RhD血型鉴定在临床输血中的应用

张晓飞

为有效防止急慢性溶血性输血反应以及新生儿溶血病的发生，确保临床输血安全，降低输血反应率，减少医疗纠纷。自2003年起，本院以及来本院申请输血和备血的患者除继续进行ABO血型鉴定外，还同时进行了RhD血型鉴定。现将4146例RhD血型鉴定结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2012年1月至6月期间在本院申请备血、输血的各科患者及新生儿共4146例。其中内科963例，外科1394例，妇产科2340例，新生儿17例。所有标本均为新鲜采集的血液。所用试剂RhD(lgM)血型定型试剂(单克隆抗体)，RhD血型鉴定卡(微柱凝胶)。分别购自上海血液生物医药有限责任公司和长春博迅生物技术有限责任公司。均在有效期内使用。使用FYQ型免疫微柱孵育器(长春博研科学仪器有限责任公司生产)。

1.2 方法 对送检血样同时采用微柱凝胶法及试管法进行RhD血型鉴定。(1)红细胞标本的制备:将采集的标本配制成0.5%～8%和3%～5%红细胞生理盐水悬液。(2)微柱凝胶法:①将微柱凝胶试剂卡编号;②将待检的红细胞标本50μl加入编号的微管中;③即刻使用微柱凝胶专用离心机离心5 min，2 min 900rpm;3 min 1500rpm;④取出肉眼观察结果。⑤结果判定标准按试剂盒说明书。阳性:红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或胶中。反应强度:特异性红细胞抗原抗体复合物位于凝胶表面为强阳性反应，复合物在胶中为弱阳性反应;愈靠近胶底部颗粒愈小，反应愈弱。阴性:被检红细胞抗原无相应的抗原与抗体结合，不出现特异性抗原抗体复合物，红细胞沉于微柱凝胶的尖底部。(3)试管法:①加一滴抗D试剂于预先标记号的试管中;②再加一滴约3%～5%的被检红细胞悬液于试管中，混匀。③以15 s 3400rpm离心;取出检查是否溶血(溶血可能是阳性结果，或者是细菌污染)，然后轻轻摇晃，使细胞再悬浮起来。观察凝集情况，并立即记录结果。必要时可借助显微镜。凝集者为阳性，若是阴性结果，需在37℃孵育15～30 min，然后再离心观察结果，结果若呈阴性需进一步确认是否是弱D。

2 结果

本组4146例中检出Rh(D)抗原阴性者9例，男2例，女7例;均为汉族，Rh(D)阴性率为0.22%，9例Rh(D)阴性者，

3 讨论

人类Rh血型系统自1939年被发现以来，因可导致新生儿溶血病(HDA)、溶血性输血反应而成为红细胞血型中仅次于ABO的重要系统［1］。Rh系统内有45种不同的抗原，D抗原最为重要，根据红细胞上D抗原的有无，可分类红细胞为Rh阳性或Rh阴性。大约85%白种人为Rh阳性(中国人约为99.6%)，其余 15% 为 Rh 阴性(中国人约为 0.4%)［2］。RH血型系中，D抗原的抗原性为最强，约50% ～75%的Rh阴性的个体，通过输血和妊娠，可受D抗原阳性红细胞免疫而产生抗D，因此在输血治疗和新生儿溶血病的诊断、治疗中，D抗原的重要性仅次于A和B抗原［3］。

RH血型系在输血治疗和胎母免疫引起的新生儿溶血病的临床医学中有着很重要的意义。近年来，临床上因Rh血型不合引起的输血反应和母婴Rh血型不合的妊娠所引起的新生儿溶血病时有报道，因此，在血库的实践工作中对患者进行ABO血型鉴定的同时也进行RhD血型鉴定，并将其作为血库的常规检查项目是十分必要的，因为医院血库一般没有贮备和制备Rh阴性血液的条件而血站对Rh阴性血液的贮备也是少量的。又由于我国汉族人群中RhD阴性者仅占0.2%～0.5%左右，这就导致了RhD阴性血源紧张的现实，如果在术前2 h(急诊除外)检测受血者的Rh抗原和ABO血型，一旦发现Rh阴性，可由充足的时间寻找血源，对危、重、急患者以及需要输血治疗的RhD阴性患者，在初次输血时，给予RhD相配合的血液，以避免多次输血后产生同种抗体，给今后的输血工作带来困难和风险，对于保证患者的安全输血具有深远的意义。

总之，RhD血型系统在临床输血中应受到医务人员的高度重视，将Rh血型鉴定作为血型筛查的常规检验，对有效预防溶血性输血反应和新生儿溶血病的发生以及临床输血安全具有重要意义。

［1］陆松松，陈静娴.Rh(D)变异体的研究进展.临床输血与检验，2010，12(4):374-377.

［2］高峰.临床输血与检验.人民卫生出版社，2007，7:71.

［3］王培华.输血技术学.人民卫生出版社，2002:155.