细胞培养适应性突变促进病毒蛋白－蛋白相互作用以及丙型肝炎病毒感染的形态发生

最近基因研究表明，病毒非结构（NS）蛋白在黄病毒，特别是丙型肝炎病毒（HCV）的形成中发挥着重要作用。细胞培养过程中不同NS蛋白的适应和代偿性突变已被证明能促进HCV的形态发生。然而，人们对NS蛋白在HCV形态发生中的分子机制知之甚少。该文研究者已分离出细胞培养适应的HCV基因型2a（JFH1）毒株，比野生型病毒的感染滴度要高3个数量级。通过测序分析，在核蛋白、E1、NS2、NS3、NS5A和NS5B中共发现16个氨基酸突变，大部分突变集中在NS5A蛋白。对这些突变的反向遗传分析表明，NS2和NS5A单独或不同组合的氨基酸突变明显增加HCV产生。另外，在NS2和NS5A发生突变的基础上，核蛋白、E1、NS3和NS5B的突变能协同促进HCV产生。NS5A结构域I、II和III的适应性突变能独自增强HCV产生，表明这3个结构域对HCV的形态发生具有重要作用。更重要的是，通过免疫共沉淀和哺乳动物双杂交研究发现，这些适应性突变大大提高HCV结构与非结构蛋白间的物理相互作用。总之，这些研究结果表明，适应性突变能增强病毒结构与非结构蛋白相互作用，从而促进感染性HCV颗粒装配。