全自动生化分析仪试剂针携带污染对脂肪酶测定的影响

周丽敏，陈毅聪

(增城市中医医院检验科，广东增城511300)

全自动生化分析仪试剂针携带污染对脂肪酶测定的影响

周丽敏，陈毅聪

(增城市中医医院检验科，广东增城511300)

全自动生化分析仪；脂肪酶；试剂针；交叉污染；清洗

目前，全自动生化分析仪已广泛应用于临床各大、中、小型实验室，全自动生化分析仪具有快速、高效、准确、重复性好及多项目，多样品处理能力等优点。但由于生化分析仪在分析过程中必须共用吸样针、试剂针、搅拌棒以及比色杯，使得交叉污染问题也随之产生。交叉污染分为吸样针、搅拌棒、样品杯及试剂间(试剂针)的交叉污染，其中试剂间的交叉污染常不易发现，具有偶然性,对检测结果影响最为严重。本实验室在实际工作中发现脂肪酶这一生化项目存在不稳定性，个别标本会偏离，但复查后又正常，怀疑存在试剂针交叉污染问题，下面针对脂肪酶这一项目做一试剂间交叉污染试验[1]。

1 材料与方法

1.1 标本取正常人新鲜混合血清100ml。

1.2 材料LPS采用北京利得曼试剂，方法为酶显色法，常规生化项目所用试剂为厦门英科新创试剂，校准品为试剂配套校准品；生化仪为日立7180全自动生化分析仪。

1.3 方法实验前应确保实验环境符合相关实验操作条件，并严格按照仪器生产厂家的操作规程作仪器校准、维护及操作，以确保仪器始终处于正常状态及检测的准确性。试剂确保在有效期内并用配套校准品进行校准。

1.3.1 取适量混合血清，在日立7180生化分析仪上用新鲜混合血清连续测定脂肪酶(LPS)10次结果，结果在50～52U/L，测量结果的均值为51.1U/L，变异系数为1.1%，重复性试验能够满足临床需要。

1.3.2 取适量新鲜混合血清，在日立7180生化分析仪上，先测定一个常规生化项目(污染项目)，再测定LPS(受污染项目)，本实验室34个常规生化项目与LPS逐一配对测试。

1.4 结果判断当脂肪酶测定结果小于平均值95%或大于平均值105%,则强烈支持上一测试项目对LPS存在交叉污染[2]。

2 结果

2.1 初步判断对LPS存在试剂针污染的项目分别为尿酸、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇五个项目，如表1。

表1 测定一个常规生化项目后再测定LPS结果比较

2.2 将疑似对LPS污染项目确定，根据表2，将尿酸、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇五个项目与LPS配对测定，如测定尿酸后，再连续测定LPS3次，结果如表2，对LPS引起污染的项目为总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇，而尿酸项目则可能是其他一些随机误差引起表2的不准确度。

2.3 清洗效果

2.3.1 确定污染项目后，在生化仪上进行特殊清洗功能设置，首先用水清洗，测定次数3次，效果如表3，血脂项目对LPS存在的污染用水清洗没法消除。

2.3.2 在生化仪特殊清洗系统中设置用碱性清洗液清洗后，测定3次结果如表4，血脂项目总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇对LPS存在的污染用碱性清洗液清洗基本可以消除。

表2 测定疑似污染项目后再测定LPS三次结果比较

表3 用水清洗后结果比较

表4 碱性清洗液清洗后结果比较

3 讨论

血清脂肪酶测定是临床生化检验中最常见的项目之一，可用于急、慢性胰腺炎、总胆管结石等多种疾病的辅助诊断，但在日常生化检验工作中，发现LPS项目的检测存在不稳定性，一些标本会出现异常增高，与病人的临床症状不符，将标本复查后又变成正常范围，检查仪器、试剂、校准品、室内质控品等并未发现异常，怀疑存在试剂间的交叉污染[3]。通过上面实验证明血脂项目总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇这四个项目(简称血脂四项)对LPS存在试剂间的交叉污染。查看血脂四项的试剂成份，均含有脂蛋白脂肪酶成分，其中甘油三酯试剂中所含脂蛋白脂肪酶成分最高，因此污染LPS最为严正重。在针对血脂项目对LPS存在试剂间的交叉污染而设置的特殊清洗实验中，发现用碱性清洗液清洗，可消除上述的交叉污染问题。另外据报导,脂肪酶项目的试剂配方中含有钙离子作为激活剂,因此含有钙离子络合剂的试剂对它会发生负干扰，本实验室生化试剂中含钙离子络合剂的试剂并不多，这种负干扰的发生几率较少，因此并未进行这一实验。

在全自动生化分析仪应用过程中，由于生化试剂的组分和含量问题,各项目间常常会出现明显的正干扰或负干扰，这些造成干扰的原因主要来自于试剂的交叉污染，试剂间的交叉污染通常来自于生化仪的试剂针及搅拌棒的携带污染，丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)项目试剂中含有乳酸脱氢酶，对乳酸脱氢酶项目存在正干扰，乳酸脱氢酶、肌酸激酶项目试剂中含有镁，对镁项目测定存在干扰等等，要求检验人员对仪器工作流程、试剂组成、测定原理了如指掌,对试剂交叉污染的各种可能性加以考虑，合理设计程序。合理安排检测项目的顺序，在有交叉污染的检测项目中间插入特殊清洗系统，最好是将被干扰项目置于干扰项目之前,或者干扰项目与被干扰项目间隔5个以上无干扰项目，以消除干扰发生的可能[4]。

[1]杨兆武,明德松.迈瑞全自动生化分析仪血糖试剂交叉污染及排除[J].实验与检验医学,2012,30(1):98-99.

[2]于嘉屏.全自动生化分析仪及其试剂间化学污染对检测结果的影响．中华检验医学杂志[J].2007,30(11):1301-1302.

[3]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].第3版.南京:东南大学出版社,2006:431-434.

[4]汪仙德,程金莲.EDTA-K2对血糖、血脂和肾功能检测的影响[J].实验与检验医学,2013,31(1):82-83.

R446.11+2

B

1674-1129(2013)03-0288-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2013.03.039