刘辉,李桂珍,刘琳,宋林
(天津市中医药研究院附属医院检验科,天津300120)
·经验交流·
科玛嘉真菌显色培养基的临床应用
刘辉,李桂珍,刘琳,宋林
(天津市中医药研究院附属医院检验科,天津300120)
VITEK2Compact-YBC全自动微生物鉴定仪;科玛嘉念珠菌显色培养基(CHROMagar);沙保罗琼脂培养基
随着免疫抑制剂、激素、广谱抗生素、抗癌药物的广泛使用,器官移植、各种侵袭性操作、骨髓移植等技术应用增多,临床上念珠菌的感染率逐年呈上升趋势[1]。科玛嘉念珠菌显色培养基(CHROMagar)是通过菌落的不同颜色和不同形态特征来快速分离培养鉴定真菌的培养基[2]。自2012年4月至2012年11月,共收集我院1138例住院标本,检测结果报告如下。
1.1 标本来源自2012年4月至2012年11月,主要是本院住院病人的痰、尿、分泌物、咽拭子等标本1138例,其中痰462例(占40.6%),尿241例(占21.2%),分泌物194例(占17.1%),咽拭子118例(占10.4%),其他类型的标本123例(占10.7%)。
1.2 培养基和仪器科玛嘉念珠菌显色培养基(CHROMagar)系天津市金章科技发展有限公司产品;VITEK2Compact全自动微生物鉴定仪;YBC鉴定卡均为法国生物梅里埃公司产品。
1.3 质控菌株为克柔念珠菌ATCC6258。
1.4 念珠菌的分离每例标本首先按《全国临床检验操作规程》(第3版)分别接种于沙保罗培养基经35±2oC培养,24~48h观察结果。对沙保罗培养基上生长的菌落,分别涂片、革兰染色、镜检,确认有孢子和菌丝的真菌阳性标本共385例,进一步作菌种的鉴定。
1.5 念珠菌的鉴定将已确认分离的385例念珠菌,分别接种CHR显色培养基和VITEK2Compact-YBC鉴定卡,经35±2oC培养,24~48h观察结果。
1138例标本共培养出385例念珠菌,其中316例为CHR显色培养基可鉴定株,主要为四种临床常见念珠菌,占总株数的82.1%,而CHROMagar直接鉴定法与VITEK2Compact仪器法鉴定符合百分比率为92.7%(见表1)。
表1 VITEK2与CHR显色培养基两种鉴定方法符合率的比较
科玛嘉念珠菌显色培养基鉴定出的4种临床常见念珠菌,分别为白念珠菌(51.2%)、热带念珠菌(15.8%)、光滑球拟念珠菌(10.6%)、克柔念珠菌(4.4%),充分表明CHR显色培养基能鉴定出临床常见的82%以上的念珠菌,可应用于临床念珠菌的常规鉴定[3]。白念珠菌仍然是最常见深部念珠菌感染的病原菌,其菌丝形成速度快,菌丝与芽管相对不易被吞噬,致病性强,因此使其成为真菌感染的主要菌种[4]。
由于念珠菌显色培养基对不同酵母菌菌落呈现不同颜色及形态差异,据此使用CHR培养基,可对念珠菌作出初步判断。对于4种临床常见念珠菌其与VITEK2鉴定符合百分率达到了92.7%,且从CHR念珠菌显色培养基上分离到的念珠菌对VITEK2确认无任何影响。对于少数在科玛嘉显色培养基上不能直接鉴定到菌种的念珠菌,可用VITEK2Compact-YBC卡来鉴定。不同念珠菌在
CHR培养基上生长颜色差异,菌落特征均很鲜明,可初步鉴定真菌的混合菌株,为准确鉴定创造了条件。
念珠菌的分离培养、鉴定通常采用沙保罗琼脂培养基增菌、纯化,通过细菌形态学观察、生化反应、血清学实验等步骤来综合分析鉴定细菌的种群。法国梅里埃公司生产的VITEK2Compact-YBC微生物鉴定卡是一种很好的方法,但设备及试剂价格昂贵,操作时间也很长,无法提供快速鉴定结果。科玛嘉显色培养基鉴定念珠菌的菌型,具有操作简便、快速、准确的特点,并且可以鉴定念珠菌感染的混合菌型。
[1]杨国灿,吴国桥.全自动细菌培养仪用于真菌培养的可行性初探[J].实验与检验医学,2008,26(1):83.
[2]金云,江情,李智华,等.API20C和科玛嘉显色培养鉴定假丝酵母菌的比较[J].实验与检验医学,2010,28(5):497-498.
[3]王丽.科玛嘉念珠菌显色培养基的临床应用评价[J].检验医学, 2011,8(28):81-82.
[4]王世恒,史燕顺,张帆.255株真菌菌株鉴定与药敏分析[J].国际检验医学杂志,2011,32(20):2410-2411.
R446.5
B
1674-1129(2013)02-0190-02
10.3969/j.issn.1674-1129.2013.02.037