microRNA与胃癌关系的研究进展

覃新干

胃癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，发病率位居第4位，而在中国胃癌发病率更高，仅次于肺癌，位居第二，然而，目前对进展期胃癌治疗的疗效仍没有显著改善，而且临床上早期胃癌症状不典型，就诊时往往已是进展期。因此，如何提高早期诊断水平，复发早期的及时发现及提高治疗效果成为提高胃癌患者治疗水平的关键。近年来，以 microRNA 为基础的癌症诊断与治疗备受关注，取得了很大的进展。本文就microRNA 与胃癌关系的研究进展做一综述，供临床参考。

1 MicroRNA概述

MicroRNA（miRNA）是一类长度约为22个左右核苷酸的内源性非编码子单链RNA，具有高度遗传稳定性。初始的miRNA转录产物由核糖核酸酶 Drosha和 Dicer1剪接后形成成熟的miRNA，后者主要通过与目的基因mRNA的3'非翻译区结合，使 mRNA 降解或抑制其翻译，从而发挥基因调节作用，调节RNA稳定和基因表达。miRNA对约30%人类蛋白的表达具有调节作用。miRNA通过转录后水平调节基因的表达而参与调控一列生命活动，包括参与调控细胞增殖，分化，生长，凋亡，代谢等功能；参与肿瘤发生，发展，转移的各个阶段。microRNA 在不同组织中，癌症发展的不同时期，其表达水平也不同[1]。

2 MicroRNA的研究方法[2]： （ 1） 鉴定 miRNA： 包括小分子 RNA直接克隆鉴定，miRNA 芯片分析和生物信息学预测的方法。（ 2） 检测 miRNA 的表达水平： 主要包括芯片技术（ microarray） 、RT-PCR（ real time RT-PCR、Stem loop RT-PCR） 、RNA 印记杂交（ Northern blot） 、核糖核酸酶保护实验（ RPA） 、磁珠流式检测（ Bead-based flow cytometric assay） 、寡核苷酸为基础的原位杂交（ LNA-based ISH） 。（ 3） miRNA 的靶标基因预测软件： 目前主要有 TargetScan、miRanda、PicTar、DIANA-microT、RNAhybrid、RNA22等。

3 MicroRNA与胃癌关系

3.1 MicroRNA与胃癌发生、发展

胃癌发生、发展是多基因参与，多步骤演变的过程，其中有癌基因与抑癌基因的失衡，细胞周期及代谢等的改变。miRNA通过转录后水平调节基因的表达而参与调控一列生命活动，包括参与调控细胞增殖，分化，生长，凋亡，代谢等功能，不除外参与胃癌发生，发展。Matsushima[3]等采用基因芯片、RT-PCR 方法研究发现幽门螺杆菌感染引起55种 microRNA表达改变，提示这些 microRNA 分子可能参与幽门螺杆菌的致炎或致癌过程。Liu[4]等研究表明microRNA-146a高表达与幽门螺杆菌感染相关。Shinozaki[5]等在研究EB病毒相关性胃癌中，发现microRNA-200家族（microRNA-200a 和 microRNA-200b）在 EB 病毒感染引起胃癌变中起了重要的作用。Sun等[6]发现miRNA-429作用于靶基因c-myc，抑制胃癌细胞的黏附与迁移，转染miRNA-429后胃癌细胞活性、增殖能力、黏附能力均明显下降，显示miRNA-429与原癌基因相互作用可能是胃癌发生、发展的机制之一。Liu 等[7]应用 Solexa及 qRT-PCR 技术检测164名胃癌患者及127名健康者血清miRNA表达并比较，结果血清 miRNA 表达谱中有 5 种miRNA（miR-1、miR-20a、miR-27a、miR-34 和 miR-423-5p）上调，对胃癌的诊断有意义，而且从早期胃癌（Ⅰ、Ⅱ）到晚期胃癌（Ⅳ、Ⅴ）这 5 种 miRNA 表达逐渐升高，这表明血清中 miRNA 与胃癌的发展有关。

3.2 MicroRNA与胃癌浸润、转移

MicroRNA 在不同组织中，癌症发展的不同时期，其表达水平也不同。Ueda等[8]研究353例胃癌组织与其相应的正常胃组织标本，发现胃癌组织中有22种miRNA分子表达上调、13种miRNA分子表达下调；miRNA分子的表达情况与组织类型有关：在弥散型胃癌中有8种miRNA分子上调，肠型胃癌中4种miRNA分子表达上调：miR-125b、miR-199a以及miR-100与胃癌进展有关，而Let-7g和miR-433低表达、miR-214高表达则提示肿瘤具有较强的侵袭、转移能力和较高的临床分期。Xiao B[9]等检测55例胃癌和17例非肿瘤胃组织的 microRNA-106a表达水平，胃癌组织microRNA-106a表达水平高于非肿瘤胃组织，并且microRNA-106a表达水平与肿瘤大小、分化程度，侵袭性，淋巴结和远处转移及分期有关。Chen等[10]采用miRNA芯片比较5例胃癌组织及相应转移淋巴结组织，分析发现miR-10a表达与胃癌淋巴结转移相关。有报道[11]胃癌患者miR-21高表达与淋巴结转移密切相关，并认为miR-21有可能成为胃癌淋巴结转移的标志物。以上表明MicroRNA与胃癌浸润、转移有关，但是目前这些研究结果还需进一步研究，方可应用于临床。

3.3 MicroRNA与胃癌诊断

目前胃癌的预后取决于确诊时的分期，分期越早，预后越好，反之则越差，但是临床上早期胃癌症状不典型，就诊时往往已是进展期。如何提高早期诊断率是提高胃癌疗效的关键。Tsujiura等[12]对69例胃癌患者和30例健康志愿者的血浆进行分析时发现miRNA-17-5p，miRNA-21，miRNA-106a和miRNA-106b在胃癌患者的血浆中表达明显上调，而let-7a表达明显下降。认为这几个miRNA有可能作为一种血清诊断标志物对胃癌患者进行筛查。Cai等[13]采用QRT-PCR检测比较30例胃癌患者血清及30例健康自愿者血清的15个miRNA发现miRNA-106b，miRNA-20a， miRNA221对早期胃癌诊断有潜在价值。Song 等[14]研究发现，血清miR-221，miR-376c 和miR-744 对胃癌早期诊断有价值。Jiang[15]等研究发现microRNA-421在73.33%的胃癌样本中过表达，以 microRNA-421作为标志物检测胃癌，胃癌检出率明显高于以血清癌胚抗原（ CEA） 的检出率（ P<0.001） 。以上结果均提示了 microRNA 有可能成为新的胃癌诊断的标志物。

3.4 MicroRNA与胃癌治疗

临床上早期胃癌症状不典型，就诊时往往已是进展期，而早期胃癌治疗效果好，对进展期胃癌治疗方法仍没有显著延长胃癌患者的生存时间，提高进展期胃癌治疗效果成为提高胃癌患者治疗水平的关键。MicroRNA参与胃癌发生，发展，转移的各个阶段，目前研究发现在胃癌治疗方面有其应用价值。Xia等[16]研究发现，促进多药耐药胃癌细胞株 SGC7901/VCR miR-15b 及 miR-16 表达可以提高耐药株对 VCR、ADM、VP-16 及顺铂（ CDDP） 的化疗敏感性，而其机制之一是通过靶基因 BCL2促进胃癌细胞对抗肿瘤药物诱导凋亡的敏感性。Jiang等[17]通过对 28 例 S-1/oxaliplatin 治疗后的患者和 27 例 doxifluridine/oxaliplatin 治疗后的患者的 miRNA 表达情况进行评估，结果发现，胃癌组织中MIR-181b和 miR-21表达显著高于正常胃组织。miR-21和miR-181b低表达与使用S-1和 Doxifluridine 为基础的治疗方案的患者的总生存期密切相关。

3.5 MicroRNA与胃癌预后

胃癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，发病率位居第4位，而在我国胃癌发病率更高，仅次于肺癌，位居第二，死亡率位居第三。如何早预测预后，对胃癌将有深远意义。Brenner等[18]采用miRNA芯片及RT-PCR研究45例胃癌病人手术后36个月内复发与非复发患者比较，发现miR-451、miR199a-3p和miR195与胃癌复发相关。Konishi等[19]应用miRNA芯片加RT-PCR验证的方法研究手术前后血清发现手术后miR-486、miR-451明显下调，认为可作为评估个体疗效的肿瘤标志物。

4 结语

MicroRNA与胃癌关系密切，参与胃癌发生、发展、浸润转移等，发现一些有价值的MicroRNA标志物。然而，它们相关机制仍未完全阐明，仍需进一步研究与探索，相信随着研究的深入，MicroRNA将在胃癌诊断、治疗、预防等方面起积极作用。

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