不同豆粕酶解发酵物对仔猪生长性能、血液生化指标、抗氧化能力的影响研究

■魏金涛 杨雪海 赵 娜 李绍章 郭万正 黄少文 严念东 张 巍

（湖北省农业科学院畜牧兽医研究所，湖北武汉 430064）

豆粕是饲料加工及畜禽养殖中应用十分广泛的蛋白质饲料原料，但是豆粕中含有大量的抗营养因子，诸如胰蛋白酶抑制因子、大豆抗原蛋白、寡糖等，限制了其在幼龄动物中的使用。微生物发酵可以降低或消除豆粕中部分抗营养因子，如大分子蛋白被降解为小分子蛋白、植酸磷被降解为无机磷，提高了豆粕的营养价值。酶解也是改善豆粕蛋白质特性的一种很好的方法，大豆蛋白酶解物具有比大豆蛋白相同组成氨基酸更丰富的加工特性、营养特性和生理功能。陈美珍等（2002）研究认为，大豆蛋白酶解物对Fenton体系产生的羟自由基有清除作用。潘翠玲等（2006）利用大豆蛋白酶解物替代动物蛋白饲喂21日龄断奶仔猪发现，大豆蛋白酶解物能克服早期断乳应激引起的仔猪食欲下降、腹泻和生长迟滞等不良现象，对早期断乳仔猪脏器的生长有一定的促进作用，而且对早期断乳应激引起的内分泌紊乱也有一定的调节和改善作用。但是，单纯发酵耗时长、损耗大、效率低；单纯酶解虽然耗时短、损耗小、效率高，但是杂菌增殖难以控制，在酶解过程中加入益生菌发酵可以有效地抑制大肠杆菌等杂菌的增殖。本试验即将木瓜蛋白酶和不同益生菌进行复合对豆粕进行酶解和发酵，研究豆粕的酶解发酵物对仔猪的生产性能、血液生化指标及抗氧化性能的影响。

1 材料与方法

1.1 试验动物

试验在武汉市金鹰牧业有限公司一厂进行。选择健康阉公猪[(15.15±0.32)kg]24头，随机分为4组，每组6个重复，每个重复1头猪，每头猪单栏饲养。

1.2 豆粕酶解发酵物的制备

取塑料桶3个，每个桶中均加入800 g粉碎过1.5 mm筛片的豆粕和木瓜蛋白酶（按300 U/g添加），分别按2×108cfu/g接种量接种酵母菌（试验1组）、植物乳杆菌（试验2组）和酵母菌和植物乳杆菌（试验3组）后加入37℃温水2.8 kg，置于37℃恒温培养箱中酶解发酵24 h，备用。饲喂用的豆粕酶解发酵物均需提前1 d进行制备，每天7：00和15：00各制备1次。

1.3 试验日粮

对照组饲喂基础日粮，试验组日粮用豆粕酶解发酵物同比例替代基础日粮中豆粕的10%，基础日粮的配方及营养水平见表1。

3个试验组饲料饲喂前均添加自来水做成湿拌料，精确计算水的添加量，保证加入的水占配合饲料的25.9%。

1.4 饲养管理

试验猪预饲7 d后空腹称重后正式开始试验，每天7：30和15：30准时饲喂，自由采食、自由饮水，当日饲喂，当日用完，第2 d早上喂料前先清理料槽中的剩料。正式试验期28 d，28 d后空腹称重。称重时从每组中挑选3头平均大小的仔猪进行前腔静脉采血。采血后立刻离心(2 000 r/min、离心10 min)，分离的血清储存于-20℃冰箱中保存备用。

1.5 试验方法

常规营养成分含量参照张丽英方法进行。

血清尿素氮、白蛋白、球蛋白、总蛋白浓度及碱性磷酸酶、丙氨酸转氨酶活性等生化指标，总抗氧化能力、超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量等血清抗氧化性能指标采用南京建成生物工程研究所试剂盒测定，按照试剂盒说明书严格操作。

表1 试验日粮配方及营养水平（风干基础）

1.6 统计分析

用SPSS19.0统计软件进行单因素方差分析，并进行Duncan's法多重比较。

2 试验结果

2.1 不同豆粕酶解发酵物对仔猪生长性能的影响（见表2）

从表2可以看出，饲喂添加10%不同豆粕酶解发酵物的仔猪平均日增重和对照组相比分别显著提高了 7.46%、9.29%和10.58%（P＜0.05）。平均日采食量方面，饲喂添加酵母菌和木瓜蛋白酶进行酶解发酵的豆粕酶解发酵物组(试验1组)和对照组相比提高了4.88%，但差异不显著（P＞0.05）；饲喂添加乳酸菌和木瓜蛋白酶进行酶解发酵的豆粕酶解发酵物仔猪(试验2组)，饲喂添加乳酸菌、酵母菌和木瓜蛋白酶进行酶解发酵的豆粕酶解发酵物仔猪（试验3组）平均日采食量分别比对照组显著提高了7.15%和8.52%（P＜0.05）。

2.2 不同豆粕酶解发酵物对仔猪血液生化指标的影响（见表3）

表3 不同豆粕酶解发酵物对仔猪血液生化指标的影响

从表3可以看出，血液生化指标方面，饲喂添加10%豆粕酶解发酵物的仔猪血清总蛋白、白蛋白、球蛋白、尿素氮的含量均和对照组相比没有显著性差异（P＞0.05）；血清碱性磷酸酶和丙氨酸转氨酶活性方面，饲喂乳酸菌、酵母菌和木瓜蛋白酶同时进行酶解发酵的豆粕酶解发酵物组(试验3组)显著高于对照组和酵母菌、木瓜蛋白酶酶解发酵组(试验1组)（P＜0.05），丙氨酸转氨酶活性高于乳酸菌、木瓜蛋白酶酶解发酵组(试验2组)，而碱性磷酸酶活性低于乳酸菌、木瓜蛋白酶酶解发酵组（试验2组），但是没有显著性差异（P＞0.05）。

2.3 不同豆粕酶解发酵物对仔猪抗氧化性能的影响

试验测定了仔猪血清中超氧化物歧化酶（SOD）酶活、丙二醛（MDA）含量和总抗氧化能力（T-AOC），结果见表4。从表4可以看出，饲喂豆粕酶解发酵物仔猪血清中所测的抗氧化能力指标均显著优于对照组（P＜0.05），但是饲喂3种豆粕酶解发酵物仔猪血清中抗氧化能力没有显著性差异（P＞0.05）。

表4 不同豆粕酶解发酵物对仔猪抗氧化性能的影响

3 讨论

3.1 豆粕酶解发酵物对仔猪生长性能的影响

豆粕中蛋白质分子较大，结构紧密，而且还含有β-伴大豆球蛋白等抗营养因子，将豆粕用微生物及蛋白酶进行酶解或发酵均可以改变其中营养物质的物理和化学结构，大豆蛋白的抗原性可以得到有效的消除，大分子的大豆蛋白降解为小分子蛋白、小肽及游离氨基酸；同时，还可以减少或者消除豆粕中的脲酶、植酸磷等抗营养因子，从而提高饲料转化率。Kiers等(2003)认为仔猪的消化酶系统尚未发育完全，对于植物蛋白质的消化能力弱，而发酵豆粕中含有丰富的植物源蛋白多肽，易于幼龄动物消化吸收。饲喂发酵豆粕后可显著提高仔猪的生产性能。刘欣等（2007）用微生物发酵豆粕替代断奶仔猪饲粮中的普通豆粕后发现，发酵豆粕对改善断奶仔猪消化道的应激反应有良好作用，且适口性良好，饲喂微生物发酵豆粕使仔猪料重比显著降低了5.56%。章世元等（2009）用发酵豆粕替代仔猪饲料中的豆粕后发现，试验仔猪的生长性能显著提高。蔡国林等（2008）用酵母菌和乳酸菌混合发酵豆粕饲喂肉猪，结果表明，发酵豆粕可以改善肉猪平均增重、料重比。本试验使用3种不同豆粕酶解发酵物等比例代替豆粕饲喂仔猪，仔猪的平均日增重、平均日采食量和料肉比等生长性能均得到了一定程度的改善，和前人研究结论一致。但本试验没有进行梯度试验，下一步工作应对豆粕酶解发酵物在仔猪日粮中适宜的添加量进行系统的研究。

3.2 豆粕酶解发酵物对仔猪血液生化指标的影响

血清中尿素氮的水平反映了血液中氨基酸合成蛋白质效率的高低，血清尿素氮降低反映了动物蛋白质合成代谢增强，反之则减弱。血清碱性磷酸酶作为具有遗传标记的同工酶，其活性高低可以反映动物的生长速度和生产性能，其活性与猪的平均日增重、钙磷的利用率均呈正相关。本试验结果发现，饲喂豆粕酶解发酵物的仔猪血清尿素氮含量有所降低，而碱性磷酸酶活性和对照组相比有一定程度提高，说明仔猪饲喂豆粕酶解发酵物后有着较好的生长速度，这一点也证实了豆粕酶解发酵物对仔猪的生长性能具有提高作用。

3.3 豆粕酶解发酵物对仔猪血液抗氧化能力的影响

机体防御体系的抗氧化能力的强弱与健康程度存在着密切的联系，该防御体系（包括SOD、GSH-Px、CAT等）各成分之间相互起到了协同的作用，以及代偿作用与依赖作用。该防御体系能使Fe3+还原成Fe2+，后者可与菲林类物质形成稳固的络合物，通过比色可测出其总抗氧化能力（TAOC）的高低。SOD能清除超氧阴离子自由基，保护细胞免受伤害。机体通过酶系统与非酶系统产生氧自由基，后者能攻击生物膜中的不饱和脂肪酸，引发脂质过氧化作用，并因此形成脂质过氧化物，如MDA（丙二醛）。MDA浓度的高低又间接反映了机体细胞受自由基攻击的严重程度。本试验结果表明，饲喂豆粕酶解发酵物仔猪血清中SOD、T-AOC活性显著高于饲喂豆粕的对照组，而MDA含量显著低于饲喂豆粕的对照组，说明豆粕酶解发酵物具有提高仔猪机体抗氧化能力的作用。

4 结论

豆粕酶解发酵物对仔猪具有较好的促生长、抗氧化的作用，可以作为仔猪良好植物性蛋白质饲料原料应用。

（参考文献19篇，刊略，需者可函索）