赵琴 胡利清 黄明星 陈兴 余崇芬
全自动尿沉渣分析仪具有操作规范化、检测的自动化、速度快、重复性好、一次可以检测多个参数等优点。但由于尿液成分的多样性、复杂性以及仪器本身检测的局限性,常导致某些检测项目存在一定程度的结果误判,尤其是孕妇尿液分析中常出现假阳性、假阴性结果,比正常人群假阳性率要高。如果不予以及时发现和纠正将会误导临床对疾病的诊断和治疗,目前,国内外对UF-500i尿液分析仪的影响因数研究的报道很多,但是在孕妇这个人群中的影响因数研究尚未有过报道!因此,我们将UF500i尿沉渣分析仪在正常人与孕妇人群中检测结果进行对比分析,同份标本再与显微镜镜检法的检测结果进行对比观察,统计仪器的误判率,分析UF-500i在孕妇人群中检测结果的影响因素,提出结果误判的解决对策,对保证检验结果的准确性具有重要价值。
1.1 材料 UF-500i型尿沉渣分析仪及其配套质控物,以及鞘液、染液、稀释试剂均购自日本Sysmex公司;泰利特500尿液分析仪及配套尿十联干化学试纸条购于西门子医疗诊断设备有限公司,其质控品由BIO-RAD公司提供;Olympus显微镜。
1.2 标本来源随机收集珠海市妇幼保健院门诊和住院孕妇中段尿标本100份为实验组,正常人的中段尿100份为对照组。
1.3 实验方法 用一次性塑料杯随机收取孕妇中段尿,充分混匀后分为2管,第一管用于干化学分析,第二管用UF-500i尿沉渣分析仪自动吸样,做尿沉渣分析,剩余尿液离心后取沉渣进行显微镜检。
1.4 质控 在进行标本检测前,用UF-500i尿沉渣分析仪原装质控品做室内质控,结果在控后再检测标本。
1.5 统计学方法 实验结果均用SPSS 13.0软件进行统计分析,采用χ2检验的Mann-Whitney检验进行比较,P<0.05差异有统计学意义。
2.1 UF-500i结果 以RBC:0~27/UL;WBC:0~36/UL;管型:0~3/UL,上皮细胞:0~40/UL,结晶0~10/UL,酵母样细胞:0~10/UL,细菌:0~8000/UL为标准,超过此范围为阳性。镜检结果以RBC:0~3/HP,WBC:0~5/HP,管型:0~1/全片为标准,超过此范围为阳性。对照组两种方法检测结果,见表1。
2.2 孕妇组两种方法检测结果,见表2。
2.3 孕妇的各参数假阳性率与正常对照组各参数假阳性率的比较见表3。
表1 对照组两种方法检测结果分析
表2 孕妇组两种方法检测结果分析
表3 孕妇与正常人对照组的各阳性率分析(例,%)
3.1 证实孕妇尿液分析中存在假阳性率且高于正常人群组。通过上述数据的研究和调查发现UF500i尿沉渣分析仪在孕妇尿液分析中的假阳性率高于正常人群组的阳性率,由于妊娠期受雌激素、孕激素的影响,特别是孕酮的影响,输尿管、肾盂、肾平滑肌易扩张,其蠕动力减弱,尿液易潴留等原因,导致一些参数的假阳性率增高,因此在孕妇人群组的尿液分析中出现干化学与UF500i尿沉渣分析仪不相符时应引起我们检验人员的高度重视和进行显微镜方法复查,在孕妇人群组中如果出现误诊和漏诊,误导临床对疾病的诊断和治疗将给母婴带来非常大的危害!
3.2 导致假阳性率的UF-500i原理分析。UF-500i尿沉渣分析仪是利用流式细胞技术和电阻抗技术根据尿液中各类有形成分产生前向散射光脉冲和荧光脉冲的强度,持续时间及电阻抗的大小来区分的,有些成分之间染色性、形态、大小等方面有相似之处,因此UF-500i还不能严格区分各类成分。
3.2.1 红细胞的检测 干化学法测定RBC既可测定完整的RBC,又可测定游离血红蛋白,具有过氧化物酶活性的物质也可干扰测定产生假阳性,肌红蛋白,菌尿可干扰测定结果,产生假阳性。UF-500i检测RBC呈阳性而常规镜检阴性者,其原因可能是:①结晶如草酸钙结晶等造成的假阳性数量最多,特别是尿液放置时间过久后,草酸钙结晶会呈哑铃型,其形态与RBC形态很相似。UF-500i尿沉渣分析仪是通过在稀释液中加入螯合剂然后加温处理,此方法可消除尿液标本中的无定形结晶如磷酸盐、尿酸盐[1]等。但通过试验发现,部分无定形结晶仍可导致假阳性的产生,说明该仪器处理方法并不能完全消除所有尿液样本中无定形结晶对红细胞计数的干扰。另外,冬季室内外气温偏低也有影响。②UF-500i将脱落的霉菌孢子、细菌团块、脂肪球,特别大小和红细胞相仿的东西计数为RBC。在实际操作中如应用干化学法筛选结合UF-500i对RBC精确计数,对菌尿标本结合显微镜检排除假阳性,即可提高RBC检测的灵敏度和特异性。
3.2.2 白细胞的检测 在白细胞检测中造成假阳性率的原因主要是UF-500i将小圆上皮细胞计数为白细胞而孕妇的上皮细胞又比较多,还有肾小管上皮细胞、裸核EC、盐类结晶的析出,精子、滴虫等均可造成WBC假性增高。由于白细胞与肾小管上皮细胞的大小、核物质含量相似,仪器进行分析时难以将其区分,因此会影响白细胞的检测。干化学阴性而镜检为阳性是由于干化学法测定白细胞是通过试纸带上的吲哚酚酯与粒细胞浆内的二酯酶作用后产生颜色变化而测定,淋巴细胞浆内无此成分,干化学法无法检测淋巴细胞。故干化学法为阴性镜检为阳性,因此对白细胞的检测应以显微镜为准[2]。
3.2.3 管型的检测 UF-500i检测管型的假阳性率是由于把尿中黏液丝,有形杂质包裹的上皮细胞、类管型物质误认为管型造成假阳性。显微镜法受取样量,镜检液体厚度,镜检视野数及其他人为因素影响。因此建议用UF-500i较高的灵敏度进行过筛,对阳性标本用显微镜进一步确诊。
3.2.4 结晶的检测 UF-500i对于结晶的检测结果的假阳可能由于杂质的存在而误判为结晶;其假阴性见于少量的小圆形草酸钙结晶被分类到红细胞成分中。
综上所述,尽管UF-500i尿液分析仪能快速、准确地测定尿中的多项参数,但因尿中有形成分种类较多,形态差异,仪器自身原理的局限性,标本的采集、处理等因素均影响尿中有形成分的测定。UF-500i尿沉渣分析仪优点是,具有操作规范化、检测的自动化、速度快、重复性好、一次可以检测多个参数等优点,一定程度上可以取代显微镜观察,人工还能对结果进行审核修饰从而提高结果的准确性。但仍不能完全替代人工镜检,除了有些结晶和霉菌容易被误认为红细胞以外,像肿瘤细胞、胱氨酸和酪氨酸结晶、脂肪滴或药物结晶以及各类管型的分型等还是需要依靠人工镜检[3-5]。特别当它们结果不相符时,应该以镜检法结果为准,用镜检法结果修正尿有形成分定量分析结果(修正方法 1个/μl=0.18个/高倍视野)[6-7]。所以,应将沉渣法结果、化学法检测结果、镜检法结果、散点图及直方图并结合临床一起分析,综合报告,总之,UF-500i型全自动尿沉渣法分析仪的性能有待于进一步提高,但是还不能完全代替显微镜镜检。利用化学法与沉渣法进行筛选,再联合镜检法检测是目前尿常规检测的最好方法。
[1]从玉隆,马骏龙.当代尿液分析技术与临床.北京:国际科学技术出版社,1998:85-105.
[2]马芳洁.IQ-200尿沉渣分析仪检测尿有形成分结果误判分析及对策.中外健康文摘,2011,8(16):71-72.
[3]Hughes C,Roebuck MJ.Evaluation of the IRIS 939 Udx flow microscope as a screening system for urinary tract infection.J Clin Pathol,2003,56:844-849.
[4]Wah DT,Wises PK,Butch AW.Analytic performance of the IQ200 automated urine microscopy analyzer and comparison with manual counts using Fuchs-Rosenthal cell chambers.AM J Clin Pathol,2005,123:290-296.
[5]Wargotz Es,Hyde JE,KarcherDS,et al.Urine sediment analysis by the yellow IRIS automated urinalysis workstation.Am J Clin Pathol,1987,88:746-748.
[6]丛玉隆,秦小玲.既要发展现代技术也要继承经典方法.中华检验医学杂志,2005,28(2):129-130.
[7]丛玉隆,马俊龙.尿液有形成分镜检与自动化检测方法学利弊和互补分析.中华检验医学杂志,2009,6(6):609-611.