苍辛滴鼻液质量标准研究

左艳丽 赵 静 白 娟

（1.铜陵市西联乡卫生院，安徽 铜陵244100；2.肥西精神病医院，安徽 合肥 231202；3.安徽省医学科学研究院，安徽 合肥 230061）

苍辛滴鼻液是中国医院制剂规范中收载的制剂，是由苍耳子、辛夷花、白芷等中药和盐酸麻黄碱及苯甲酸钠组成的中西药复方制剂。临床用于治疗副鼻窦炎等症。原标准仅有制法，没有质量控制标准，为有效地控制该制剂的质量，依据其化学成分及其性质和相关文献，本实验制定了其质量标准，对方中苍耳子、盐酸麻黄碱进行了薄层色谱鉴别，采用HPLC法测定其盐酸麻黄碱的含量，并对其含量测定方法进行了研究。

1．仪器、试药与样品

Waters600型高效液相色谱仪（美国Waters公司）；UV 996型紫外检测器（美国）；AD-2型百万分之一电子天平（美国PE公司）；BP210S型万分之一电子天平（德国赛多利斯）；高效硅胶G高效薄层板（烟台化工研究所）；盐酸麻黄碱对照品（中国药品生物制品检定所，批号1214—200001，供含量测定用）；苍耳子对照药材（中国药品生物制品检定所，批号121168—200503）；苍辛滴鼻液（批号：101205，101211，101218）和阴性制剂均由安徽医科大学第一附属医院制剂中心提供；乙腈（色谱纯）；水（重蒸水）；其它试剂均为分析纯。

2．方法与结果

2.1 薄层色谱鉴别

（1）苍耳子[1]的鉴别 分别取本品、阴性制剂各50ml，用水饱和的正丁醇提取3次，每次30ml，合并正丁醇提取液，用水洗涤2次，每次30ml，弃去洗液，正丁醇液水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品和阴性对照溶液。另取苍耳子对照药材2g，加甲醇25ml，加热回流20分钟，滤过，滤液浓缩至约2ml,作为对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述溶液各3μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇—醋酸乙酯—水（4:1:5）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的褐色斑点。阴性对照无干扰。见图1。

图1 苍耳子鉴别薄层色谱图

（2）盐酸麻黄碱的鉴别 分别取本品、阴性制剂各10ml，加浓氨0.5ml，用三氯甲烷提取2次，每次10ml，合并提取液挥干，残渣加甲醇10ml使溶解，作为供试品和阴性对照溶液。另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述溶液各3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷—甲醇-浓氨（20：5：0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的红色斑点。阴性对照无干扰（见图2）。

图2 盐酸麻黄碱鉴别薄层色谱图

2.2 盐酸麻黄碱的含量测定

（1）色谱条件与系统适用性试验 色谱柱：Shim-PackCLC ODS柱（150×4.6mm，5μm）；流动相：乙睛-0.1%磷酸溶液（10：90）；柱温：25℃；流速：1.0ml/min；检测波长：207nm；进样量20μL；理论塔板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于于3000；分离度应大于1.5。

（2）对照品溶液的制备 取盐酸麻黄碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含100μg的溶液，即得。

（3）供试品溶液的制备 取本品，摇匀，精密吸取2.0ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

（4）阴性对照溶液的制备 取缺盐酸麻黄碱的缺味阴性制剂，按“供试品溶液的制备”项下的方法处理，即得。

（5）专属性实验 精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各20μL，注入液相色谱仪测定，结果盐酸麻黄碱与其它成分均能很好地分离，供试品中盐酸麻黄碱保留时间与对照品一致，阴性对照无干扰，结果见图3。

图3 苍辛滴鼻液HPLC 色谱图

（6）线性关系考察 精密吸取盐酸麻黄碱对照品溶液（0.1813mg/ml）2.0、4.0、6.0、8.0ml分别置10ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。分别精密吸取20μl，依次注入液相色谱仪中，按上述色谱条件测定，以盐酸麻黄碱的浓度为横坐标，相应的峰面积为纵坐标，计算，得线性回归方程为：Y=45076X+145856（r=0.9996，n=5）。结果表明：盐酸麻黄碱浓度在36.26μg/ml～181.30μg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系。

（7）精密度试验 精密吸取同一供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，测定。重复进样6次，测定峰面积值，结果RSD为1.23%，表明本法精密度良好。

（8）重现性实验 取同一批号的样品6份，分别按上述方法制备、测定盐酸麻黄碱含量，结果RSD为1.06%，表明本法重现性良好。

（9）稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液，分别间隔0，2，4，6，8h后依法测定，结果盐酸麻黄碱峰面积RSD为1.54%，表明供试品溶液在8h内稳定性良好。

（10）回收率试验 精密量取盐酸麻黄碱含量为4.995mg/mL的供试品1.0mL，共6份，置100ml量瓶中，分别精密加入2.0550mg/mL的盐酸麻黄碱对照品溶液2.0mL、2.0mL、3.0mL、3.0mL、4.0mL、4.0mL，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，按含量测定项下的方法依法测定，计算回收率，结果表明加样回收率较好，结果见表1。

表1 加样回收率试验结果

（11）样品测定 取三批样品，按“2.2.3”项下制备样品溶液，按上述色谱条件测定，结果见表2

表2 样品测定结果（n=3）

3．讨论

3.1通过薄层鉴别研究，苍耳子、盐酸麻黄碱的鉴别不仅专属性强且重现性好，可作为苍辛滴鼻液制剂的定性指标，同时对方中的辛夷和白芷进行了定性研究,由于干扰大且专属性差而未予采用。

3.2采用HPLC法测定盐酸麻黄碱的含量,关于盐酸麻黄碱的HPLC含量测定方法，文献报道很多[1,2]，大多采用210nm作为测定波长，本试验通过对盐酸麻黄碱的紫外扫描发现盐酸麻黄碱的最大吸收波长在207nm处，且此处干扰小，因此选定为测定波长。

3.3苍辛滴鼻液为临床常用制剂，用于治疗副鼻窦炎等症，疗效显著，但一直以来未建立质量控制标准，从而难以保证其临床疗效，本研究建立的TLC和HPLC法专属性强、灵敏度高、重现性好，可用于苍辛滴鼻液的质量控制，使之安全、有效。

[1]中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典[Z].北京:化学工业出版社，2005.111.

[2]宋志钊，陈昭. 高效液相法测定滴通鼻炎水中盐酸麻黄碱的含量[J].广西医学，2008，30（4）：548-549.

[3]周征，魏京京.HPLC 法测定小儿化痰止咳冲剂中盐酸麻黄碱的含量[J].药物分析杂志，2006，26（1）：132-133.