山蜡梅化学成分研究*

★ 舒任庚 郑颖 张娣

(江西中医学院 南昌 330004)

山蜡梅化学成分研究*

★ 舒任庚**郑颖 张娣

(江西中医学院 南昌 330004)

目的：研究山蜡梅(ChimonanthusnitensOliv.)叶中的化学成分。方法：利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、制备色谱等方法分离纯化化合物，利用理化性质、核磁光谱数据解析化合物结构。结果：鉴定了7个化合物的化学结构，分别为：(1)d-夏蜡梅碱,(2)6,7-二甲氧基香豆素，(3)东莨菪内酯，(4)槲皮素，(5)山奈酚,(6)紫云英苷，(7)1,8-松油二醇，其中化合物6和7为首次从该植物中分得。

山蜡梅；化学成分；结构鉴定

山蜡梅为我国特有的植物蜡梅科蜡梅属山蜡梅(ChimonanthusnitensOliv.)的叶，椭圆形、卵状披针形或卵状椭圆形，具有芳香气味。又称之为野蜡梅(《云南中药资源名录》)，亮叶蜡梅(《经济植物手册》)，毛山茶、岩马桑(《新华本草纲要》)，香风茶(《安徽中草药》)，民间使用历史悠久，常用叶泡茶饮以防止感冒。目前已分得的化学成分主要为：挥发油类、黄酮类等化合物。为了进一步系统研究山蜡梅生物活性的物质基础，挖掘该植物的药用价值并为其资源的综合开发应用提供科学依据，本课题拟对其化学成分进行系统深入的研究，以期有新的发现。

1 仪器与材料

1.1 仪器

BRUKER DRX-500型核磁共振波谱仪，X4型显微熔点测定仪，数显恒温水浴锅(HH-2)，旋转蒸发器(RE-52)，超声波清洗器KQ-250DB，循环水真空泵SHE-DC(III)，汇通LC600型高效液相中压恒流色谱仪，汇通C18中压柱(26cm×31cm，30-50μm)。

1.2 材料

试剂：石油醚，四氯化碳，氯仿，乙酸乙酯，丙酮，甲醇，均为分析纯。药材：山蜡梅，采自江西省上饶市婺源县晓起镇上台村深山丛林(野生)，经江西中医学院药学院药用植物学教研室葛菲教授鉴定为蜡梅属植物山蜡梅(ChimonanthusnitensOliv.)的鲜叶，阴干后进行实验。

2 化合物的提取分离

提取：2009年7月份采摘山蜡梅鲜叶，阴干，约12kg，分4次用提取罐提取(80%乙醇)，每次3h，回收溶剂，得总浸膏约2 700g。总浸膏分次用0.5%H2SO4溶解，抽滤，将酸水合并，减压浓缩，加氨水调PH值约12，抽滤，得少量沉淀。碱水液用氯仿萃取至检识无显色。回收氯仿得浸膏与沉淀合并，称量约73.4g。分离：200-300目硅胶湿法装柱，干法上样，氯仿-甲醇梯度洗脱，每流份500mL，共收集42份。经硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、制备色谱反复分离纯化，得化合物1(78.3mg)、化合物2(2.3mg)、化合物3(2.4mg)、化合物4(2.1mg)、化合物5(2.5mg)、化合物6(26.09mg)、化合物7(26.3mg)、化合物8(5.9mg)。

3 化合物的结构鉴定

化合物1-d-夏蜡梅碱：深红色羽状结晶(氯仿)，改良碘化秘钾试剂、碘-碘化钾试剂、硫酸铈-硫酸试剂检测均呈阳性，mp:195-197℃。1H-NMR(DMSO，500MHz)δ：6.92(2H，d，J=7.0Hz，H-4,4')，6.64(2H,t,J=7.5Hz，H-6,6')，6.30(2H，s， N-H)，6.29(2H,t,J=7.5Hz，H-5,5'),6.22(2H,d,J=7.0Hz,H-7,7'),4.21(2H,s,H-8a,8a')，3.01(2H,dt,J=13.0Hz，5.0Hz，H-3,3')，2.44(2H,dd, J=13.0 Hz,3.0 Hz,H-2,2')，2.26(6H,s,2×NCH3)，2.05(2H,dt, J=13.0 Hz,5.0 Hz,H-2,2'), 1.04(2H,dd, J=13 Hz,3.0 Hz ,H-3,3')。13C-NMR(DMSO，500MHz)δ：146.32(C-7a,C-7a'),125.91(C-6，C-6'),124.63(C-4，C-4'),124.53(C-3b,C-3b'),114.75(C-5，C-5'),111.15(C-7，C-7'),69.55(C-8a，C-8a'),46.14(C-2，C-2'),42.54(N-CH3，N-CH3')，35.32(C-3a，C-3a'),31.84(C-3,C-3')。将该化合物的波谱数据与文献报道[1,2]数据比较，二者数据基本一致。故鉴定化合物1为d-夏蜡梅碱(d-Calycanthine)。

化合物2-6,7-二甲氧基香豆素：无色针状结晶(氯仿)，mp：142-143℃。紫外光λ=254nm下有强烈蓝紫色荧光。与6,7-二甲氧基标准品混合，3种不同体系的展开剂展开，TLC分析均显示为单一斑点，且混合熔点不下降，故鉴定化合物2为6,7-二甲氧基香豆素(6,7-dimethoxycoumarin)。

化合物3-东莨菪内酯：淡黄色针状结晶(氯仿)，mp：209-210℃。紫外光λ=254nm下有蓝紫色荧光。与东莨菪内酯标准品混合，三种不同体系的展开剂展开，TLC分析均显示为单一斑点，且混合熔点不下降，故鉴定化合物3为东莨菪内酯(Isoscopletin)。

化合物4-山奈酚：浅黄色针状结晶(氯仿)，mp：204-205℃。与山奈酚标准品混合点样，3种不同体系的展开剂展开，均显示为单一斑点，且混合熔点不下降，故推断化合物4为山奈酚(Kaempferol)。

化合物5-槲皮素：淡黄色针状结晶(氯仿)，mp：318-319℃。与槲皮素标准品混合点样，3种不同体系展开剂展开，均显示为单一斑点，且混合熔点不下降，故推断化合物5为槲皮素(Quercetin)

化合物6-紫云英苷：黄色结晶(甲醇)，mp：170-171℃。1H-NMR(DMSO，500MHz)δ：12.63(1H,s,H-5)，10.92(1H,br，H-7)，10.25(1H,br，H-4')，8.05(2H,d,H-2',6')，6.90(2H,d,H-3',5')，6.45(1H,d，H-8)，6.22(1H,d，H-6)，5.47(1H,d，H-1'')，5.39(1H,d)，5.10(1H,d)，5.00(1H,s)，4.31(1H,t,)，3.17-3.60(6H,m)。13C-NMR(DMSO，500MHz)δ：177.59(C-4)，164.23(C-7),161.33(C-5)，160.05(C-4')，156.51(C-9)，156.41(C-2)，133.29(C-3)，131.02(C-2',6')，121.02(C-1')，115.24(C-3',5')104.13(C-10)，100.96(C-1'')，98.82(C-6)，93.79(C-8),77.58(C-5'')，76.51(C-3'')，74.33(C-2'')，69.99(C-4'')，60.94(C-6'')。将该化合物的波谱数据与文献报道[3]数据比较，二者数据基本一致。故鉴定化合物6为紫云英苷(Astragalin)。

化合物7-1,8-松油二醇：淡黄色晶体(甲醇)，mp：116-117℃。1H-NMR(CD3OD，500MHz)δ：1.77(2H,d,H-2,6)，1.72(2H,d,H-3,5)，1.45(2H,td,H-3,5)，1.28(1H,dt,H-4)，1.22(1H,d,H-6)，1.19(3H,s,H-1a)，1.16(1H,d,H-2)，1.14(6H,s,H-8,9)。13C-NMR(CD3OD，500MHz)δ：73.22(C-7)，71.48(C-1)，50.16(C-4)，41.28(C-3,5)，27.22(C-8,9)，26.12(C-2,6)，25.43(C-1a)。将该化合物的波谱数据与文献报道[4]数据比较，二者数据基本一致。故鉴定化合物7为1,8-松油二醇(Terpin)。

[1]Hall E S, Mccapra F, Scott A I. Biogenetic-type synthesis of the calycanthaceous alkaloids[J]. Tetrahedron, 1967, 23(10):4 131-4 142.

[2]Tokyama T, Daly J W. Steroidal alkaloids (batrachotoxins and 4β-hydorxybatrachotoxin)，"indole alkaloids"(calycanthine and chimonanthine) and a piperidinyldipyridine alkaloid (noranabasamine) in skin extracts from the Colombian poison-dart Frogphyllobates terribilis(Dendrobatidae)[J]. Tetrahedron, 1983, 39(1):41-47.

[3]郭澄，韩公羽，苏中武.南方菟丝子化学成分的研究[J].中国药学杂志,1997,32(1):8-10.

[4]Atlas of spectral data and physical constants for organic compounds 2ed, t34, 1975.

StudiesonChemicalConstituentsofChimonanthusNitensOliv*

SHURen-geng**,ZHENGYing,ZHANGDi

SchoolofPharmacy,JiangxiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Nanchang330004

Objective: To investigate the chemical constituents of Chimonanthus nitens Oliv. Method: The chemical components were isolated and purified by silica gel column, Sephadex LH-20 column and preparative thin chromatography. The chemical structures were identified by their physical properties and spectral analyses of NMR. Result: Eight compounds were isolated and identified as d-Calycanthine(1), 6,7-Dimethoxycoumarin(2), Isoscopletin(3), Quercetin(4), Kaempferol(5), Astragalin(6), terpin(7). Conclusion: Compounds 6 and 7 were obtained from the genus for the first time.

Chimonanthus Nitens Oliv.; Chemical Constituents; Structure Identify

“十一五”支撑计划资助项目(项目编号：2006BAI06A01-01)；国家自然科学基金资助项目(项目编号：81360631)；江西省教育厅资助项目(项目编号：GJJ08326)。

**通讯作者：舒任庚，男，教授，硕士研究生导师，Tel:0791-87118993。

R284.2

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2013-06-13)