蓝唾液酸酶法快速检测细菌性阴道病的临床应用

阮丽明 周艳洁 梁立阳 丁进龙 何桂琼 梁萧

细菌性阴道病(bacterial vaginosis，BV)是由于阴道微生态环境菌群与分泌物生化性质变化所引起的一种阴道炎症，是育龄期妇女常见的疾病之一，国内感染率为15%～50%［1］。阴道加德纳菌(GV)是细菌性阴道病毒的常见病原体。在妇产科中，BV主要与输卵管炎、盆腔炎、异位妊娠、不孕症、泌尿系感染、术后感染及妇科肿瘤有关［2］。并使感染艾滋病和患宫颈癌的风险增高［3］。由于BV可以直接威胁到广大妇女的身心健康，对其准确及时的诊断就尤为重要。BV的检测方法有传统的金标准方法(Amsel法)［4］、培养法、改良胺试验法、五联干化学法、唾液酸酶法等，其中唾液酸酶法有干化学法、唾液酸酶法(Blue)等，为评价Blue法在BV诊断中的价值，本研究以Amsel法为金标准对Blue法的诊断价值进行比较，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2012年6月到12月期间在本单位门诊及体检中心1280例疑为细菌性阴道病的女性分泌物标本1280例。标本由妇科医生采集。要求对象在72 h内无性生活及阴道灌洗、局部用药史。严格按照操作技术规范以专用女性拭子收集患者阴道壁下三分之一处分泌物标本两份，置于无菌管中保存，立即送检。

1.2 方法

1.2.1 Blue法 使用由北京青元盛康生物医药科技有限公司提供的蓝唾液酸酶检测试剂盒。该试剂反应管中已含有细菌唾液酸酶专一特异的生色底物，将沾取分泌物的无菌棉拭子置于唾液酸酶反应管中旋转保温，当底物与唾液酸酶接触时，发生生物化学反应，产生唾液酸，滴显色液到反应管中以20 min内拭子呈淡黄色为阴性结果，变蓝色绿色判断为阳性结果。

1.2.2 诊断标准 Amsel法有四项诊断指标:①阴道分泌物的性状为白色匀质稀薄乳液状。②分泌物 pH＞4.5。③加10%NaOH时，阴道分泌物产生鱼腥样氨气味。④ 阴道分泌物涂片可见线索细胞，以线索细胞占上皮细胞的20%以上为阳性。符合以上标准中任何三项(最后一项是必须的)，即可确诊。

1.3 统计学方法 使用SPSS 17.0统计学软件进行分析处理，所有的计数资料的比较采用卡方检验，数值的比较使用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

细菌性阴道病传统的Amsel法及BV Blue法两种检测方法结果分析:在1280例女性分泌物标本中，传统的Amsel法检测出阳性274例，阳性率为21.41%，而BV Blue法检测出阳性295例，阳性率为23.05%，两种方法检测阳性率比较差异无统计学意义(χ2=1.00，P＞0.05)。根据检测结果，以Amsel法为对照，BV Blue法敏感性为93.07%，特异性为96.02%，假阳性率为3.98%，假阴性率为6.93%，阳性预测者为86.44%，阴性预测者为98.07%，说明该诊断方法良好，临床应用效率较高。结果见表1。

表1 BV Blue法和Amsel法检测BV结果

3 讨论

BV是多种细菌的复合感染，BV患者阴道内乳酸杆菌的数目减少或缺失，其他微生物数量增加，乳酸杆菌和优势被加德纳菌及混合性厌氧菌所替代，因此BV的发病是各种因素引起阴道微生态失衡所致。1983年Amsel等提出的Amsel法是目前诊断BV公认的金标准，此法诊断结果准确，但易受与BV感染无关的其他因素或人为主观因素等诸多影响。首先，pH＞4.5对诊断的敏感性很高但缺乏特异性。阴道分泌物在不同部位的pH值有差异，如宫颈分泌物pH较高，此外阴道灌洗、用药等会影响pH值［5］。另外，当感染滴虫时，滴虫可阻碍乳酸杆菌的酵解作用，使乳酸生成减少，从而导致阴道内的pH值转变为中性或碱性，并伴有鱼腥样气味，从而误导临床判断［6］，因此胺试验敏感性较低。线索细胞可作为诊断BV的主要检测指标，线索细胞百分率要达到20%以上才具有诊断价值，受一定主观因素的影响。

唾液酸酶是引起BV的加德纳菌分泌的一种特异性胞外酶，正常女性阴道中由于不存在能分泌该酶的致病菌，在唾液酸酶法检测时不显色。BV时，此酶可通过致病菌排泄至阴道分泌物中，与含有细菌唾液酸酶专一特异的生色底物反应，生成蓝色反应产物［7］。BV Blue法敏感性为93.07%，特异性为96.02%，假阳性率为3.98%，假阴性率为6.93%，阳性预测者为86.44%，阴性预测者为98.07%。经过多方面的评价BV Blue法操作简便快速，技术易于掌握，无需特殊的仪器设备，敏感性和特异性较高，是一种较好的辅助诊断方法，值得临床推广。

［1］马玉楠.细菌性阴道病及其诊断.中华医学检验杂志，2000，23(5):303-304.

［2］宁静，于莉，南志敏.BV蓝-细菌性阴道炎快速检测法的临床应用.第三军医大学报，2005，27(10):1054.

［3］袁俊萍，陈卫斌，白明海.细菌性阴道病的研究进展.国际检验医学杂志，2008，29(3):263.

［4］Amsel R，Totten PA，Splegel CA，et al.Non specific vaginitis:diagnosticcnite and mibrobial and epide miologis.AmJ med-patri，1983，74(3):14-22.

［5］张月秋，王扬.细菌性阴道病的实验室诊断200例分析.黑龙江医药科学，2000，23(1):66.

［6］杨冬梓.阴道乳酸杆菌在细菌性阴道病诊断中的意义.中华妇产科杂志，1997，32(2):180.

［7］杨晓英.唾液酸酶法在细菌性阴道病诊断中的应用.国际检验医学杂志，2009，30(11):1128-1129.