开口箭抗炎镇痛作用实验研究

谭 刚，杨业玉，李建军

（1.湖北民族学院医学院，湖北 恩施 445000；2.湖北省鹤峰走马人民医院，湖北 鹤峰 445801；3.湖北省恩施自治州中心医院，湖北 恩施 445000）

论 著

开口箭抗炎镇痛作用实验研究

谭 刚1，杨业玉2，李建军3

（1.湖北民族学院医学院，湖北 恩施 445000；2.湖北省鹤峰走马人民医院，湖北 鹤峰 445801；3.湖北省恩施自治州中心医院，湖北 恩施 445000）

目的：探讨开口箭的抗炎镇痛作用。方法：抗炎实验用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、角叉菜胶致大鼠足跖肿胀和大鼠棉球肉芽肿炎症模型,镇痛实验用热板法和醋酸扭体法。结果：开口箭水煎液灌胃100mL/（kg·d）能明显的抑制二甲苯致小鼠耳廓肿胀（P＜0.05）。醇提液腹腔注射2mL/kg在1h、2h、3h时对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀有非常明显的抑制作用（P＜0.01）。水煎液腹腔注射2mL/kg对棉球埋藏引起的慢性肉芽肿有明显的抑制作用（P＜0.01）。 水煎液腹腔注射2mL/kg在60min时对热板致小鼠痛阈有明显提高（P＜0.01）。水煎液皮下注射2mL/kg、0.5mL/kg对醋酸致小鼠扭体反应有明显的抑制作用（P＜0.01）。结论：开口箭有明显的抗炎镇痛作用。

开口箭；抗炎；镇痛

开口箭系百合科植物开口箭（Tupistra chinensis Bak）的干燥根状茎，其味甘、微苦，性凉，具有清热解毒、散瘀止痛等功效，主治腰腿痛、跌打损伤、风湿关节痛、毒蛇咬伤等［1］。生长在湖北恩施富硒深山丛林中，资源极为丰富，在湖北恩施民间习用［2］。笔者对开口箭进行了抗炎镇痛作用实验研究，总结如下。

1 实验材料

实验动物：SD大鼠70只，体质量（130.4±21.2）g，昆明种小鼠120只，体质量（20.3±2.1）g，雌雄兼用，由华中科技大学同济医学院提供。

开口箭提取液制备：开口箭购于恩施药材公司。开口箭用水煎煮3次，过滤后，浓缩成1kg/L的溶液。另用开口箭粗粉乙醇回流提取3次，除去乙醇以后制成1kg/L的醇提取液。

主要试剂：角叉菜胶（Carraseenan）为Sigma产品，二甲苯为北京化学试剂厂生产，氢化可的松为江西国药厂生产，阿司匹林为南京第二制药厂生产。

仪器：TG328A型电子分析天平由上海上平仪器公司生产，GJ-8402型热板测痛仪由浙江海宁白石电子医学仪器厂生产，RE-52型旋转蒸发器由上海亚荣生化仪器厂生产。

2 实验方法

2.1 二甲苯致小鼠耳肿胀实验［3］

昆明种小鼠40只，随机分为4组，给药组分别灌胃水煎液30mL/kg和60mL/kg，阳性药组灌胃阿司匹林0.2g/ kg，对照组灌胃60mL/kg生理盐水，每日1次，连续给药3天，在末次给药1h后以50uL二甲苯涂于小鼠右耳廓两面致炎，左耳廓作为对照，4h后剪下两耳，用直径6mm打孔器取耳片，称重，以两耳质量差表示炎症反应的强度，计算抑制率［抑制率（%）=（1－给药组两耳片重量差/空白组两耳片重量差）×100%］。

2.2 角叉菜胶致大鼠足肿胀实验［4］

将SD大鼠30只随机分成3组，用足容积测量器测量大鼠右后肢踝关节以下容积。给药组分别腹腔注射醇提液0.5mL/kg和2mL/kg，对照组腹腔注射2mL/kg生理盐水，一次性给药后30min，将1%角叉菜胶溶液0.1mL注入右后肢脚掌皮下，记录致炎前后不同时间右后肢踝关节以下容积。肿胀率（%）=（致炎后足跖容积-致炎前足跖容积）/致炎前的足跖容积×100%。抑制率（%）=（空白组平均肿胀率-给药组平均肿胀率）/空白组平均肿胀率）×100%。

2.3 大鼠棉球肉芽肿实验［4，5］

SD大鼠40只，随机分为4组，在硫贲钠（40mg/ kg）麻醉下，将称重无菌棉球分别埋藏于大鼠双侧背部皮下，左右各1个，手术次日给药组分别腹腔注射水煎液2mL/kg及醇提液2mL/kg，阳性药组腹腔注射氢化可的松2.5mg/kg，对照组腹腔注射2mL/kg生理盐水，每日1次，连续给药5天。在末次给药后次日将大鼠处死，取出无菌棉球和肉芽组织，于60℃烤箱内干燥后称重，计算肉芽组织质量及抑制率［抑制率（%）=（1－给药组肉芽组织干质量/空白组肉芽组织干质量）×100%］。

2.4 小鼠热板法致痛实验［5，6］

雄性健康小鼠，放入550.5℃热板测痛仪上，实验室温度控制在192℃。观察小鼠出现舔足的潜伏期，作为痛阈指标，选择痛阈在5～20s的小鼠40只，随机分为4组，给药组分别腹腔注射水煎液0.5mL/kg和2mL/ kg，阳性药组腹腔注射阿司匹林0.06g/kg，对照组腹腔注射2mL/kg生理盐水，分别记录给药前和1次性给药后30min、60min、90min出现舔足的潜伏期。

2.5 小鼠醋酸致痛扭体法实验［5，6］

取健康小鼠40只，雌雄各半，随机分成4组，给药组分别皮下注射水煎液0.5mL/kg和2mL/kg，阳性药组皮下注射阿司匹林0.06g/kg，对照组皮下注射2mL/kg生理盐水，一次性给药30min后，各组均腹腔注射0.7%醋酸溶液0.2mL/10g，观察10min内小鼠扭体反应次数，求得扭体反应抑制率。抑制率（%）=（1-给药组扭体反应次数/空白组扭体反应次数）×100%。

2.6 统计学处理

应用SPSS10.0for Windows统计分析软件进行处理，实验数据以均数±标准差（）表示，实验结果采用配对样本t检验［7］。

3 结 果

3.1 开口箭对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响

开口箭水煎液各组与生理盐水组比较两耳质量差有统计学意义（P＜0.05），阿司匹林组与生理盐水组比较两耳质量差有统计学意义（P＜0.01）。结果表明开口箭对二甲苯引起的耳肿胀有明显的抑制作用，但没有在实验剂量下的阿司匹林显著。

表1 开口箭对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响（）

表1 开口箭对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响（）

注：与生理盐水组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。

组别动物数（只）耳片质量（mg）两耳质量差（mg）抑制率（%）左耳右耳生理盐水106.64±0.468.95±1.352.31±0.86---水煎液（30mL）106.58±0.258.57±1.281.99±0.95*13.8水煎液（60mL）106.52±0.418.29±0.481.77±1.21*23.5阿司匹林106.49±0.437.24±0.780.75±0.39**67.6

3.2 开口箭对大鼠角叉菜胶引起足肿胀的影响

开口箭醇提液组（0.5mL/kg）与生理盐水组比较致炎后不同时间的容积（除致炎后4h外）均有统计学意义（P＜0.05），醇提液组（2mL/kg）与生理盐水组比较致炎后不同时间的容积有统计学意义（P＜0.01）；致炎前各组的容积与生理盐水组比较无统计学意义。结果表明开口箭醇提液有非常明显的抑制角叉菜胶引起的肿胀作用。给药剂量为0.5mL/kg，1～3h的抑制率分别为30.8%、31.7%、19.6%、14.6%；剂量为2mL/kg时，抑制率为63.5%、42.8%、26.5%、30.2%。

表2 开口箭对大鼠角叉菜胶引起足肿胀的影响（）

表2 开口箭对大鼠角叉菜胶引起足肿胀的影响（）

注：与生理盐水组比较，*P＜0.05、**P＜0.01。

致炎前容积（mL）组别动物（只）致 炎 后 容 积 （mL）1h2h3h4h生理盐水101.13±0.162.09±0.272.30±0.323.12±0.413.54±0.46醇提液（0.5mL）101.11±0.141.76±0.22*1.89±0.23*2.68±0.31*3.13±0.38醇提液（2mL）101.07±0.161.40±0.18**1.70±0.25**2.45±0.32**2.72±0.33**

3.3 开口箭对大鼠肉芽组织增生的影响

植入无菌棉球后，第2天各组大鼠伤口愈合良好，第6天处死动物后，可见其双侧背部皮下均有球状突起的肉芽组织。开口箭醇提液组（2mL/kg）、氢化可的松组（0.0025/kg）与生理盐水组比较肉芽组织干质量有统计学意义（P＜0.05），水煎液组（2mL/kg）与生理盐水组比较肉芽组织干质量有统计学意义（P＜0.01）。结果表明开口箭水煎液和醇提液对大鼠无菌棉球植入法诱发肉芽肿都有明显的抑制作用，水煎液的抑制作用强于醇提液。

表3 开口箭对大鼠肉芽组织增生的抑制作用（）

表3 开口箭对大鼠肉芽组织增生的抑制作用（）

注：与生理盐水组比较，*P＜0.05、**P＜0.01。

抑制率（%）生理盐水107.06±1.67---水煎液104.75±0.59**32.6醇提液105.79±1.48*17.9氢化可的松105.74±1.38*18.7组别动物数（只）肉芽组织干质量（mg）

3.4 开口箭对热板致小鼠痛阈的影响

开口箭水煎液各组在给药60min时、阿司匹林组与生理盐水组比较不同时间出现舔足的潜伏期均有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01），开口箭水煎液各组、阿司匹林组在给药前和给药后30min与生理盐水组比较出现舔足的潜伏期均无统计学意义。结果表明开口箭水煎液各剂量对热板致小鼠痛阈值提高均有明显作用，镇痛作用随剂量增加效果越明显，呈现出明显的量效关系。

表4 开口箭对热板致小鼠痛阈的影响（）

表4 开口箭对热板致小鼠痛阈的影响（）

注：与生理盐水组比较，*P＜0.05、**P＜0.01。

组别动物数（只）给药前（s）给药后（s）30min60min90min生理盐水1011.3±2.810.7±2.911.2±3.110.8±3.3水煎液（0.5mL）1011.6±2.911.6±3.413.5±3.9*12.2±4.2水煎液（2mL）1011.8±3.512.6±5.220.4±6.2**15.7±5.9*阿司匹林1010.7±3.212.5±3.415.2±4.0*16.5±4.3**

3.5 开口箭对醋酸致小鼠扭体反应的影响

开口箭水煎液各组、阿司匹林组与生理盐水组比较扭体次数均有统计学意义（P＜0.01）。结果表明开口箭水煎液各剂量组能明显减少小鼠扭体次数，剂量较大时抑制作用明显。

表5 开口箭对醋酸致小鼠扭体反应的影响（）

表5 开口箭对醋酸致小鼠扭体反应的影响（）

注：与生理盐水组比较，*P＜0.05、**P＜0.01。

组别动物数（只）扭体数（次）抑制率（%）生理盐水1054.5±3.8---水煎液（0.5mL）1044.6±6.4*18.2水煎液（2mL）1034.4±5.7**36.8阿司匹林1030.7±4.3**43.6

4 讨 论

实验结果表明，开口箭能明显抑制二甲苯致小鼠耳肿胀及角叉菜胶致大鼠足跖肿胀炎症反应，其抑制作用随剂量的增加而增强。在以肉芽组织增生为指标的慢性炎症模型实验中，开口箭能够显著抑制异物所致大鼠炎症的肉芽增生，说明开口箭对异物所致大鼠炎症肉芽增生具有抑制作用。

镇痛实验表明该提取液对化学致痛和热板致痛有一定的镇痛效果。开口箭能明显减少醋酸所致小鼠扭体反应次数，而且随剂量的增加扭体反应次数明显减少，又能明显延长热刺激小鼠痛阈值，说明开口箭有镇痛作用。开口箭对不同刺激引起的疼痛均有良好的镇痛效果，可缓解临床炎症反应引起的疼痛。

综上所述，开口箭具有一定的抗炎镇痛作用，初步分析其抗炎镇痛作用可能涉及中枢及外周系统，而对其有效成分及作用机制的探讨，则有待于进一步的深入研究。

［1］谢宗万.全国中草药汇编（上册）［M］.2版.北京：人民卫生出版社，2000：163-163.

［2］杨付明.恩施地区脑病治疗用药特色［J］.实用中医药杂志，2003，19（11）：605-606.

［3］陈奇.中药药理研究方法学［M］.北京：人民卫生出版社，1994：356.

［4］徐叔云，卞如濂，陈修，等.药理实验方法学［M］.2版.北京：人民卫生出版社，1991：714，723.

［5］H.Gerhard Vogel.药理学实验指南—新药发现和药理学评价［M］.杜冠华，译.北京：科学出版社，2001：491，511，536.

［6］李仪奎.中药药理实验方法学［M］.上海：上海科技出版社，1991：304-353.

［7］刘润幸.医学统计方法与应用［M］.上册.广东：广东人民出版社，2001：128-130.

Objective：To study the anti-inflammatory and analgesic effects of Tupistra chinensis.Methods：A few conventional models，such as the mouse pinna swelling induced by xylene；the ratshind paw swelling elicited by carrageenan，the rats proliferation of granuloma led by implanting cotton pellet；Analyesia experiments adopted hot-plate procedure and torsion body method.Results：The water extract （i.g.100mL/kg·d） of Tupistra chinensis obviously inhibited the swelling of mouse pinna induced by xylene （P＜0.05），the grain alcohol extract （i.p.2mL/kg） suppressed the edema of rat hind paw swelling elicited by 1% carrageenan after 1h，2h，3h，（P＜0.01）.the water extract （i.p.2mL/kg） significantly depressed the increase of prdiferation of granuloma led by implanting cotton pellet （P＜0.01）.the water extract （i.p.2mL/kg） had an abatement effect effect of algesin induced by heat with tail flick method after 60min （P＜0.01）.the water extract （s.c.2mL/kg，0.5mL/kg） obviously inhibited the torsion body of mous induced by acetum （P＜0.01）.Condusion：Tupistra chinensis is an effective medicine on anti-inflammation and analgesia.

Tupistra chinensis；Anti-inflammation；Analyesia

R289.9

B

1004-2814(2013)07-513-03

2013-04-19