肺经草化学成分研究

李雪晶，李雪松，刘展元，吴泽宇，周小江

（湖南中医药大学药学院，湖南 长沙410208）

肺经草又名大肺筋草，收载于《四川省中草药标准》（1979年版），为伞形科植物薄片变豆菜Sanicula lamelligera Hance的干燥全草[1]，在四川省乃至西南地区的民间都在使用，主要用于感冒咳嗽，尤其是流行性感冒，具有分布面广、资源丰富的特点[2]。肺经草主要含有机酸、三萜皂苷、倍半萜类成分[3]，前期研究表明：其乙酸乙酯提取部位和正丁醇提取部位具有较好的止咳化痰和抗甲型H1N1流感病毒作用[4-5]，为了开发利用这一药用资源，寻找其抗甲型H1N1流感病毒的活性成分，作者采用硅胶、反相硅胶、Sephadex LH-20等柱色谱对肺经草的化学成分进行研究，从正丁醇提取部位中分离了6个化合物，分别为：daucosterol(Ⅰ)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷 (Ⅱ)、5-羟基-7，3′，4′-三甲氧基黄酮 (Ⅲ)、n-Butyl-D-fructofuranoside(Ⅳ)、3-甲氧基-4-羟基苯甲醛(Ⅴ)、3，4-二羟基苯甲醛(Ⅵ)。所有的化合物均为首次从该植物中分离得到。

1 仪器与材料

Bruker AM-400和Bruker DRX-500核磁共振波谱仪(以TMS为内标)；Büchi型旋转蒸发仪(瑞士Büchi公司)；XRC-1型显微熔点仪(四川大学科仪厂)；Sephadex LH-20凝胶(Amersham Biosciences公司)；RP-18反相硅胶(40～63μm，Daiso公司)，柱色谱硅胶(200目～300目)、硅胶H和薄层色谱硅胶GF254(青岛海洋化工厂)；所用试剂均为分析纯。

肺经草于2008年7月采自四川省峨眉山，经周小江教授鉴定为伞形科植物薄片变豆菜Sanicula lamelligera Hance的干燥全草。

2 提取与分离

肺经草10 kg，切碎后加甲醇回流提取2次（80 L×2），每次2 h，滤过，合并提取液，减压回收甲醇，加水混悬，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，减压回收相应的溶媒得各部分流浸膏。正丁醇部分浸膏110 g，经正相硅胶柱色谱、反相硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱及重结晶等方法，从中分离得到化合物Ⅰ(12 mg)、Ⅱ(5 mg)、Ⅲ(26 mg)、Ⅳ(12 mg)、Ⅴ(11 mg)、Ⅵ(14 mg)。

3 结构鉴定

化合物Ⅰ：白色粉末，易溶于甲醇、丙酮。1HNMR(400 MHz，CD3OD)δH：0.67(3H，s，H-18)，0.82(3H，m，H-27)，0.84(3H，m，H-29)，0.91(3H，m，H-26)，0.93(3H，s，H-19)，0.97(3H，m，H-21)，1.38(1H，m，H-14)，3.66(1H，m，H-3)，5.34(1H，m，H-6)，4.91(1H，d，J=5.2 Hz，Glc H-1)，3.14-3.54(6H，m，Glc H-2，Glc H-6)；13C-NMR(100 MHz，CD3OD)δC：37.5(C-1，t)，30.3(C-2，t)，78.0(C-3，d)，39.4(C-4，t)，140.9(C-5，s)，122.0(C-6，d)，32.2(C-7，t)，32.1(C-8，d)，50.4(C-9，d)，37.0(C-10，s)，21.3(C-11，t)，40.0(C-12，t)，42.5(C-13，s)，56.9(C-14，d)，24.7(C-15，t)，28.5(C-16，t)，56.3(C-17，d)，12.0(C-18，q)，19.1(C-19，q)，36.5(C-20，d)，19.3(C-21，q)，34.1(C-22，t)，26.4(C-23，t)，46.0(C-24，d)，29.5(C-25，d)，19.5(C-26，q)，20.0(C-27，q)，23.4(C-28，t)，12.2(C-29，q)，102.6(Glc-1)，75.4(Glc-2)，78.7(Glc-3)，71.7(Glc-4)，78.6(Glc-5)，62.8(Glc-6)。以上数据与文献[6]基本一致，故确定为daucosterol。

化合物Ⅱ：黄色粉末，薄层色谱检识：喷以AlCl3可见黄色荧光。1H-NMR(400 MHz，C5D5N)δH：15.59(1H，5-OH)，7.88(2H，d，J=8.2 Hz，H-2，H-6′)，7.18(2H，d，J=8.2 Hz，H-3′，H-5′)，7.09(1H，s，H-3)，6.90(1H，s，H-8)，6.84 (1H，s，H-6)，5.85 (1H，d，J=7.1 Hz，glc H-1)。13C-NMR(100 MHz，C5D5N)δC：165.0(C-2，s)，104.0(C-3，d)，182.9(C-4，s)，163.0(C-5，s)，101.8(C-6，d)，164.0(C-7，s)，95.4(C-8，d)，157.9(C-9，s)，106.6(C-10，s)，122.0(C-1′，s)，129.1(C-2′，d)，116.9(C-3′，d)，162.6(C-4′，s)，116.9(C-5′，d)，129.1(C-6′，d)，100.7(C-1″，glc-1)，74.9(C-2″，glc-2)，78.4(C-3″，glc-3)，71.1(C-4″，glc-4)，79.3(C-5″，glc-5)，62.4(C-6″，glc-6)。以上数据与文献[7]基本一致，故确定为芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物Ⅲ：黄色针状结晶 (甲醇-三氯甲烷)，mp167～169℃。ESI-MS m/z：329[M+H]+。1HNMR(400 MHz，C5D5N)δH：7.07(1H，s，H-3)，6.60(1H，s，H-6)，6.73 (1H，s，H-8)，7.57 (1H，s，H-2')，7.06(1H，d，J=8.6 Hz，H-5')，7.66(1H，d，J=8.6 Hz，H-6')，13.60(1H，s，5-OH)，3.82(3H，s，-OCH3)，3.79(3H，s，-OCH3)，3.72(3H，s，-OCH3)。13C-NMR(100 MHz，C5D5N)δC：164.4(C-2，s)，104.9(C-3，d)，182.9(C-4，s)，162.7(C-5，s)，98.8(C-6，d)，166.0(C-7，s)，93.1(C-8，d)，158.2(C-9，s)，106.0(C-10，s)，123.2(C-1'，s)，110.0(C-2'，d)，149.6(C-3'，s)，153.2(C-4'，s)，112.20(C-5'，d)，120.7(C-6'，d)，56.5(-OCH3)，56.4(-OCH3)，56.2(-OCH3)。以上数据与文献[8]基本一致，故确定为5-羟基-7，3′，4′-三甲氧基黄酮。

化合物Ⅳ：白色粉末，溶于甲醇。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δH： 0.90 (3H，t，J=7.3 Hz，H-4)，1.47(2H，m，H-3)，1.53(2H，m，H-2)。13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δC：60.6(C-1，t)，32.0(C-2，t)，19.2(C-3，t)，13.8(C-4，q)，61.3(C-1'，t)，107.7(C-2'，s)，81.4(C-3'，d)，77.3(C-4'，d)，82.8(C-5'，d)，64.4(C-6'，t)。以上数据与文献[9]一致，故确定为n-Butyl-D-fructofuranoside。

化合物Ⅴ：白色固体，溶于氯仿、丙酮和甲醇。1H-NMR (500 MHz，CD3COCD3)δH：9.73 (1H，s，-CHO)，7.41 (1H，dd，J=1.9 Hz，7.7 Hz，H-6)，7.42(1H，d，J=2.1 Hz，H-2)，6.93(1H，d，J=7.7 Hz，H-5)，3.92(3H，s，-OCH3)。13C-NMR(125 MHz，CD3COCD3)δC：130.5 (C-1，s)，116.3 (C-2，d)，149.6(C-3，s)，154.7(C-4，s)，116.3(C-5，d)，127.9(C-6，d)，192.9(-CHO)，56.3(-CH3O)，以上数据与文献[10]一致，故确定为3-甲氧基-4-羟基苯甲醛。

化合物Ⅵ：淡黄色固体，溶于氯仿、丙酮和甲醇。1H-NMR(500MHz，CD3OD)δH：7.30(1H，d，J=1.8Hz，H-2)，7.28 (1H，dd，J=1.8 Hz，4.1 Hz，H-6)，6.90(1H，d，J=8.2Hz，H-5)，9.68(1H，s，-CHO)，以上数据与文献[11]基本一致，故确定为3，4-二羟基苯甲醛。

致谢：特别感谢中国科学院昆明植物研究所植物化学与西部植物资源持续性利用国家重点实验室程永现研究员在波谱测试和结构鉴定中提供的帮助。

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