飞扬草有效成分的定性分析

黄 毅 郑维思 郑莹莹 彭东洲 谭 红

广东省珠海市慢性病防治站，广东 珠海 519000

飞扬草有效成分的定性分析

黄 毅 郑维思 郑莹莹 彭东洲 谭 红

广东省珠海市慢性病防治站，广东 珠海 519000

目的：对飞扬草进行化学成分初步研究。方法：采用化学法和HPLC法对飞扬草水提液、乙醇提取液、石油醚提取液进行化学成分系统预试，对其化学成分进行分析鉴别。结果：通过化学鉴别，初步推断其主要含有糖和苷类、氨基酸、酚类或鞣质、有机酸、甾体或三萜类和黄酮成分；进一步采用HPLC法对其提取物中所含的多酚类成分进行鉴别，可检测出没食子酸和槲皮素。结论：该研究提示飞扬草提取物可能含有的化学成分的种类，为其开发利用提供了实验基础。

飞扬草；鉴别；化学法；薄层色谱法

飞扬草（Euphorbiae hirtae herba）为大戟科大戟属（Euphorbia）植物，又名飞扬、脚癣草、大乳汁草、奶子草、天泡草等，为一年生草本。分布于热带与亚热带，在我国广泛分布于南方地区，主产广东，资源十分丰富，是南方民间临床作为外用，应用于湿疹、皮炎及顽癣疗效显著的一味常用草药，在民间广为流传。飞扬草有清热解毒、杀虫止痒功效，可用于治疗肠炎、菌痢、上呼吸道感染、尿路感染，还可通乳，消肿，治疗各种出血［1］。本文通过化学法和HPLC法，研究了飞扬草提取物化学成分的主要类别，为其进一步研究开发提供科学依据。

1 仪器与试药

岛津LC－20A型高效液相色谱仪，岛津SPD－20A紫外检测器；Sartorius BS分析天平；C5860A型超声波清洗器；没食子酸对照品（批号110831－200803）、芦丁对照品（批号100080－200707）购于中国药品生物制品检定所；槲皮素对照品（批号090426，纯度＞98%，上海融禾医药有限公司），飞扬草（采自珠海，风干粉碎，备用。）；试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 化学法鉴别［2］根据药材成分在各种溶剂中溶解度的不同，分别采用水、乙醇、石油醚（60－90℃）提取，进行化学鉴别。

2.1.1 水浸液的化学鉴别 飞扬草粗粉10g加水100ml，在50－60℃的水浴上加热1h后过滤，滤液作为供试品溶液，按表1中的项目进行化学鉴别。

2.1.2 乙醇提取液化学鉴别［3］取10g飞扬草粗粉，加100ml乙醇，沸水浴中回流提取1小时（若以叶子为原料，要除叶绿素，方法是滤液加水稀释成70%浓度，加等量石油醚萃取叶绿素，分出下层70%乙醇层，按下列步骤操作），滤过。滤液回收乙醇至无醇味，取1/2量浓缩液，加10ml乙醇溶解，供甲项检识。剩余的浓缩液加10ml 5%盐酸，充分搅拌，滤过，滤液部分供乙项检识。酸水不溶部分，加10ml醋酸乙酯溶解，醋酸乙酯液用5%氢氧化钠溶液振摇洗涤2次（每次2～3ml），弃去碱水层。醋酸乙酯层再用蒸馏水洗1～2次，至水洗液呈中性，弃去水洗液，置于水浴上蒸发除去醋酸乙酯，残留物用15ml乙醇溶解，供丙项检识。

表1 样品水浸液的化学鉴别

表2 样品乙醇提取液化学鉴别－甲项检识

鉴别项目 化学反应 反应阳性判别依据甾体或三萜类（1）氯仿－浓硫酸反应 氯仿层显红色或青色，硫酸层白色沉淀蒽醌 碱液反应 加入10%KOH液，若显红色或紫红色，加酸后颜色消失。有绿色荧光（2）三氯化锑－三氯甲烷反应

表3 样品乙醇提取液化学鉴别－乙项、丙项检识

2.1.3 石油醚提取液化学鉴别 取2g中药粗粉，加10ml石油醚，室温下浸渍提取2～3小时，滤过，滤液作为供试品溶液，按表4中的项目进行化学鉴别。

表4 样品石油醚提取液化学鉴别

2.1.4 药材直接化学检识

表5 药材直接化学检识

2.1.5 结果 结果见表6。

表6 样品提取液的化学鉴别

注：＋：化学反应阳性 ＋＋：化学反应现象较明显 ＋＋＋化学反应现象很明显 －：化学反应阴性

2.2 有机酸及多酚类成分的HPLC鉴别

2.2.1 供试品溶液的制备

样1：取飞扬草细粉l g，精密称定，加入水50 ml、加热回流1小时，滤过，定容至50 m l作为供试液。

样2，3：取飞扬草细粉 l g，精密称定，分别加入50ml50%乙醇、乙醇超声提取30分钟，滤过，定容至50 ml作为供试液。

样4：取飞扬草细粉l g，精密称定，加入盐酸－甲醇（1：20）50 ml回流60分钟，迅速冷却至室温，过滤，残渣加少量甲醇洗涤，洗液并入滤液中，转移至50 m l量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45 m）过滤，取续滤液，即得。

2.2.2 对照溶液的制备 分别取没食子酸、槲皮素、芦丁对照品适量，精密称定，加甲醇制成浓度为每1m l分别含40μl的溶液，即得。

2.2.3 色谱条件 色谱柱：CLC—ODS柱（250 mm×4.6 mm，5m）。检测波长256 nm，柱温40℃，流速1ml/min，进样量10ul。流动相：溶剂A，0.5%（体积分数）甲酸；溶剂B，甲醇；梯度洗脱。

2.2.4 结果 结果如图1所示。

3 讨论

3.1 系统预试法，即在未知情况下对植物中可能含有的各类成分进行比较全面系统的定性检查。本试验采用植物化学成分系统预试法，对飞扬草提取物进行了化学成分研究，初步推断飞扬草中主要含有糖和苷类、氨基酸、酚类或鞣质、有机酸、甾体或三萜类和黄酮成分。

3.2 如图1所示，分别采用水、50%乙醇和95%乙醇提取样品，HPLC指纹图谱较为相似，但随乙醇浓度的增加，没食子酸及tR为11.5、24.5的成分量有所减少。

3.3 甲醇提取液经酸水解样品，原tR为26.5和21.5min左右的峰减小，24.5左右的峰增大，并出现了槲皮素的峰。说明原药材中可能含有槲皮苷类的成分。样品中芦丁峰不明显。3.4 水提取样品及甲醇提取液经酸水解样品中含有没食子酸，乙醇提取液中未检出。根据没食子酸易溶于乙醇的性质，且其为可水解鞣质的结构单元，加热提取及酸水解会使可水解鞣质水解而转化成没食子酸，可推测出原药材中含有鞣质。

［1］章佩芬，罗焕敏.飞扬草药理作用研究概况［J］.中药材，2005，28（5）：437.［2］肖崇厚，畅松松.洪筱坤，等.中药化学［M］.上海：海科学技术出版社，1997：595.

［3］国家药典委员会.中国药典（I部）［S］.北京：化学工业出版社，2010：46.

Qualitative Analysis on Effective Constituents of Euphorbiae hirtae herba

HUANG Yi，ZHEN WeiSi，ZHENG Yingying，PENG dongzhou，TAN Hong
（Zhuhai Chronic Disease Prevention And Control Station，GUANG DING，Zhuhai，519000，China）

Objective：To analyze the effective constituents of Euphorbiae hirtae herba.Methods：Used the method of systematic pretest and HPLC to identify its chemical composition in the ethanol extract，water extract and ligroin extract。Results：It is concluded that Euphorbiae hirtae herba might contain carbohydrates and their glycosides，amino acids，phenols and tannin，organic acids，steroidal triterpene，flavonoids.The results of HPLC showed that Gallic acid and Quercetin can be found in the extract.Conclusion：The research shows the kinds of the chemical compositions in the Euphorbiae hirtae herba and provides evidence for its further development and utilization of the drug resources.

Euphorbiae hirtae herba；identification；chemical methods；HPLC

R284.1

A

1007－8517（2013）06－0026－02

2013.01.25）