类风湿性关节炎患者血清CD40L及IL-6hs-CRP表达及临床意义

谭 军，陈建国

（江苏省镇江市第一人民医院：1.风湿科，2.检验科 212002）

类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种以软骨组织或关节滑膜组织损伤为特征的器官特异性自身免疫性疾病，其主要的病理变化是巨噬细胞以及T淋巴细胞等慢性炎性细胞因子过度分泌，不断渗入至滑膜组织中，导致关节滑膜的渐进式损伤及骨质破坏［1-3］。RA的病因以及发病机制尚未完全明了，RA患者的炎症过程与血清中白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）等细胞因子有关，各炎性细胞因子在RA的发生发展过程中起着非常重要的作用。本研究通过对RA患者外周血清IL-6、超敏C-反应蛋白（high sensitivity C-reactive protein，hs-CRP）和T细胞CD40配体（CD40Ligand，CD40L）进行检测，探讨IL-6、hs-CRP及CD40L水平的变化与RA发病过程及病变程度的关系，以期为RA的诊治提供参考性依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2009年6月至2012年5月本院风湿科收治RA患者90例为观察组。本研究获得患者知情同意及医院伦理委员会批准。病例入选标准：符合ACR于1987年修订的RA分类标准。其中男51例，女39例；年龄38～67岁，平均（50.7±16.8）岁，病程2个月至16年，平均（6.3±5.5）年。另收集同期在本院体检的健康志愿者90例为对照组，其中男49例，女41例，年龄36～68岁，平均（51.4±18.1）岁，病程4个月至15年，平均（6.1±5.8）年。两组性别、年龄、病程等一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。两组研究对象均经肝、肾功能、血糖血脂、激素、B超以及X线等检查，排除肝、心及肾功能不全者、肿瘤及发生严重感染者、高血压、具有自身免疫性及周围血管闭塞性疾病史者、近期做过创伤性手术者。所有研究对象半月内未曾使用抗凝或抗血小板药物。

1.2 方法

1.2.1 分组 RA活动期的诊断需符合以下5项中的至少3项：（1）晨僵超过1h；（2）关节肿痛数不低于3个；（3）红细胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate，ESR）超过30mm／h；（4）类风湿因子（RF）高于正常值；（5）类风湿皮下结节；根据以上标准将90例RA患者分为稳定期组（42例）和活动期组（48例）。血小板大于300×109／L判定为血小板升高的评定标准，将90例RA患者分为血小板正常组（50例）和血小板升高（40例）。

表1 RA组与健康对照组血清检验指标比较（±s）

表1 RA组与健康对照组血清检验指标比较（±s）

-：此项无数据。

组别 n BPC（×109／L） RF（IU／mL） ESR（mm／h） hs-CRP（mg／L） IL-6（pg／L） CD40L（ng／L）.6 2.5±0.8观察组 90 283.5±56.8 40.1±7.3 40.5±10.9 9.7±3.4 7.6±2.4 8.6±2.2 t- 6.279 23.744 26.974 6.669 12.827 6.531 P对照组 90 227.7±62.3 15.3±6.7 8.2±3.2 2.8±1.5 3.7±1- 0.001 0.001 0.001 0.001 0.001 0.001

表2 RA稳定组与活动组血清检验指标比较（±s）

表2 RA稳定组与活动组血清检验指标比较（±s）

-：此项无数据。

组别 n BPC（×109／L） RF（IU／mL） ESR（mm／h） hs-CRP（mg／L） IL-6（pg／L） CD40L（ng／L）2.1 7.6±1.7 RA 活动组 48 292.5±56.8 41.2±8.2 45.1±11.2 10.6±2.2 8.4±2.7 9.2±2.0 t- 2.044 1.114 3.929 4.124 2.911 4.058 P RA稳定组 42 267.5±59.1 39.5±5.9 36.5±9.3 8.8±1.9 6.9±- 0.044 0.268 0.001 0.001 0.005 0.001

表4 RA患者血小板正常组和血小板升高组检验指标比较（±s）

表4 RA患者血小板正常组和血小板升高组检验指标比较（±s）

-：此项无数据。

组别 n RF（IU／mL） ESR（mm／h） hs-CRP（mg／L） IL-6（pg／L） CD40L（ng／L）50 35.2±6.1 37.1±8.8 8.9±2.0 6.4±3.5 8.1±1.8血小板升高组 40 43.9±7.5 44.6±9.6 10.2±1.7 8.7±3.2 8.9±1.5 t- 6.070 3.858 3.272 3.217 2.253 P血小板正常组- 0.001 0.001 0.002 0.002 0.027

1.2.2 血清CD40L、IL-6及hs-CRP的检测 于清晨空腹抽取静脉血5mL，其中2mL保存于含乙二胺四乙酸（ethylenediaminetetraacetic acid，EDTA）Na＋的抗凝管中，以 2 500 r／min离心10min，取上清液以增强免疫比浊测量法检测hs-CRP的浓度，酶联免疫吸附法检测CD40L、IL-6浓度，试剂盒均购于深圳矩英生物科技有限公司；同时进行血小板计数（blood platelets count，BPC）、RF、ESR等实验室指标检测。

1.3 统计学处理 采用SPSS 17.0软件进行数据处理，计量资料以±s表示，组间比较采用两独立样本t检验，率的比较采用χ2检验，检验标准α＝0.05，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结 果

2.1 RA组与对照组血清炎性因子比较 RA组患者外周血清BPC、RF、ESR、hs-CRP、IL-6及CD40L均明显高于对照组，差异均具有统计学意义（P＜0.05），见表1。

2.2 RA稳定组与活动组血清炎性因子比较 除RF外，RA活动组患者外周血清中BPC、ESR、hs-CRP、IL-6及CD40L均明显高于RA稳定组患者，差异均具有统计学意义（P＜0.05），见表2。

2.3 血小板正常组和血小板升高组检验指标比较 血小板升高组RA患者外周血清中RF、ESR、hs-CRP、IL-6及CD40L均明显高于血小板正常组的RA患者，差异均具有统计学意义（P＜0.05），见表3。

3 讨 论

通常认为RA是一种常见的以关节组织的慢性病变为表现的自身免疫性疾病，众多的炎性因子参与这一病理过程［4］。这些炎性因子之间相互作用而形成了一个炎性细胞因子网络，其中任一环节都可能对RA的病理过程产生影响［5］。近年来，有研究表明hs-CRP、IL-6及CD40L为炎症反应急性发作期的重要非特异性标志物，不仅能对低水平的炎症状态作出区分，还对高水平炎症反应的发生发展及预后关系密切［6-8］。

IL-6是由184个氨基酸组成的糖蛋白，相对分子质量23×103，主要由T淋巴细胞、单核细胞以及纤维母细胞产生，与肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、IL-1等细胞因子一样都是RA患者关节炎症中的主要炎性介质［9］。IL-6虽不能直接刺激软骨细胞以及滑膜成纤维细胞产生前列腺素E（PGE），但能够诱导TNF-α、IL-1或IL-2等细胞因子产生刺激而生成PGE，进而发挥致病作用［6］。金属蛋白酶组织抑制剂（tissue inhibitor of metalloproteinase，TIMP）与基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMP）之间的不平衡可导致关节损伤，IL-6可提高IL-1诱导产生MMP-1和MMP-3的前体化合物，即proMMP-1、proMMP-3，同时也能促进滑膜纤维母细胞产生TIMP，可调节 MMP与TIMP之间的平衡［10］。IL-6可促进细胞间细胞黏附分子-1（intercellular cell adhesion molecule-1，ICAM-1）的表达，ICAM-1是嗜中性粒细胞黏附所必须的重要元素，黏附分子参与并介导多种炎性反应的细胞黏附和跨内皮转移［11］。此外，IL-6还可通过肝脏产生hs-CRP。

hs-CRP是一种由肝细胞合成的急性期反应蛋白，可由TNF-α、IL-1、IL-6及 PGE介导生成［12］。hs-CRP在正常人体外周血中的浓度极低，而在急性感染或组织创伤引起炎症反应时则迅速显著增高。相关文献报道hs-CRP在RA中的升高程度和关节炎活动性存在一定关系，活动期RA患者经对症治疗后，血清中hs-CRP水平随之明显降低［13］。hs-CRP还能与脂蛋白结合，激活补体系统进而产生了大量的炎性介质，氧自由基增多，致使炎症反应加重。体内多种细胞如平滑肌细胞、单核巨噬细胞、血管内皮细胞、血小板等活化后都可产生CD40L，通过CD40-CD40L信号传导通路，诱导单核巨噬细胞、血管内皮细胞等表达趋化因子、黏附分子及选择素等参与调控极体的炎性反应过程［14］。本研究中RA患者外周血血清中hs-CRP、IL-6及CD40L水平均明显高于对照组的健康人群，且RA活动组明显高于稳定组，差异均具有统计学意义（P＜0.05）。提示hs-CRP、IL-6及CD40L可调节机体炎症反应，是RA发生与发展的重要危险因素。

在RA患病过程中常可观察到血小板增高的现象，这种炎症性血小板增多症与RA患者机体IL-1β、IL-4及IL-6等多种细胞因子的活化有关。本研究RA患者中有50例血小板正常者和40例血小板升高者，对两组患者血清hs-CRP、IL-6及CD40L进行了比较，结果显示，血小板升高组RA患者血清RF、ESR、hs-CRP、IL-6及CD40L均明显高于血小板正常组的RA患者，差异均具有统计学意义（P＜0.05），表明hs-CRP、IL-6及CD40L等可使血小板的释放增多。

因此，联合检测血清hs-CRP、IL-6及CD40L，有助于临床观察RA患者的病情变化和治疗效果，具有一定临床应用价值。

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