顶空气相色谱法测定马来酸曲美布汀中溶剂残留量

吴毅彦，王 卫

(天津市药品检验所，天津 300070)

马来酸曲美布汀适用于胃肠道运动功能紊乱引起的食欲不振、恶心、呕吐、嗳气、腹泻、便秘等症状及肠道易激惹综合征。马来酸曲美布汀目前在我国共有3家企业生产，分别执行3个不同标准[1-3]，而这3个标准分别检测甲苯、四氢呋喃。本试验将3个标准统一，遵循2010年版《中国药典(二部)》附录ⅧP残留溶剂测定法[4]，采用顶空气相色谱法，使用1个色谱条件将生产过程中引入的溶剂(乙醇、异丙醇、正己烷、四氢呋喃、甲苯)一次性检出，并计算其含量，以保证药品的质量及用药安全。本方法简便易行、结果准确可靠，重现性好。

1 仪器与试药

Agilent 7890气相色谱仪，FID检测器。乙醇、异丙醇、正己烷、四氢呋喃、甲苯、N，N-二甲基甲酰胺(DMF，天津市康科德科技有限公司)均为分析纯。马来酸曲美布汀原料共9批(A厂:批号 为 20090412，20110502，20110503;B 厂 :批 号 为 110480，110575，110576;C 厂:批号为 1104001，1104002，1104003)。

2 方法与结果

2．1 色谱条件

色谱柱为AgilentDB-624毛细管柱(30m×0．32mm，1．8μm);载气为氮气;柱温:初始温度40℃，保持5 min，以10℃ /min速度升温至180℃，保持5 min;进样口温度200℃;检测器温度250℃;分流比1∶5。顶空条件:平衡温度60℃，平衡时间30 min;进样体积1 mL。

2．2 溶液制备

精密称取乙醇500 mg、异丙醇500 mg、正己烷29 mg、四氢呋喃72 mg、甲苯89 mg，置10 mL容量瓶中，加二甲基甲酰胺稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液贮备液。精密量取上述溶液1 mL，置100 mL容量瓶中，加二甲基甲酰胺稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

2．3 方法学考察

线性关系考察:分别精密量取2．2项下对照溶液贮备液0．2，0．5，1．0，2．0，4．0 mL，分置 100 mL 容量瓶中，用二甲基甲酰胺稀释至刻度，摇匀，获得一系列溶液，精密量取5 mL置顶空瓶中依次进样，以各溶液质量浓度(X，g/L)为横坐标、峰面积(Y)为纵坐标进行线性回归。结果见表1。

重复性试验:取2．2项下对照溶液，连续进样6针，计算各溶剂峰面积，乙醇、异丙醇、正己烷、四氢呋喃、甲苯峰面积的 RSD分别为 1．2%，1．1%，1．6%，1．9%，1．7%，表明方法的重复性良好。

表1 残留溶剂线性方程及相关系数

最低检出限、定量限试验:取2．2项下的对照品贮备溶液，用二甲基甲酰胺稀释至信噪比约为3时，测定最低检出质量浓度乙醇为 5 μg/mL，异丙醇为 5 μg/mL，正己烷为 0．29 μg/mL，四氢呋喃为 0．72 μg/mL，甲苯为 0．89 μg/mL。

回收率试验:精密称定C厂批号为1104001的样品0．5 g，置20 mL顶空瓶中，共9份。另分别精密量取2．2项下对照品贮备溶 0．8，0．8，0．8，1．0，1．0，1．0，1．2，1．2，1．2 mL，置 100 mL 容量瓶中，用二甲基甲酰胺稀释至刻度，摇匀，分别精密量取上述溶液5 mL，置已加样的9个顶空瓶中，摇匀，顶空进样，按外标法计算。结果乙醇平均回收率为101．5%(n=9)，RSD为2．71%;异丙醇平均回收率为103．0%(n=9)，RSD为2．19%;正己烷平均回收率为 99．7%(n=9)，RSD为 3．32%;四氢呋喃平均回收率为100．9%(n=9)，RSD 为 2．91%;甲苯平均回收率为 100．9%(n=9)，RSD 为 2．36%。

稳定性试验:取2．2项下的对照溶液于0，24 h分别进样测定。结果表明，乙醇、异丙醇、正己烷、四氢呋喃、甲苯均在24h内稳定。

2．4 样品含量测定

精密称取本品0．5 g，置20 mL顶空瓶中，精密加入二甲基甲酰胺溶液5 mL，按上述色谱条件测定。结果见表2，色谱图见图1。

表2 9批样品中残留溶剂含量测定结果(%)

3 讨论

本试验筛选了Agilent的DB-5、DB-17和DB-624毛细管色谱柱，试验证明采用DB-624柱可以使5种有机溶剂达到完全分离，且灵敏度也优于其他两个柱子。

图1 残留溶剂色谱图

本品在40℃恒温条件下保持5 min，能够保证沸点较低的乙醇、异丙醇、正己烷和四氢呋喃的分离，再以10℃ /min升至180℃，并保持5 min，以确保样品中其他较高沸点的溶剂尽快检出，采用程序升温可以使5种溶剂在12 min内全部出峰，缩短了分析时间，提高了分析效率。

顶空时间要确保供试品溶液的气-液相达到平衡，可通过测定顶空时间与顶空气体浓度-时间曲线来确定。顶空时间不宜过长，一般为30～45 min，如果过长，可能引起顶空瓶的气密性变差，导致定量的准确性降低，如果时间不够，就不能保证气-液两相达到平衡。经试验，顶空时间选择30 min。

[1]WS-521(X-444)-2001，国家药品标准[S]．

[2]WS1-(X-469)-2003Z，国家药品标准[S]．

[3]YBH07532010，国家药品标准[S]．

[4]国家药典委员会．中华人民共和国药典(二部)[M]．北京:中国医药科技出版社，2010:附录61-附录65．