四川省工作犬心丝虫感染率的调查

叶青华，陈 涛

（1.成都农业科技职业学院，四川 成都 611130；2.成都美宝畜禽研究所，四川 成都 610066）

犬心丝虫病又名犬恶丝虫病，是由丝虫科恶丝虫属的丝虫成虫寄生于犬的右心室、肺动脉（少见于胸腔、支气管）内，导致犬循环系统、呼吸系统、泌尿系统等遭受损害，引起循环障碍、呼吸困难及贫血等临床症状的一种寄生虫病。成虫雌虫产出的幼虫——微丝蚴进入并寄生在犬外周血液中，当蚊虫等中间宿主在患犬身上吸血时，微丝蚴就进入到蚊虫体内，并逐渐发育成具有感染性的幼虫。当正常犬被含有微丝蚴的蚊虫叮咬时，微丝蚴就顺着吻管进入到犬体内，这样正常犬只就被感染。

本次试验首次在大陆地区使用商品化的犬心丝虫ELISA快速检测试剂盒进行检测，在早期临床诊断和预防上具有重大意义。该病初期没有临床症状，但会逐渐导致犬的运功能力及生理机能下降，这对工作犬而言是至关重要的，特别是防爆犬、追踪犬，工作能力的下降就预示着该犬应被淘汰，而工作犬特别是警犬的选育及训导需要花费大量的人力物力，犬只的淘汰对公安机关和厂矿企业的损失很大。目前，四川省内工作犬、伴侣犬的心丝虫病流行状况还未见报道，人们对此病没有引起重视，笔者所调查的工作犬全部没有采取过预防措施。而该病如果已有大量成虫感染，则预后不良，严重的死亡率可达50%。因此，笔者就四川省工作犬心丝虫的感染率进行了跟踪调查。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 血样采集 在四川省采集成都、德阳、绵阳、乐山、宜宾、阿坝六地共128只工作犬（包括警犬和护卫犬）的血样。犬种包括德国牧羊犬、拉布拉多犬、马林诺斯犬、昆明犬、罗威纳犬、史宾格犬、藏獒，年龄从8月龄到7岁半不等，在下午5点～9点之间进行前肢静脉采血。犬只具体状况如表1所示。

表1 试验犬只来源及数量

1.1.2 试剂 血液稀释液：从韩国Animal Genetics公司购入，批号 1102026。

ELISA心丝虫快速检测试剂盒（Anigen Rapid Heartworm Ag Test Kit）：批号 1102026，从韩国Animal Genetics公司购入。

1.1.3 试液 0.1%美蓝染色液：精确称取1g分析纯美蓝放入250mL容量瓶中，加入蒸馏水至刻度即得。用于犬心丝虫微丝蚴的染色。

2%甲醛固定液：精确量取分析纯甲醛5mL放入250mL容量瓶中，加蒸馏水至刻度即得。用于犬微丝蚴的固定。

1.1.4 仪器 离心机：上海手术器械厂生产；显微镜：日本奥林巴斯公司生产；泡沫低温箱：自备。

1.2 试验方法

1.2.1 ELISA快速检测法 将快速检测试剂盒以及已放入2滴抗凝剂的试管编号，并与即将采血的犬只相对应。每只犬采集2mL前肢静脉血放入试管内混匀，马上滴30μL（使用专用一次性滴管）左右全血在试剂盒检测孔内，再滴入专用稀释液3滴（90μL），放置于桌面上，5～10min后观察结果。试验结果见表2。

表2 ELISA试剂盒检测犬心丝虫的结果 只

1.2.2 改良Knott′s法 将静脉采集的剩余血液放入低温泡沫箱中保存，再返回实验室，取1mL血样加入2%福尔马林9mL充分混合，以2500r/min离心20min，弃上清液，将沉淀1滴与0.1%美蓝1滴染色后加盖玻片镜检，低倍镜下发现微丝蚴，转至高倍镜下检查。结果见表3。

表3 改良Knott′s法检测犬心丝虫的结果 只

2 结果与分析

通过对128头工作犬的血样用改良Knott′s法进行检测，结果发现有7头犬的微丝蚴检测为阳性，而通过ELISA快速检测试剂盒检测到的阳性犬只有26只。ELISA快速检测试剂盒的敏感度为96%,准确率为100%；而Knott′s法的准确率为100%，但敏感度很低，以ELISA检测的阳性数量计，其敏感度仅为28.04%，可能与血液采集时间有很大的相关性。

通过分析得知，犬年龄在5岁以上的感染率相对较高，达53.85%，2～5岁犬次之，感染率为23.33%，8月龄～2岁犬感染率最低，为9.09%。成都地区的感染率为20.75%，其中2～5岁犬感染率为22.22%，5岁以上犬感染率为40.00%；乐山地区的感染率为20.00%，其中2～5岁犬感染率为0%，5岁以上犬感染率为100%；德阳地区的感染率为18.75%，其中2～5岁犬感染率为25.00%，5岁以上犬感染率为50.00%；绵阳地区的感染率为21.88%，其中2～5岁犬感染率为28.57%，5岁以上犬感染率为66.67%；宜宾地区的感染率为20.00%，其中2～5岁犬感染率为33.33%，5岁以上犬感染率为50.00%；阿坝地区的感染率为0。

3 结论与讨论

从试验结果看，除阿坝州外其余地区的感染率没有差异。阿坝州气温低而日照强烈，7月的平均气温为11～17℃，全年无霜期少于90d，该地区基本不适合传播媒介的生存，因此其感染率为0属于正常，与该病的流行病学特点相符合。

该试验结果与杨锋在简阳地区的试验结果（感染率为80%）和饶忠秀在重庆壁山的试验结果（感染率为61.12%）相差比较大，分析其原因主要有：

（1）ELISA快速检测试剂盒是通过雌性成虫制作抗原进行检测的，如果犬只仅单独感染雄性成虫，则其检测结果为阴性。

（2）其他两次试验检测的都是农村家犬，其生活环境相对比较恶劣，蚊虫较多，感染的机率较大。而本次试验的试验动物全部为警犬和护卫犬，所有犬只均有专门的犬舍，也有专门的训导员进行护理，卫生状况非常好，因此其感染几率相对较低。

（3）其他两次试验均没有进行犬只年龄的划分，只是进行笼统计算；而本次试验的犬只均有年龄档案，严格进行了年龄划分，因而5岁以上的犬只与文献报道的两次试验结果相对接近。

四川西面是高原，气温低而日照强烈，7月的平均气温为11～17℃，全年无霜期少于90d，该地区基本不适合传播媒介的生存。攀西地区1月气温8～13℃，7月平均气温22～26℃，无霜期达 250～280 d，年降水量1 000mm，该地区气温适宜，但湿度偏小。四川盆地属于亚热带湿润季风气候，比同纬度的长江中下游偏高2～4℃，具有冬暖、春早、夏热、湿度大、云雾多、日照少、霜雪少、昼夜温差小等特点，1月平均气温3～8℃，7月平均气温 25～39℃，全年无霜期 280～340 d，年降水量800～1200mm；西部峨眉、雅安一带受地形影响，雨量丰富，年降水量达1 800 mm，这个区域是非常适合传播媒介生存的地方，其代表区域是成都。成都市年平均气温16.2℃，年极端最高气温37.3℃，年极端最低气温为-5.9℃，最热时间出现在7～8月，月平均气温为25.4℃，最冷出现在1月，稳定通过20℃的初终日期为5月下旬，通过10℃的初终日期为3月中旬到下旬。这种气候条件下，传播媒介从4月就开始出现，到10月中旬左右才会消失。从气象资料和文献报道并综合此次试验结果进行分析，四川盆地确实是犬心丝虫病的流行区域。1990年以前，四川盆地内的犬只与盆地外的流动几乎没有，1992年以后流动虽然增大，但也只局限在中等以上城市。四川盆地内农村家犬之所以有如此高的感染率，其外来因素基本可以排除，主要原因还是在于本地犬只相互感染。

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