电针胃脘下俞对2型糖尿病模型大鼠血糖及血脂影响的实验研究

武燕 李瑞 田环环 高珊 裴恩实 杨萍 袁红

胃脘下俞，别名胰俞，属经外奇穴，古称胃管下俞、胃下俞、内胰俞等，位于第8胸椎棘突下旁开1.5寸，具有和胃化痰、理气止痛的作用，主治消渴、咽喉干等。在选穴方面，《千金翼方》就有消渴喉咙干，灸胃管下俞的记载，把胃管下俞作为治疗糖尿病的重要穴位。古代医家选用针刺胃脘下俞或梅花针叩击脊柱第8至第10胸椎两侧部位，以从阳引阴，使阴阳平衡，对阴虚内热的消渴有良好的治疗作用[2-3]。

瘦素(Leptin)作为一种脂肪细胞产生的激素，被临床用于反映肥胖、高血压、糖尿病病程的一个指标。瘦素的主要功能是引起食欲降低和能量消耗从而减轻体重[3]，这种功能是Leptin作用于下丘脑的体重调节中枢，与瘦素受体( Leptin receptor，Leptin R) 结合而发挥的。瘦素能调节机体脂肪的稳定[4]，它被认为向神经中枢提供了营养状况和脂肪堆积信息，从而调整饮食、行为、食欲和能量消耗[5-6]。

针灸具有调节人整体生理功能，调节神经-内分泌-免疫网络的作用，具体表现为机体接受针灸的刺激信号后促进神经肽类、乙酰胆碱类、氨基酸等多种神经递质的释放及调节肾上腺皮质激素、胰岛素、生长激素等的分泌，通过针刺对胰岛素分泌的影响从而可以调节胰腺功能[7]。为此，课题组选用电针大鼠“胃脘下俞”穴的方法，想进一步探索验证“胃脘下俞”穴对2型糖尿病大鼠的降糖作用以及与瘦素的关系，以期为2型糖尿病的针灸临床治疗增加实验依据。

1 材料与方法

1.1 糖尿病大鼠造模

选用体重为(100+10) g的4周龄雄性清洁级Wistar大鼠35只[购于北京斯贝福公司，批号SCXK(京)2011-0004]，随机分为空白对照组9只，2型糖尿病造模组26只。适应性喂养1周后，利用高脂高糖饲料(按1.5%胆固醇、0.25%胆酸钠、10%猪油、5%蔗糖、83.25%基础饲料配制，北京科澳协力饲料有限公司提供)连续喂养4周，于最末一天禁食12小时，将链脲佐菌素(STZ)溶于0.1 mmol/L柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液中(pH值=4.1,在冰浴中新鲜配制),按35 mg/kg剂量腹腔注射诱导2型糖尿病的大鼠模型，72小时后以空腹血糖值≥11.1 mmol/L[8-9]者为造模成功。造模过程中，其中5只血糖未达标准而剔除，1只由于血糖过高而死亡，共成模20只。

1.2 分组与治疗

空白对照组9只，造模成功的大鼠随机分为模型组和电针治疗组各10只。电针治疗组取双侧“胃脘下俞”(参照石学敏等[10]编订的《实验针灸学》)，将大鼠固定于自制鼠袋中，将穴位用75%的酒精棉球消毒后用针灸针(中研太和牌，无锡佳健医疗器械有限公司生产，0.22×13 mm)直刺，进针深度约4～6 mm。针柄接通英迪KWD-808型电针仪(单侧胃脘下俞及臀部“非穴”各连一对电极)，连续波，频率15 Hz，电流强度4～6 mA左右，以引起大鼠肌肉轻微抖动而不嘶叫为宜，留针20分钟/次，1次/日，5日/周，连续4周。

1.3 指标的测定及方法

空腹血糖：治疗前后禁食过夜12小时，将大鼠尾尖消毒后快速点刺，用罗氏快速血糖仪及配套试纸测血糖。

血清瘦素：末次治疗后禁食过夜12小时，以1%戊巴比妥钠按40 mg/kg麻醉后腹主动脉取血，静置20分钟后离心，收集血清将其保存于-80℃冰箱中待测瘦素。采用Elisa试剂盒，按试剂盒使用说明进行操作。

1.4 统计学分析

2 结果

2.1 治疗前后各组大鼠空腹血糖值比较

治疗前空白对照组与模型组、电针组的空腹血糖相比，差异显著均有统计学意义(P<0.05)，说明造模成功。模型组与电针组的空腹血糖值比较，差异无统计学意义(P>0.05)，说明两组来自同一大样本。

治疗4周后，电针组的空腹血糖值显著下降，接近空白对照组水平，差异无统计学意义(P>0.05)，而与模型组相比(P<0.05)具有显著差异，说明电针组降糖效果明显。见表1。

表1 针灸治疗前后各组大鼠空腹血糖值

注：与空白对照组对比aP<0.05；与模型组对比bP<0.05(下同)

2.2 治疗后各组大鼠血脂水平比较

治疗4周后，电针组的血清瘦素值显著降低，接近空白对照组水平，与空白对照组相比P=0.529(P>0.05)，差异无统计学意义，而与模型组相比，血清瘦素水平明显降低P=0.029(P<0.05)具有显著差异，说明电针组通过电针对大鼠“胃脘下俞”的刺激后能有效改变血清瘦素含量。模型组与空白对照组相比，血清瘦素水平显著升高，P=0.008(P<0.05),差异有显著统计学意义。这一结果提示，瘦素与2型糖尿病的发病可能有一定关联，这与部分文献报道一致[11-12]。电针组的甘油三酯(TG)显著降低，接近空白对照组水平，但与空白对照组相比差异有统计学意义P=0.043(P<0.05)，而与模型组相比，TG水平明显降低P=0.009(P<0.01)具有显著差异；电针组高密度脂蛋白(HDL-C)有所升高，接近空白对照组水平(P>0.05)，差异无统计学意义，模型组HDL-C与空白组比较有降低，但差异无统计学意义；电针治疗后治疗组LDL-C有所升高，但与模型组和空白组比较(P>0.05)，均无统计学意义，模型组与空白组比较(P<0.05)，差异有统计学意义。

实验结果显示电针治疗后，大鼠的血脂发生变化，这一变化使大鼠的血脂水平朝着更好的方向发展，从而达到有效控制血糖的作用。见表2。

表2 针灸治疗后各组大鼠血脂情况

3 讨论

3.1 电针胃脘下俞对血糖的影响

本实验研究发现，电针“胃脘下俞”可以使糖尿病大鼠的空腹血糖值显著降低，同时也可以明显降低糖尿病大鼠血清瘦素的含量。目前国内大部分学者认为瘦素与胰岛素之间存在双向调节作用[13-14]。课题组通过电针大鼠“胃脘下俞”，使瘦素与其受体结合，调节下游参与血糖调节的神经内分泌递质的分泌(例如：神经肽)，从而有效发挥瘦素调节能量代谢、改善胰岛素敏感性和葡萄糖代谢的作用[15]。糖尿病大鼠体内瘦素水平得到有效控制后，可显著改善胰岛素抵抗[16]，这可能是针刺调控糖尿病大鼠血糖的重要机制，同时也是瘦素—胰岛素轴的体现。

3.2 电针胃脘下俞对血脂的影响

糖尿病是由于体内胰岛素绝对或相对不足而引起的以糖、脂肪、蛋白质等代谢紊乱为主的一种内分泌疾病[17]，因此2型糖尿病患者往往同时存在血脂代谢紊乱。

2型糖尿病因胰岛功能不足,使脂肪细胞内的激素敏感脂酶活性升高,脂肪组织释放大量脂肪酸,因而增加总胆固醇(TC)、TG的合成；同时,胰岛素抵抗可通过抑制脂蛋白酯酶活性，使TG的脂蛋白清除时间延长，进一步促进血脂异常[18]。另一方面，高脂血症又会抑制胰岛素分泌,加剧胰岛素分泌障碍和胰岛素抵抗，而且脂代谢紊乱尤其是LDL-C含量升高可导致内皮下间隙LDL-C的氧化作用及其它修饰作用增强，促进动脉粥样硬化斑块形成，对糖尿病患者发生心血管并发症有显著作用[19-20]。

HDL-C是一种抗动脉粥样硬化的血浆脂蛋白，HDL-C对判断血脂是否异常具有重要临床意义[21]。本课题研究发现电针胃脘下俞能有效改善2型糖尿病大鼠的胰岛功能，从而影响胰岛素的分泌，调节血糖；通过电针胃脘下俞调节2型糖尿病大鼠的瘦素、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白等的含量来改善脂代谢紊乱的状况。关于电针胃脘下俞调节血糖血脂的进一步机制将在今后的实验中深入探讨。

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