Pack ODS-A C18制备柱,20×250mm,10μm);凝胶树脂Toyopearl HW-40 C(50-100μm)为Tosoh公司产品。

2 方法及结果

2.1色谱条件 色谱柱:SinoChrom ODS-BP柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相:乙腈-0.2%磷酸水溶液,梯度洗脱(表1);检测波长:230nm;流速:1.0mL/ min;柱温:30℃。

2.2样品制备 野生於术和栽培白术研细,取约0.05g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇100mL,称定重量,超声处理(功率250W,频率50kHz)30min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,微孔滤膜(0.45μm)滤过,取续滤液,即得。在210nm检测波长条件下,实验结果显示栽培白术和野生於术主要成分类似,见图1,其中compound A明显是野生於术区别于栽培白术的特异性成分,见图2。

图1 栽培白术成分色谱图

图2 野生於术成分色谱图

2.3特异性成分分离 野生於术200g,粉碎后用70%乙醇回流提取3次,分别提取2、1.5、1h,①减压浓缩至无醇味,加水稀释,用乙酸乙酯萃取3次,浓缩得到乙酸乙酯部分浸膏。乙酸乙酯部分通过聚酰胺柱,分别用水、30%乙醇、60%乙醇、95%乙醇洗脱。其中水洗脱部分经硅胶柱色谱粗分为1~4四个部分,第3部分经硅胶柱色谱,得到14流分,其中流分5经Toyopearl HW-40 C柱色谱、制备液相色谱纯化得到含有compound A的粗品,再经Sephadex LH-20柱色谱、制备液相色谱纯化得到化合物compound A(3mg),见图3。

2.4Compound A的结构鉴定 分离得到的特异性成分compound A经过详细的一维NMR实验分析,对比已有化合物数据,鉴定该成分的结构为香草醛(Vanillin;4-Hydroxy-3-methoxybenzaldehyde)。化合物A白色粉末。1H-NMR(CDCl3,500 MHz)δ:9.807(s,OH),7.41(1H,d,J=8.0Hz,H-2),7.03(1H,d,J= 8.0Hz,H-3),6.46(1H,s,H-6),3.94(3H,s,OCH3)。13C-NMR(CDCl3,125MHz)δ:191.3(CH0),152.0(C-3),147.4(C-4),130.0(C-1),127.8(C-2),14.6(C-3),109.0(C-6),56.3(OCH3)。根据文献[3]确定化合物A为香草醛,见图4。

图3 Compound A的1 H NMR图谱

图4 Compound A的13C NMR图谱

3 讨 论

培育优质的品种是最基本、最可靠、最经济有效的中药材可持续利用手段,是药用植物品质(产量及药用成分)的优良性、保证中药生产和中成药疗效的首要环节。通过该研究说明地道药材於术与栽培白术有化学成分的差异。於术为野生品种,没有经过系统的人工选择,在生产上还没有真正意义上的栽培品种。本实验结果为於术选择育种提供了参考,同时为於术的道地特异性研究打下基础。

[1]孟建荣,吴志荣.地道药材於术特异性考[J].中药材,1999,22(2):98-100.

[2]马全民,陈兆年.白术、於术中挥发油化学成分的研究[J].现代应用药学,1996,13(3):11-13.

[3]贾红梅,李宁,李铣.红车轴草的化学成分研究[J].中南药学,2008,6(5):534-536.

2013-03-23

浙江省临安市医疗科研及重点专科专病项目(No.20110833B55)

通迅作者:宋剑锋,Tel:0570-8587269,E-mail:sjfqz@163.com

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