川芎嗪联合顺铂对小细胞肺癌细胞的影响分析

廖建宁

【摘 要】目的：进一步研究顺铂、川穹嗪对于小细胞肺癌细胞的治疗作用以及影响分析。方法：在含小牛血清10%的培养液RPMI1640，进行细胞株NCI-H446的培养。结果：相比于对照组，顺铂组、川穹嗪组、顺铂川穹嗪组的P16表达水平升高，顺铂川穹嗪组的P16表达水平又高于顺铂组、川穹嗪组。顺铂组、川穹嗪组、顺铂川穹嗪组的Cyclin D1表达水平下降。顺铂川穹嗪组的Cyclin D1表达水平又高于顺铂组、川穹嗪组。结论：顺铂、川穹嗪都可以对NCL-H446细胞增殖起到抑制作用，两种药物的联合使用效果更加明显。与此同时，还可以降低小细胞肺癌的Cyclin D1水平，提高P16表达水平。

【关键词】川芎嗪；顺铂；小细胞肺癌细胞

小细胞肺癌比较容易出现血行和淋巴转移，这是研究和治疗的一个难点，也是重点问题。通过大量的研究资料证明，川穹嗪对于肺癌细胞有抑制生长的作用，顺铂则是一种比较常用的“化疗”药物，对于小细胞肺癌的治疗有着一定的疗效和作用，但是，在后期则比较容易出现抗药性。还有的研究表明，川穹嗪与化疗药物一起使用，可以有效地提高对于部分恶性肿瘤的疗效[ 1 ]。为了进一步研究顺铂联合川穹嗪对于小细胞肺癌的治疗和作用，笔者进行了详细研究。

1 材料与方法

1.1 主要试剂及细胞株

人小细胞肺癌NCI-H446细胞株，顺铂、川穹嗪注射液、小牛血清、培养液RPMI1640， Cyclin D1蛋白。

1.2 方法

在含小牛血清10%的培养液RPMI1640，进行细胞株NCI-H446的培养。浆细胞进行胰酶消化，成为单细胞的悬液，将细胞密度设成1×105/ml，分成空白对照组（常规培养），顺铂组（加入顺铂培养液2ug/ml），川穹嗪组（加入川穹嗪培养液100ug/ml）和顺铂联合川穹嗪组（加入顺铂培养液2ug/ml+加入川穹嗪培养液100ug/ml），进行培养。在一定的时间废培养液、终止培养。每孔加入10ulMTT，培养四小时，去掉上清，在加入100ulDMSO震荡10分钟，然后检测OD值。

2结果

细胞集落形成率分析：顺铂组是15.7%±3.6%，川穹嗪组是17.8%±3.8%，顺铂联合川穹嗪组是11.3%±2.8%，对照组是23.9±4.1，相比较P小于0.05. 顺铂联合川穹嗪组与顺铂组、川穹嗪组相比较，P小于0.05.

3 讨论

对于小细胞肺癌患者主要是以化疗和放疗为主，此病患者的存活率仅为5%。最主要的原因就是：大部分患者在治疗过程中会产生耐药性[2]。随着医学的不断发展，人们对于川穹嗪治疗肿瘤的疗效作用日益关注。根据本文的研究显示：在24、48、72小时时，光密度值，顺铂组为0.317±0.043，0.803±0.038，0.987±0.027，川穹嗪组为0.389±0.045，0.816±0.062，1.032±0.033，顺铂联合川穹嗪组为0.318±0.039，0.781±0.035，0.854±0.036，空白组的为0.428±0.043，0.831±0.058，1.005±0.068，相比较P小于0.05. 细胞集落形成率分析：顺铂组是15.7%±3.6%，川穹嗪组是17.8%±3.8%，顺铂联合川穹嗪组是11.3%±2.8%，对照组是23.9±4.1，相比较P小于0.05. 顺铂联合川穹嗪组与顺铂组、川穹嗪组相比较，P小于0.05.在用药72小时之后，相比于对照组，顺铂组、川穹嗪组、顺铂川穹嗪组的P16表达水平升高，顺铂川穹嗪组的P16表达水平又高于顺铂组、川穹嗪组。顺铂组、川穹嗪组、顺铂川穹嗪组的Cyclin D1表达水平下降。顺铂川穹嗪组的Cyclin D1表达水平又高于顺铂组、川穹嗪组。此结果充分说明，顺铂、川穹嗪都可以在一定程度上起到对小细胞肺癌的抑制作用，两种药物的联合使用，对于小细胞肺癌的抑制作用更加增强，主要原因在于川穹嗪种新的血管生长抑制剂，能够抑制肿瘤新生血管的形成，对恶性肿瘤细胞与内皮细胞之间的黏附有明显的抑制作用，降低内皮细胞的通透性，保护内皮细胞的完整，阻断恶性肿瘤细胞与组织基质的黏附，降低小细胞肺癌的Cyclin D1水平，提高P16蛋白表达水平，从而减少恶性肿瘤细胞的转移，且川芎嗪可通过其抗凝作用起到抗肿瘤转移；另外，川穹嗪是活血化瘀抗肿瘤中药川芎的主要成分，具有放射增敏及放射保护、化疗增效与减毒以及免疫调节的作用，临床应用的安全性较高[3]。综上所述，顺铂、川穹嗪都可以对NCL-H446细胞增殖起到抑制作用，两种药物的联合使用效果更加明显。与此同时，还可以降低小细胞肺癌的Cyclin D1水平，提高P16蛋白表达水平。

参考文献

[1]吉涛，刘永，王伟等.肺癌端粒酶活性、P53突变蛋白及细胞增殖DNA合成期比例相关研究[J].徐州医学院学报，2008，22（1）：30-33

[2] 徐晓玉，严鹏科，陈刚等.川芎嗪对小鼠肺癌血管生长和VEGF表达的抑制[J].中国药理学通报，2009，20（2）：151-154

[3]谢佐福，沈世仁.川芎嗪和羟基脲对阿霉素K562细胞株DNA合成的影响.中华医学杂志，2009，73（9）：559-562