HPLC法测定复方氨酚烷胺胶囊中氯苯那敏的含量

刘杰彦 雷双燕 涂小玲 唐芳

HPLC法测定复方氨酚烷胺胶囊中氯苯那敏的含量

刘杰彦 雷双燕 涂小玲 唐芳

目的 建立复方氨酚烷胺颗粒中马来酸氯苯那敏的含量的测定方法。方法 色谱柱：ZORBAX EclipseXDB-C18(4.6 mm×150 mm，5 μm)，流动相：乙腈-0.2%十二烷基磺酸钠溶液 (60∶40)(0.1%磷酸调节pH值至3.0)，检测波长215 nm。结果 马来酸氯苯那敏在30.8～154 μg范围内线性关系良好，回归方程为A=2155.2C+512.87，相关系数r=0.9992。平均回收率为99.4%，RSD为0.29%。结论 本方法简便、灵敏、准确。

复方氨酚烷胺胶囊;马来酸氯苯那敏;高效液相色谱

复方氨酚烷胺胶囊主要用于缓解普通感冒或流行感冒引起的发热、头痛、咽痛、鼻塞、打喷嚏等症状，效果较好，临床上得到了广泛的应用，但其部颁标准中仅对乙酞氨基酚和盐酸金刚烷胺的含量进行了控制［1］。马来酸氯苯那敏具有较强的抗组织胺作用，可引起嗜睡及轻度抑制中枢神经系统，严重者则表现为室性心动过速，甚至心室纤颤［2］。为了更好地保证药品质量，有必要对该品种中的马来酸氯苯那敏进行含量测定。我们参照相关文献，制定了本品马来酸氯苯那敏的测定方法，取得满意效果。

1 仪器与试剂

WATERS 515高效液相色谱仪，配2996 PAD检测器，717plus自动进样器，Empower工作站;马来酸氯苯那敏对照品(中国药品生物制品检定所购买)，复方氨酚烷胺胶囊为市售品，乙腈为色谱纯，水为重蒸水，其它试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：ZORBAX EclipseXDB-C18(4.6 mm×150 mm，5 μm)，流动相：乙腈-0.2%十二烷基磺酸钠溶液(60∶40)(0.1%磷酸调节 pH值至3.0);流速为1.0 ml/min;进样量：20 μl。检测波长215 nm，柱温为30℃。理论板数以各组分峰计均不低于3000，各色谱峰的分离度均符合要求。(色谱图1B中马来酸峰在前，氯苯那敏峰在后)。

2.2 对照品溶液制备

精密称取105℃干燥至恒重的马来酸氯苯那敏对照品适量，加流动相溶解并稀释制成每1 ml中含马来酸氯苯那敏80 μg的溶液，作为对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备

取胶囊20粒，求得平均粒重，将内容物研细，精密称取适量(相当于含马来酸氯苯那敏4 mg)置50 ml量瓶中，加流动相适量，振摇使溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，作为供试品溶液。

2.4 阴性对照液的制备

按处方比例及制备工艺制备的不含马来酸氯苯那敏的阴性对照样品，按供试品溶液制备方法制备，为阴性对照溶液。

2.5 系统适用性试验

分别精密量取阴性对照液、对照品溶液、供试品溶液各3 ml，置三个50 ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，取20 μl注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，结果见图1。空白对照溶液色谱图中无与氯苯那敏色谱峰保留时间相同的色谱峰，说明处方中其它成分对氯苯那敏的测定无干扰。

图1 马来酸氯苯那敏的HPLC图谱

2.6 线性关系考察

精密称取105℃干燥至恒重的马来酸氯苯那敏对照品约16 mg置50 ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取 1.0，2.0，3.0，4.0和 5.0 ml置于10 ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，精密吸取上述对照品溶液各20 μl注入高效液相色谱仪，测定，以色谱峰面积为纵坐标、浓度为横坐标，绘制标准曲线，得线性回归方程为A=2155.2C+512.87，相关系数r=0.9992。结果：马来酸氯苯那敏在30.8～154 μg范围内线性关系良好。

2.7 精密度试验

精密吸取同一份马来酸氯苯那敏对照品溶液重复进样6次，测定氯苯那敏的峰面积，计算峰面积值的RSD=0.92%，结果表明仪器的进样精密度良好。

2.8 稳定性试验

取同一批供试品溶液适量置室温下，每间隔2 h测定1次，连续测定6次。结果马来酸氯苯那敏色谱峰面积的RSD分别为0.56%(n=6)。表明该药物溶液在12 h内稳定性良好。

2.9 重复性试验

取同一批号的样品6份，按供试品溶液制备方法制成6份溶液，并按以上色谱条件测定，测得氯苯那敏平均含量为标示量的99.0%，RSD为0.8%。

2.10 加样回收率试验

精密称取己知含量的样品适量(批号：20110301，含马来酸氯苯那敏为标示量的99.0%)，置25 ml量瓶中，另精密称取105℃干燥至恒重的马来酸氯苯那敏对照品25.2 mg置25 ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密量取0.8、1.0、1.2 ml置上述供试品量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过。照样品测定项下方法测定，结果见表1。

表1 加样回收率结果(n=9)

由表1可知，平均回收率为99.4%，RSD为0.29%，表明准确度良好。

2.11 三批供试品马来酸氯苯那敏含量测定

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液，按上述色谱条件测定，以外标法计算，结果见表2。

表2 氯苯那敏含量测定

3 讨论

3.1 供试品溶液和对照品溶液中马来酸氯苯那敏呈解离状态存在，故在色谱图中出现有马来酸峰(如图1B)。因此在马来酸氯苯那敏的含量测定时是以氯苯那敏峰面积［3］来计算的。

3.2 曾试用马来酸氯苯那敏的最大吸收波长作为检测波长，但灵敏度很低。还曾试用200、205 nm等波长作为检测波长，马来酸氯苯那敏的吸收度增大，但基线噪声明显增大。在215 nm波长处，基线噪声不是很大，故选215 nm作为波长。

3.3 通过对本文流动相体系和文献［4］磷酸二氢钾溶液-甲醇体系流动相的比较，发现乙腈-0.2%十二烷基磺酸钠溶液(60∶40)(0.1%磷酸调节pH值至3.0)体系所得色谱图，马来酸氯苯那敏的峰形优，分离效果好，保留时间适中。

［1］地标升国标第三册：195

［2］何鸽飞，张顺芝，何仲春.复方氨酚烷胺致精神症状1例.药物流行病学杂志，2007，16(2)：120.

［3］南楠，朱霁虹，等.HPLC法测定万辉化痰止咳露中磷酸可待因、盐酸麻黄碱和马来酸氯苯那敏的含量.药物分析杂志，2000，(1)：7.

［4］罗萍，曾昭宁，罗灼雨.HPLC法测定复方氨酚烷胺胶囊中马来酸氯苯那敏的含量.中国药业，2006，7(1)：37-38.

425000 永州市中心医院