菌草杏鲍菇菌糟饲用安全性毒理学评价

■陈晓斌 张双双 林冬梅 罗海林 林 辉 林兴生 林占熺

(福建农林大学生命科学学院菌草研究所，福建福州 350002)

菌草杏鲍菇菌糟饲料是指以五节芒、芒萁、类芦、巨菌草等常见菌草为培养基主料，添加麸皮、玉米粉、石膏等辅料组成的培养基栽培杏鲍菇，采摘杏鲍菇子实体后剩余的培养料，经晒干粉碎后作为动物饲料原料或饲料添加料。菌糟由纤维素、半纤维素、木质素、粗蛋白、碳水化合物、水分、无机盐以及菌丝体等成分组成。菌糟中含有丰富的菌丝体，菌丝体含有多糖、甾醇、菌丝蛋白等活性物质；同时菌糟还含有经菌丝分解来的木质素、纤维素、半纤维素等，含有丰富的氨基酸、矿质元素等，其营养价值相当于糠麸类饲料。

饲料的安全性是关系到动物性食品安全的关键性所在，饲料往往是众多病毒、毒素、病原菌的重要传播途径，其中所含的有毒、有害物质可以通过食物链最终进入人体，危害人类健康。菌草杏鲍菇菌糟作为一种新型的饲料资源，其作为饲料资源的饲用安全性一直受到人们的重视，而这一点也是其饲用价值开发的关键，但其毒理学方面安全性评价未见相关文献报道。本文通过对菌草杏鲍菇菌糟进行小白鼠的急性毒性试验、30 d喂养试验对菌草杏鲍菇菌糟进行安全性毒理学评价说明，以期对菌草杏鲍菇菌糟饲料产品开发提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 菌草杏鲍菇菌糟

菌草杏鲍菇菌糟收集：菌草杏鲍菇菌袋采收子实体后，选取菌丝洁白无杂菌污染的菌袋，去掉外层塑料袋，用手将菌糟掰成小块，用菌草粉碎机粉碎成草粉状，放于铺有塑料布的水泥平台上晾晒，待菌糟充分干燥后，用大型菌草粉碎机粉碎成粗粉状，作为菌糟饲用安全性毒理学试验用菌糟原料。

1.1.2 急性毒性试验菌草杏鲍菇菌糟水提浓缩液

称取20 g菌草杏鲍菇菌糟，在料水比为1∶20、水浴温度为90℃、提取时间3 h条件下进行水提，提取3次，得到菌草杏鲍菇菌糟水提液，合并3次水提液，用旋转蒸发仪浓缩至0.5 g/ml。

1.1.3 30 d喂养试验小白鼠基础日粮饲料

对照组饲喂小白鼠常规颗粒饲料，试验组小白鼠饲喂分别用菌糟替代5%、15%、25%基础日粮的颗粒饲料，饲料由福建医学科学研究院动物实验室加工完成。

1.2 试验动物

昆明系小白鼠，购于福建省医学科学研究院动物实验室。

1.3 试验方法

1.3.1 菌草杏鲍菇菌糟小白鼠急性毒性试验

取体重为19～21 g昆明系小白鼠，雌雄各10只。采用最大耐受剂量法，受试物给予1次灌胃，灌胃剂量为0.8 ml/20 g。试验前小白鼠禁食（不禁水）16 h，连续观察7 d，记录动物的中毒表现及死亡情况。方法参照国标GB/T 15193.3—2003急性毒性试验方法进行。

1.3.2 菌草杏鲍菇菌糟30 d喂养试验

取体重为18～21 g昆明系小白鼠40只，雌雄各半。试验分为3个试验组和1个对照组，对照组饲喂小白鼠基础日粮颗粒饲料，试验组分别饲喂菌糟替代不同比例小白鼠基础日粮的颗粒饲料。

试验期37 d，其中预试期（7 d）以试验日粮逐步替代基础日粮，小白鼠适应菌草菌糟饲料后再进行正式试验，正式期30 d，试验期间自由采食和饮水。每天定时投料及称量剩料，计算小白鼠的采食量。每周一早上9：00空腹称量小白鼠的体重，计算小白鼠体重的增重情况。同时试验期间观察小白鼠的采食情况、精神行为等情况，详细记录并分析原因。试验结束后，全部小白鼠空腹眼眶取血，进行血常规分析。致死，进行解剖，准确称量各脏器重量，计算小白鼠脏器指数。试验方法参照国标GB 15193.13—2003 30 d和90 d喂养试验方法进行。

1.4 数据分析

采用Excel 2010对数据进行处理，DPS 7.05软件进行单因素LSD方差分析。

2 结果与分析

2.1 菌草杏鲍菇菌糟小白鼠急性毒性试验结果

用菌草杏鲍菇菌糟水提浓缩液进行小白鼠急性毒性试验灌胃后，开始时小白鼠活动减少，行动缓慢，身体有少量颤抖，2 h后恢复正常，连续观察1周，小白鼠无死亡、中毒等不良现象发生。菌草杏鲍菇菌糟急性毒性试验最大灌胃剂量为20 g/kg，根据急性毒性试验剂量分级标准，菌草杏鲍菇菌糟属于无毒级。

2.2 菌草杏鲍菇菌糟30 d喂养试验结果

2.2.1 小白鼠健康状况

在30 d的试验周期内，各组小白鼠均无不良反应发生，日常行为活泼，毛色顺滑光亮，雌、雄间无差异。

2.2.2 小白鼠体重增长情况

小白鼠体重增长情况见表1、图1，可以看出对照组与试验组小白鼠体重增长趋势基本一致，随着菌草杏鲍菇菌糟在小白鼠日粮中的比例越高，小白鼠的总增重越低。

表1 各组小白鼠体重增重情况（g/只）

图1 各组小白鼠周期内平均体重变化情况

2.2.3 试验期内各组小白鼠料重比

试验期内各组小白鼠料重比见表2、图2，试验组各组试验期内平均日采食量均高于对照组，菌草杏鲍菇菌糟含量越高，其料重比越高，可能与改变其饲料的营养价值有关。

2.2.4 各组小白鼠脏器外观变化

各组小白鼠胸腺、甲状腺和心、肝、脾、肺、肾等器官外观正常，病理学检查未见异常、无特殊的病理学变化。

表2 试验周期内各组小白鼠料重比

图2 试验周期内各组小白鼠料重比分析

2.2.5 各组小白鼠脏器系数（见表3）

由表3可知，各组小白鼠胸腺系数及脏器系数经方差分析差异不显著（P＞0.05）。

2.2.6 各组小白鼠血常规检测

小白鼠血常规检测见表4，其中试验1组的血红蛋白、红细胞含量略高于对照组与其它试验组，但试验组与对照组血液中血红蛋白、红细胞、白细胞、淋巴细胞含量差异不显著（P＞0.05），说明菌草杏鲍菇菌糟对小白鼠血常规中的4项指标基本无影响。

表3 各组小白鼠脏器系数

表4 各组小白鼠血常规检测

3 讨论

菌草杏鲍菇菌糟急性毒性试验最大灌胃剂量为20 g/kg，根据急性毒性试验剂量分级标准，菌草杏鲍菇菌糟属于无毒级。30 d喂养试验，试验期内小白鼠的增重量随着菌糟替代量增加而下降，25%组小白鼠增重量最低，其可能的原因是菌草杏鲍菇菌糟替代的同时，未调整试验组与对照组基础日粮的营养及能量水平，所以小白鼠增重量受到了影响。但随着菌草杏鲍菇菌糟添加量的增加，小白鼠的平均日采食量并没有受到影响，菌草杏鲍菇菌糟适口性较好，但过多添加会影响其增重量。试验后对小白鼠进行解剖，发现各试验组小白鼠胸腺、甲状腺和心、肝、脾、肺、肾等器官外观正常，病理学检查、脏器系数、血常规检测均未见异常。

4 结论

试验结果表明，菌草杏鲍菇菌糟作为饲料原料应用是安全的，无毒副作用。